Сколько никотина в бонд компакт – Telegraph
Сколько никотина в бонд компакт«Vegas» — это команда профессионалов, ответственно подходящих к своему делу!
Качество:
Мы проделали большую работу и постоянно улучшаем качество нашего сервиса.
Надежность:
За время существования мы заработали репутацию надежного и стабильного поставщика.
——————————————————————————————
Купить через Telegram
——————————————————————————————
Отзывы:
Александр Россия 31.200.192.* (19 апреля 2019 | 16:16)
Отличный обменник, всем рекомендую !Только, что совершал покупку криптовалюты, всё прошло быстро и качественно !
Roman Unknown 185.226.112.* (15 апреля 2019 | 10:12)
Менял USD на BTC все четко и быстро, мгновенное пополнение, хорошая работа тех. поддержки.
Богдан Россия 188.113.45.* (15 апреля 2019 | 23:12)
Отличный сервис,в частности менеджер Станислав,очень быстро решил мою проблему,всем советую проводить здесь обмены
Один из магазинов в Лондоне, стоявший на Бонд-Стрит, посетил король Альберт. Будучи ярым поклонником курения, а в особенности продукции, производимой Моррисом, король решил, что магазин со столь впечатляющим ассортиментом и отменным качеством табака заслуживает почетного титула. Бутик табачных изделий получил звание Королевского торговца, один из видов сигарет стал называться по имени улицы, а на упаковке появился фирменный знак короны. Компания была выкуплена американцами, и теперь все чаще можно услышать версию о происхождении названия популярной марки от имени знаменитого агента В современности только королевская корона осталась прежней и напоминает об интересной истории знаменитого табака. Несмотря на многочисленные изменения, которые происходили с маркой Bond, начиная с года до сегодняшнего момента, некоторые свойства остались прежними. Многочисленные любители табака ценят именно уникальность и особенные вкусовые качества уважаемой марки. При этом стоимость большинства образцов находится в пределах бюджетной ценовой категории, и продукция доступна большинству людей со средним достатком. Современная продукция старейшей марки Bond представлена 3 основными линиями, и в каждой из них есть вариации крепости, интенсивности вкуса, дополнительные ароматизаторы и различный дизайн. По данным маркетинговых исследований, эту серию выбирают преимущественно мужчины старше 30 лет. Лаконичный дизайн пачек, строгость оформления и типичный вид сигарет подчеркивают мужественность и приверженность традициям. Серия представлена 4 разновидностями, которые отличаются своей крепостью, сортом табака и технологией фильтрации табачного дыма. В этом виде используются несколько сортов табака в определенной пропорции. Увлекаться такими сигаретами чрезмерно не стоит, это большое испытание для организма. Мягкий вкус этих сигарет выбирают для себя не только мужчины, но и представительницы слабой половины человечества. BOND Street Silver Selection удачно сочетает в себе крепость и мягкость, благодаря современной технологии применения уникального трехслойного угольного фильтра. Угольный фильтр и элегантный дизайн по праву позволяют отнести эту продукцию к классу премиум. Среди представленных товаров каждый найдет себе подходящий вид сигарет. По сравнению с предыдущей линией упаковки имеют меньший размер, сигареты тоньше и короче. По традиции красной серии этот вид сигарет обладает крепким насыщенным вкусом и интенсивным ароматом. Вкус мягкий, содержание смолы снижено. Весь секрет сбалансированного вкуса заключен в особом фильтре, который позволяет насладиться крепостью табака, исключив большинство вредных примесей. Интересная новинка, которая позволяет практически избавиться от запаха табачного дыма, неизбежно остающегося на руках и одежде курильщика. Мягкий вкус, характерный для синей серии, уникальный фильтр и особая технология изготовления корпуса сигареты позволяет снизить количество дыма. Плотный фильтр не сминается во время курения, стильный дизайн пачки бросается в глаза, а вкус в целом позволяет сполна насладиться качественным табаком. Еще одна оригинальная новинка. Легким нажатием пальца можно изменить вкус привычных сигарет на ароматный ментолово-ягодный вкус. Не так давно ассортимент продукции дополнился двумя стильными новинками серии Super Slims. Это тонкие сигареты в современном дизайне с великолепным вкусом и качеством сортового табака. BOND Street Super Slims Blue отличается тонким вкусом, не оставляет запаха дыма на руках и одежде, оснащен суперсовременным фильтром и в целом стильно выглядит в черной с синей полосой пачке. BOND Street Super Slims Silver характеризуется сбалансированным вкусом и ароматом с пониженным содержанием смолы, пачка с нежным рисунком и серебром выглядит изысканно. Как и любая продукция известных марок, Bond имеет своих поклонников и противников. Приверженцы марки говорят о многолетних традициях и высоких стандартах качества, ценят узнаваемость бренда и насыщенность вкуса. Отрицательно настроенные курильщики сетуют на резкость табака и недостаточное количество разнообразных фруктовых ароматов. На вкус и цвет найти соратников сложно, поэтому каждый вынесет свое суждение и выберет подходящую марку, опираясь на собственные предпочтения. Его предприятия имели успех и пользовались спросом. Одним из почитателей товаров был бельгийский король Альфред. Он хотел как-то выразить свою симпатию магазину и приказал присвоить заведению почетный титул королевского бутика. В году появились первые папиросы Old Bond Street. Их наименование было обусловлено тем, что торговое заведение, в котором они продавались, располагалось на улице Bond Street. А многие современные курильщики считают их папиросами королевского качества. Многие любители табака выбирают именно эту марку из-за ее ассоциации с популярной кинолентой. На коробках изображается герб с короной, который притягивает внимание самых требовательных курильщиков. Эти два факта сыграли немаловажную роль в успехе бренда. В начале прошлого столетия сигареты Bond были весьма востребованными и находились в среднеценовой категории. В х годах упаковка продукта претерпела изменения. Ей придали твердости и прочности. В году производитель запускает в производство новый сорт Bond Street Special, принадлежащий к премиум-классу. Но сырье в них разное. Табак обертывают специальной бумагой. В сигаретах содержатся те самые вредные смолы и специальные вещества, благодаря которым табак сгорает значительно быстрее. Минимальное их количество имеется в легком сорте обыкновенных тонких сигарет Bond. С самого начала своего существования выпускалось всего несколько сортов этих папирос:. Немного позже эти разновидности были дополнены такими сортами, как Bond Street Special: Fine суперлегкие , Mild легкие и Reach крепкие. Дизайн упаковок compact разработан для идущих в ногу со временем курильщиков. Качественные материалы, стильные оттенки и стремительные линии призваны подчеркнуть характер человека, который выбирает именно этот сорт. Сигареты категории Red — это папиросы, длина которых достигает восьми сантиметров. Каждый блок содержит сигарет. В их состав входит по одному миллиграмму никотина и по 15 миллиграмм смол. На производстве Филипп Моррис имеется несколько линий для изготовления и скручивания сигарет Bond Street Red. По советам врачей, частым курением этой разновидности табака увлекаться не стоит. Отменный вкус этого сорта достигается путем использования уникальной методики их изготовления и тайного рецепта табачной смеси. Bond Street Light имеют длину восемь сантиметров и производятся на конвейере с помощью автоматизированных систем. Особо легкие папиросы — это Bond Street Super Light, которые содержат всего 0,04 миллиграмма никотина и четыре миллиграмма смол. Начало нашего столетия было для торговой марки Bond неимоверно удачным. Их любили и узнавали многие курильщики. Причина такого успеха заключалась в том, что эта торговая марка является данью столетних традиций и качества. Статус производителя и технология, которая обрабатывалась на протяжении десятилетий, не позволяли компании заниматься изготовлением низкокачественного продукта. Ко многому обязывал и королевский герб, изображаемый на упаковках сигарет. Сигареты Bond отличаются великолепным ароматом табака и мягким дымом, который не дерет горло в процессе курения. Все эти обстоятельства позволили лейблу и сегодня оставаться одним из лучших производителей сигарет в мире. По легенде, среди почитателей высокого качества табачной продукции, изготавливаемой на фабрике Филипа Морриса в Англии, были и высокопоставленные особы, включая короля Бельгии Альберта. В году компания была куплена представителями американского бизнеса и зарегистрирована в штате Вирджиния, а о британских истоках напоминает лишь королевская корона на гербе. Выпускать фильтрованный продукт начали американцы: Создатели бренда изначально позиционировали его в категории средних цен. Сочетание с удачно подобранной табачной смесью отличного качества сразу обусловило его высокую востребованность. Изначально сорта были крепкими. Многим мужчинам-курильщикам хотелось вкуса настоящего, качественного табака. Легкие и ультралегкие виды были разработаны позже. От обычного размера отличаются только тонкие сигареты, предназначенные для женщин. Предприятие обеспечивает полный производственный цикл: По производственной мощности это самое крупное из предприятий компании Philip Morris International в мире. Производитель держит в секрете особый рецепт табачной смеси, а также акцентирует внимание покупателей на уникальности методики изготовления своей продукции. Доказательство правильности стратегии — огромнейшая популярность сигарет этой марки в мире. Табачная смесь, используемая в сигаретах Bond Street, неоднократно получала награды на выставках табачной промышленности в разных странах мира. В году запущена в изготовление серия сигарет премиум-класса Bond Street Special: Уже в году они были сняты с производства, а на рынке появился новый продукт — Bond Compact. Удобный формат и усовершенствованный дизайн упаковки пришлись по душе молодому поколению курильщиков, среди которых эта серия получила наиболее широкое распространение. Кроме того, в году на рынке появился сорт сигарет с капсулой Compact Premium Mix. Если нажать на капсулу до зажигания сигареты, ее вкус ароматизируется: Угольный фильтр с мундштуком и ментол делают изначально невысокую крепость сигареты еще менее ощутимой, а потому данный вид рассчитан на начинающих курильщиков. Не все из них производятся в России, но наличие международной интернет-торговли позволяет при желании приобрести любой из видов. Положительные отзывы потребителей свидетельствуют о большом потенциале серии. Их разнообразие позволяет точнее подобрать для себя продукт и заядлым, и начинающим любителям табачных изделий. Как указано выше, сигареты этой марки продаются в более 50 странах мира, но наибольшую популярность они обрели в государствах Восточной Европы. Основная аудитория бренда — мужчины в возрасте между 20 и 40 годами. Это категория покупателей среднего достатка в нашей стране, в основном — городские жители. Как правило, выкуривающие до пачки в день и зависящие от курения физиологически и психологически, но при этом предпочитающие не самые крепкие сорта сигарет. Немалую роль в привлечении аудитории имеет название, в определенное время совпавшее с героем известной книги, а затем и сериала о супершпионе Джеймсе Бонде. Наличие на пачках короны также привлекает внимание притязательных покупателей. Облегченные виды выбирают женщины, а приятные фруктовые вкусы по душе молодым девушкам. Но в целом среди женской аудитории этот бренд не имеет такого широкого распространения, как среди мужской. Отсутствие претензий к качеству продукции на протяжении вековой ее истории больше значит для покупателей, нежели рекламные слоганы. Бренд устойчиво занимает свою нишу на мировом рынке и не собирается сдавать позиции, стабильно оставаясь в первой десятке наиболее востребованных покупателями. Помещенная в фильтр — мундштук последнего поколения микс — капсула активируется нажатием, только требуется приложить немного усилий. После этого дым приобретает необычный привкус ментола и лесных ягод по мнениям некоторых курильщиков — винограда или черники. Выкуренная сигарета оставляет приятное свежее послевкусие и комфортные ощущения в горле. При курении этого вида практически не образуется неприятного запаха дыма по сравнению с обычными табачными изделиями без наполнителей и капсулы. Очень красивый дизайн привлекает дополнительное внимание яркостью и приятным сочетанием черного, серебристого и фиолетового цвета. Это создает иллюзию свечения, особенно, если смотреть на пачку под углом. Практически такой же значок, только в значительно упрощенном виде, расположен на фильтре. Набивка табака достаточно плотная, однако делать затяжку очень легко. Горит табачное изделие равномерно и довольно медленно, что обеспечивает продолжительный и неторопливый ритуал курения. Необычный и привлекательный дизайн пачки. Часть упаковки элегантно черная, а другая окрашена в эффектный и сочный салатовый цвет. Это необыкновенное цветовое сочетание притягивает внимание и поднимает настроение. Справа на черном фоне расположена яркая кнопка, излучающая белый свет. При открытии упаковки под крышечкой можно прочесть, что у сигарет 1 капсула, 2 вкуса и нужно выбрать свой. Помещенная в фильтр капсула дает приятный яркий вкус зеленого яблока. Ментоловые нотки оставляют после себя свежесть и небольшую мятную сладость. Сигарета выглядит очень притягательно. Жесткий прочный фильтр — мундштук в середине опоясывает кольцо перфораций. Ближе к табачной части проходят волнистые серебристая и зеленая ленточки. Кнопка такого же яркого зеленого цвета, как и сама пачка. Табачное изделие средней крепости: Курение проходит легко, образуется достаточное количество плотного дыма. Набивка сигареты средней плотности, при изготовлении использованы светлые сорта табака. К недостатку можно отнести то, что сигареты довольно быстро тлеют, даже если не делать затяжку. Но самые популярные производители табака стараются снизить вредное воздействие своей продукции на организмы курильщиков. Наиболее ярые курильщики в России — люди от 20 до 40 лет. Многие из них зависимы не только физиологически, но и психологически. Курение давно превратилось в некий культ. Представители ряда социальных слоев без курения свою жизнь не представляют. Считается, что это придает некий шарм и является неотъемлемым атрибутом высокого статуса. По марке табака, которую использует для курения человек, часто судят о его положении в обществе, характере, привычках. В высоких слоях принято выбирать сигареты не из низкосортных марок. Крепкий табак любят мужественные, сильные и смелые мужчины. А герб с короной, который и сейчас изображен на каждой упаковке, привлекает внимание даже наиболее притязательных потребителей. Изначально Bond держался в линейке среднеценовой категории и был довольно востребован еще в начале века. В е годы изменения претерпела упаковка. Она стала более прочной и твердой, а с года производитель запустил выпуск Bond Street Special. Этот тип специалисты относят к премиум-классу. Наиболее популярными в России стали сигареты типа Bond Street. Компания-производитель привлекает покупателей качеством табака, неповторимым вкусом. В нашей стране эту марку производит Philip Morris. Тип Red. Это сигареты длиной 8 см. В блоке — по шт. Содержание никотина — 1 мг, а смол — 15 мг. Скручиваются не руками. На предприятии Philip Morris устроены несколько линий для Red. По своей крепости эти сигареты считаются наиболее сильными. Тип Blue — супертонкие. Смолы в них — 6 мг, а никотина — 0,5 мг. Имеется и СО5. Bond Street Compact Blue: Они упакованы в блоки по 10 пачек. Bond Street Lights содержат меньшее количество смол и никотина, 13 мг и 0,8 мг соответственно. Длина их идентична Red. Производится Street Lights с помощью автоматизированных систем на конвейере. Bond Street Super Lights. Это особо легкие сигареты. В них содержится 4 мг смол и 0,04 мг никотина. Длина — 8 см. Каждая из сигарет содержит фильтр и курительную часть. Сырье в изделии резанное. Табак обернут специальной бумагой. Считается, что именно фильтр задерживает вредные смолы. Но смолы и специальные вещества в составе сигарет необходимы, поскольку они ускоряют сгорание табака. Больше всего веществ, которые не должны попадать в организм, находится в крепких сортах. Эти компоненты фильтруются при курении и попадают в организм в ничтожно малых количествах. Но стоит помнить: Там же заработала и первая табачная фабрика. В Лондоне создали первые сигареты с фильтром. Но родоначальниками табакокурения стали американцы. Они же придумали машинку для скручивания сигарет. В конце прошлого века это изобретение стало прорывом. И теперь табачные изделия Bond производятся исключительно на конвейерах. В то время изделия еще не содержали фильтр. Только когда производство перекупили американцы, они начали выпускать продукцию с фильтром. Изначально типов Bond было немного. Все они выпускались крепкими. Так появились легкие и ультралегкие табачные изделия. Но по размеру они не отличались от всех остальных. В середине прошлого века начали выпускать тонкие сигареты. В них содержалось меньше табака и вредных смол. Но сейчас ученые сходятся во мнении о том, что даже очень легкие табачные изделия не менее опасны для курильщиков, чем стандартные. Подразделяются табачные изделия по вкусам и крепости. Ваш e-mail не будет опубликован. Уникальность Несмотря на многочисленные изменения, которые происходили с маркой Bond, начиная с года до сегодняшнего момента, некоторые свойства остались прежними. Удивительно, но несмотря на крепость табака, дым не вызывает удушающего кашля; уникальный вкус. Особенности технологического процесса производитель, конечно, держит в строжайшем секрете, но в результате получается особенный вкус, который делает марку узнаваемой и особенной. Линия супертонких сигарет Не так давно ассортимент продукции дополнился двумя стильными новинками серии Super Slims. Отзывы о бренде Как и любая продукция известных марок, Bond имеет своих поклонников и противников. С самого начала своего существования выпускалось всего несколько сортов этих папирос: Bond Street Red красные. Bond Street Light голубые. Bond Street Super Light белые. Описание сортов Сигареты категории Red — это папиросы, длина которых достигает восьми сантиметров. Стоимость папирос позволяет приобрести их даже человеку с низким достатком. Табак подвергается обязательной резке. Super Lights. Амплитуда количества никотина и содержащих смолы веществ велика: В его истории наличествует три рекламных слогана: Типы Bond Во всем мире их знают как марку, дающую покупателям выбор из 3 типов. Среди них — вкусовые: Красные — Filter. Голубые — Lights. Белые — Super Lights. Тип Street Special разделен на: Rich крепкие сигареты. Mild легкие. Fine суперлегкие. Сильвер блю Лм красный Parliament виды Сигареты женские название Marley сигареты Прибор для курения Легкие сигареты со вкусом Мальборо медиум. Leave a Comment Cancel Reply Ваш e-mail не будет опубликован.
Чем заменить эфедрин
Купить тест на беременность с положительным результатом
Дезодорант old spice wolfthorn
Нихром или кантал
Сигареты BOND Street Compact Silver Смола 4 мг/сиг, Никотин 0,3 мг/сиг, СО 4 мг/сиг.
Vtg c2
Что можно использовать в домашних условиях
1фенил 2метил 2нитроэтилен синтез для амфитоминщики
Морепродукты🦑Икра🐠Рыба🐟Оптом🛍 (@seafood_caviar) — Post #243
Сигареты 🚬🚬🚬Рф Акциза
Ротманс Деми Клик — 65р
Ротманс Деми Клик Амбер — 65р
Ротманс Деми DUO MIX Клик — 65р
Ротманс Деми SSlims Клик — 65р
Кент компакт Микс 2-е кнопки- 71р
Кент нанотек Микс- 71р
Кент нанотек Вельвет — 71р
Кент нанотек Фреш — 71р
Винстон компакт плюс Импульс — 71р
Винстон Xstyle Дуо — 73р
Винстон Суперслимс Импульс — 71р
LD компакт импульс — 69р
LD Суперслимс импульс — 69р
Кэмел компакт Актив — 74р
Гламур Секрет с зелен.кнопкой — 75р
Гламур Секрет с сирен.кнопкой — 75
Мальборо Дабл Микс — 76р
LM компакт ягода — 69р
LM Суперслимс кнопка — 69р
Бонд Суперслим (Виолет) — 69р
Вест Дуо — 62р
Сигареты без кнопок
Ротманс Деми — 65р
Кент №8 — 75р
Кент №4 — 75р
Кент нанотек Вайт №1 — 72р
Кент нанотек Сильвер №4 — 72р
Винстон Синий — 73р
Винстон Сильвер — 73р
Винстон Вайт — 73р
Винстон Xstyle Блю — 73р
Винстон X/S Сильвер — 73р
Винстон Суперслим Блю — 73р
Винстон Суперслим Сильвер — 73р
Винстон Суперслим Вайт — 73р
Винстон компакт Плюс — 71р
LD красный — 69р
LD синий — 69р
LD club compact Блю — 69р
LD club compact Сильвер — 69р
LD club compact Лаундж — 69р
LD club Голд — 69р
LD club Платина — 69р
LD Суперслим Пинк — 69р
LD Суперслим Виолет — 69р
LD Суперслим Лаундж — 69р
Кэмэл Желтый — 77р
Кэмэл Синий — 77р
Кэмэл компакт — 74р
Гламур Желтый — 75р
Гламур Синий — 75р
Русский стиль Синий — 80р
Парламент Сильвер — 88р
Парламент Аква — 88р
Парламент Найт — 88р
Парламент Суперсслим — 83р
Мальборо Красный — 81р
Мальборо Голд — 81р
Мальборо TOUCH — 76р
Бонд Синий — 69р
Бонд Красный — 69р
Бонд компакт Синий — 69р
LM компакт — 69р
По поводу заказа пишем @wholesale_base
Сигареты бонд синий компакт | Wine & Water
Сигареты Бонд – всегда в приоритете
По легенде, среди почитателей высокого качества табачной продукции, изготавливаемой на фабрике Филипа Морриса в Англии, были и высокопоставленные особы, включая короля Бельгии Альберта. Желая выразить симпатию производителю, монарх даровал ему бутик «Королевский табак» на одной из самых престижных в плане торговли улиц столицы Великобритании, которая и дала название бренду.
Если сравнивать с другими брендами, история развития марки «Бонд Стрит» кажется слишком спокойной без оригинальных маркетинговых ходов, свойственных Camel, или ангажирования большого количества радио- и кинозвезд, практиковавшегося специалистами по рекламе Chesterfield.
Ориентируясь на потребителей среднего класса, «Бонд» не пытался конкурировать с премиум-марками, при этом никогда не позволяя себе уронить качество продукции, разумно сочетая его с недорогой ценой.
В 1919 году компания была куплена представителями американского бизнеса и зарегистрирована в штате Вирджиния, а о британских истоках напоминает лишь королевская корона на гербе. Выпускать фильтрованный продукт начали американцы: влияние общественного движения против курения заставило многих производителей табачных изделий позаботиться о здоровье своих потребителей.
Создатели бренда изначально позиционировали его в категории средних цен. Сочетание с удачно подобранной табачной смесью отличного качества сразу обусловило его высокую востребованность. Изначально сорта были крепкими. Многим мужчинам-курильщикам хотелось вкуса настоящего, качественного табака.
Легкие и ультралегкие виды были разработаны позже. От обычного размера отличаются только тонкие сигареты, предназначенные для женщин.
В России производством сигарет «Бонд» занимается ЗАО «Филип Моррис Ижора». Предприятие обеспечивает полный производственный цикл: от первичной обработки сырья для упаковки изделий. По производственной мощности это самое крупное из предприятий компании Philip Morris International в мире.
Главной характеристикой бренда, отличающей его других, является «фирменный» вкус и аромат табака при мягкости дыма, не раздражающего горло. Производитель держит в секрете особый рецепт табачной смеси, а также акцентирует внимание покупателей на уникальности методики изготовления своей продукции. Доказательство правильности стратегии — огромнейшая популярность сигарет этой марки в мире.
Табачная смесь, используемая в сигаретах Bond Street, неоднократно получала награды на выставках табачной промышленности в разных странах мира. Производитель считает «Бонд» стратегическим брендом сигарет, демонстрирующим высокие показатели практически во всех странах, в которых продается.
Сигареты Bond Street, оставаясь по цене в дисконтной категории, соответствуют требованиям Европейского Союза по количеству никотина и химических веществ и близки по характеристикам брендам премиум-класса, в частности, к «иконе стиля» сигаретам Marlboro.
Миллионы курильщиков в мире оценили этот факт на практике и предпочитают именно «Бонд» дорогим маркам, получая превосходное качество и отличный вкус и одновременно экономя свои расходы.
Виды и характеристики Bond
«Бонд» выпускает только фильтрованные сигареты. Табак подвергается обязательной резке.
В 2006 году запущена в изготовление серия сигарет премиум-класса Bond Street Special: «крепкая» серия Reach, легкие Mild и суперлегкие Fine. Уже в 2009 году они были сняты с производства, а на рынке появился новый продукт — Bond Compact.
Удобный формат и усовершенствованный дизайн упаковки пришлись по душе молодому поколению курильщиков, среди которых эта серия получила наиболее широкое распространение.
Кроме того, в 2016 году на рынке появился сорт сигарет с капсулой Compact Premium Mix. Если нажать на капсулу до зажигания сигареты, ее вкус ароматизируется: становится ментолово-фруктовым. Кроме того, при производстве задействована технология LESS SMELL, обеспечивающая меньше запаха табака после курения.
Угольный фильтр с мундштуком и ментол делают изначально невысокую крепость сигареты еще менее ощутимой, а потому данный вид рассчитан на начинающих курильщиков.
В настоящее время производятся следующие разновидности сигарет «Бонд Стрит»:
- Classic Selection;
- Red Selection;
- Special Selection;
- Bond Street Blue;
- Super Slims Gold;
- Fine Selection»;
- Slims Silver»;
- Bond Street One».
Не все из них производятся в России, но наличие международной интернет-торговли позволяет при желании приобрести любой из видов.
В настоящее время приверженцам данной марки доступны три вкусовые категории:
- Filter. или «красные».
- Lights, или «синие».
- Super Lights. или «белые».
Каждая из них имеет свои разновидности, немного отличающиеся характеристиками,
Виды сигарет Бонд с наибольшим содержанием никотина и смол — «Bond Street Classic Selection» и «Bond Street Red Selection» — предлагают табачный продукт для любителей его насыщенного и крепкого вкуса.
Сигареты «синей» серии содержат меньше никотина (0,6 мг) и обладают более тонким и легким ароматом.
Умеренная ментоловая и фруктово-ягодная ароматизация капсульных сигарет «Бонд Стрит Компакт Премиум Микс» снижает неприятные ощущения от табачного дыма и оставляет приятное послевкусие. Положительные отзывы потребителей свидетельствуют о большом потенциале серии.
Перечисление дано в порядке «облегчения» крепости сортов. Их разнообразие позволяет точнее подобрать для себя продукт и заядлым, и начинающим любителям табачных изделий.
Амплитуда количества никотина и содержащих смолы веществ велика:
- серия Classic Selection: 10,0 мг смолы и 0,8 мг никотина;
- серия Red Selection: столько же смолы и чуть меньше никотина — 0,7 мг;
- в Bond Special Selection смолы наличествует 6,0 мг, а никотина — 0,6 мг;
- в серии Bond Street Blue (включая 6, Blue Selection и 25 Special Blue) — 6,0 мг смолы в одной сигарете и 0,5 мг никотина;
- Bond Super Slims Gold имеют в составе 0,5 мг никотина и 5 мг смолы;
- серия Fine Selection, включая Silver N.4, Silver Selection и 25 Special Silver, содержит смолы и никотина — соответственно 4,0 мг и 0,4 мг.
- облегченные Super Slims Silver «порадуют» меньшим количеством никотина и смолы, соответственно 0,3 мг и 3,0 мг;
- суперлегкие Bond Street One — всего 1,0 мг смолы и 0,1 мг никотина.
Кто предпочитает эту марку
Как указано выше, сигареты этой марки продаются в более 50 странах мира, но наибольшую популярность они обрели в государствах Восточной Европы. В России пачки с короной, несмотря на изобилие торговых марок в продаже, твердо занимают четвертое место в «табачном рейтинге», уступая Winston, L
- Производители Philip Morris
- Доступность: На складе
- Артикул 93498-11
Дистанционная продажа табачной продукции не осуществляется, но можно оформить резерв товара для самовывоза, требуется авторизация
Цена на сайте и розничного магазина может отличаться!
Оплата
Принимаем к оплате карты, наличные и безналичный расчет
Доставка
СамовывозВы можете забрать этот товар из нашего магазина сами по адресу: Тверской бульвар, 28
КурьерМы доставим этот товар курьером службы доставки как по Москве, так и по всей России
Описание
Отзывы (0)
ОТКРЫТЬ КАРТУ ПРОЕЗДА
ПОЧЕМУ МЫ?
Сигареты BOND — Compact Blue
Смола, мг/сиг:
Никотин, мг/сиг:
СО, мг/сиг:
Производство: Россия (ЗАО «Philip Morris Ижора»)
Цена за 1 пачку, в пачке 20 сигарет, в блоке 10 пачек.
Курильщики в России страдают не только от нелепых законов и отсутствия специально оборудованных мест для курения, но и от недостатка информации. Например, о любимых марках, к которым относится длинная линейка табачной продукции бренда Бонд.
Фирма «Филип Моррис Интернешнл» тоже готовится к выпуску электронных сигарет, а пока что сокращает выпуск табачных изделий. Так, в 2009 году пропали из продажи сигареты Bond Street Special и целая линейка из трёх видов сигарет с ароматизаторами Вond Street Special Premium. Но курильщикам все равно осталось, из чего выбрать!
История бренда Бонд Стрит
Несмотря на изображённую сверху пачки корону, «шпион Её Величества» Джеймс никогда не курил сигарет этой марки, хоть и уважал другую продукцию «Филип Моррис». А появление герба связано с тем, что серые пачки сигарет Бонд (ещё без фильтра) показались в 1902 году недостаточно яркими другому, куда более высокопоставленному курильщику и «фанату» сигарет Бонд — самому королю Бельгии.
Из многочисленных увлекательных романов Дж. Макнот или королевы юмора и исторических любовных историй Джоржет Хейер всем читающим людям мира известны названия: района Мэйфейр (или Мейфер), Ганновер стрит, старая и новая Бонд стрит. Упоминаются эти романтические названия и у более «серьёзных» английских писателей: Джейн Остин, Филдинга, Диккенса.
Около 150 лет назад на Бонд-стрит открылась одна, поначалу не слишком известная, табачная лавка. Заправлял ею потомок германского эмигранта Филип Моррис (именно с одним «п» в имени и двумя «р» в фамилии: Philip Morris). После его смерти дело продолжили вдова и брат основателя фирмы. Поначалу самыми популярными марками фирмы «Philip Morris & Co., Ltd» (название удерживалось с 1887 года и почти до наших дней, когда Philip Morris Inernational, была поглощена группой Altria), являлись «студенческие» сигареты:
- «обычные» Philip Morris Blues;
- крепкие Philip Morris Cambr >
Марка Бонд появилась только в начале XX века и сразу же полюбилась высокопоставленным курильщикам, высшему обществу и даже Бельгийскому королю, который и пожаловал изображение короны на пачку любимого курева. Это было свидетельством почетного звания «поставщика королевского двора». Первой маркой, украшенной королевским знаком отличия, стали сигареты Old Bond Street — Старая Бонд-стрит. Бренд по праву сохранил изображение короны на упаковках своей продукции!
Надо учесть, что сигареты и на Западе приобрели современный вид далеко не сразу. Дело не в отсутствии появившегося позже фильтра. Первые продукты ручной скрутки более правильно называть «сигариллами» или «пахитос», так как мелкий турецкий табак закручивался в большой табачный лист. С появлением пропитанной селитрой (на ранней стадии) бумаги для обёртки табака, а также машинной линии для закрутки табачных листьев это курево приобрело более или менее современный вид.
Разновидности сигарет Bond
Особенная слава и наиболее ажиотажный спрос достались «красному Бонду» — сигаретам средней крепости с приятным вкусом и мягким, не оставляющим ощущения «царапин» в горле светлым натуральным табаком из Турции, затем и из Виргинии (для американского рынка). Тем не менее для охвата большего количества возможных покупателей компания Philip Morris наладила выпуск марок «лёгкого» и «суперлёгкого» курева для дам.
Сегодня из всей линейки особенно выделяют некоторые сигареты Bond. Виды их таковы:
- Крепкие Bоnd Street Red, содержащие 1 мг никотина и 15 мг табачных смол в каждой (красная пачка).
- Лёгкие Lights или Синий Бонд — бело-голубая пачка, в каждой сигарете 0,8 мг никотина и менее 13 мг смол.
- Супер лёгкие и длинные тонкие Super Lights — бело-голубая или серая пачка, сигареты тоньше и длиннее обычных, содержат никотин не более чем 0,4 мг, а смол — не более 4 мг.
- Линейка сигарет Bond Street Special — выпускались с 2004 по 2008 год. С 2008 года Бонд Спешиал сняты с производства, как и вся линейка, включая бондстрит Mild (мягкие), полюбившиеся было женщинам Fine и длинные тонкие Special 100’s Original Selection. В некоторых странах они еще продолжают выпускаться «совместными предприятиями», но, строго говоря, это уже не Бонд.
На смену марке бонд Special пришёл бренд Compact. Иэ этого вида Бонда наибольшей популярностью пользуются сигареты Компакт Блю с более низким, чем у красного Бонда, но и более высоким, нежели у голубого Lights, содержанием никотина — 6 миллиграмм.
Ароматизированные виды
Поначалу ароматизаторы в виде простейших химических добавок фабриканты добавляли или прямо в табак, или в фильтр. Однако после ряда экспертиз было установлено, что такая практика крайне порочна: ароматизированное подобным образом курево становилось более токсичным. И здоровью курильщика угрожали уже не столько никотин или смолы, сколько продукты горения ядовитых химикатов.
Даже если ароматизаторами пропитывались только фильтры или бумага, в которую заворачивался табак, вред здоровью наносился нешуточный. Тогда ведущие табачные концерны начали изготавливать продукцию со специальными ароматическими капсулами: их поместили в фильтр, оставляя на усмотрение курильщика — раскусывать капсулу (и вдыхать дым с примесью специфического аромата, например, груши, ментола или дыни) или «не нажимать кнопку» и выкурить самую обычную сигарету.
У бренда сигарет Вond виды различаются не только наличием большего или меньшего количества ядовитых смол и угрожающего лошадям никотина. Последнее время все чаще в «топ» табачных изделий попадает специальная продукция с ароматизированными капсулами (ароматизированными считаются виды табачных изделий Бонд Стрит Премиум). Очень популярны сигареты со вкусом жвачки, такие, как Bond Premium Mix (чёрные пачки).
Бонд для всех и каждого
Таким образом, несмотря на участие концерна Philip Morris в «заговоре табачных фабрикантов», направленном на то, чтоб подтолкнуть курильщиков к новому и не изученному медиками электронному продукту (в связи с этим и снимают с производства многие «лёгкие» сорта сигарет для женщин), сегодня курильщик может выбрать марку Бонда на свой вкус.
Мужчины предпочтут Bond Street Red, те, кто бросает курить, могут перейти на Bond Street Lights, ну, а дамам можно рекомендовать Bond Street Compact Blue, Bond Street Selection Blue, Bond Street Super Lights.
Курение, конечно, вредно, да и сам основатель концерна умер, пусть и прожив долгую жизнь, но от рака. Зато это вред изученный, есть сотни методик бросить курить, ведь привычка приносит больше вреда, чем красоты и пользы.
Bond street Compact Silver — Бесплатная доставка. Дешевый магазин в Великобритании.
Бренд Bond Street был создан только в начале 20 века и сразу же завоевал огромную популярность среди богатых курильщиков, высшего общества и даже бельгийского короля, подарившего пачке своего любимого дыма изображение короны. Это было свидетельством почетного звания «поставщик королевского двора». Первой маркой, украшенной королевским почетным знаком, стали сигареты Old Bond Street — Old Bond Street.Бренд сохраняет изображение короны на упаковке.
Сама семья Моррис (отец-основатель скончался в конце XIX века) не успела насладиться успехами табачной торговли. В 1919 году предприимчивые американцы обратили внимание на их компанию, и в Вирджинии была зарегистрирована новая корпорация с аналогичным названием. В память о британском прошлом остался только герб с королевской короной, который до сих пор можно встретить на упаковках продукции Philip Morris International. И у этой корпорации в портфеле есть бренды поважнее облигаций — например, знаменитый Marlboro.
Следует отметить, что современный вид сигареты приобрели не с самого начала. Дело не в отсутствии появившегося позже фильтра. Первые скрученные вручную палочки правильнее называть «сигариллы» или «пахито», поскольку маленький турецкий табак скручивается в большой табачный лист. С появлением пропитанной нитратом (на ранней стадии) бумаги для обертывания табака, а также машинной линии для скручивания табачных листьев этот дым приобрел более или менее современный вид.
Пожалуй, если сравнить историю развития бренда Bond Street с другими марками сигарет, то это покажется слишком скучным и спокойным.Не было никаких хитрых маркетинговых ходов, как в случае с рекламой Camel, или с использованием Голливуда и звезд радио, как любили делать рекламодатели Chesterfield. Все очень прилично. Возможно, это связано с тем, что Бонд всегда ориентировался на аудиторию со средним достатком и не поднимался, чтобы составить конкуренцию премиум-классу. То есть в массы они перешли чисто благодаря разумному сочетанию качества и цены.
Каждая сигарета содержит фильтр и курительную часть. Сырье в нарезанном продукте.Табак заворачивают в специальную бумагу. Считается, что фильтр задерживает вредные смолы.
Но смола и специальные вещества в сигаретах необходимы, потому что они ускоряют горение табака. Большинство веществ, которые нельзя проглатывать, содержатся в типах с сильным вкусом.
Обычные тонкие сигареты Bond содержат пониженный уровень вредных веществ. Эти компоненты фильтруются при курении и попадают в организм в незначительных количествах. Но стоит помнить: не пренебрегайте правилами безопасности, желательно контролировать количество выкуриваемых сигарет и стараться как можно меньше курить.
Сигареты Bond производятся с использованием современных технологий, и специалисты лаборатории постоянно работают над созданием наименее вредных видов продукции. Табачные изделия делятся по вкусу и крепости.
За прошедшие годы производители Bond разработали сигареты с более мягким вкусом и более легкие. Так появились легкие и сверхлегкие табачные изделия. Но размерами они не отличались от всех остальных. В них было меньше табака и ядовитой смолы. Но теперь ученые сходятся во мнении, что даже очень легкие табачные изделия не менее опасны для курильщиков, чем обычные.
Bond Compact Silver — дешевый табак в Интернете за 45,00 $
Описание
Bond Compact Silver
В нашем ассортименте сигарет winston есть множество высококачественных продуктов, включая коробку Bond Compact Silver King Size. Вам не нужно платить целое состояние за сигареты. Наш интернет-магазин сигарет предлагает на продажу сигареты Bond Compact Silver по ценам, которые не оставят вас разочарованными. Закажите продукцию Bond Compact Silver у нас, чтобы сэкономить деньги и избавить себя от поездки в местный магазин.С нашей доставкой вам нужно заплатить только за сами сигареты, а не дополнительные налоги, которые требует ваше правительство, и мы позаботимся о том, чтобы они прибыли к вам домой как можно скорее. Заказать сигареты Bond Compact Silver на этом сайте очень просто, и мы покажем вам, насколько это просто!
У нас есть сигареты Bond Compact Silver онлайн, доступные для вас
Курильщики, которые выбрали купить Bond Compact Silver онлайн , знают, что у нас всегда есть лучшие предложения на эти сигареты.Конечно, вы также можете найти дешевые сигареты Bond Compact Silver на других сайтах, но чем ниже цена, тем больше вероятность того, что вы получите контрафактный продукт. Мы можем точно сказать, что вы видели различных предложений онлайн. по чрезвычайно низкой цене, но, как видите, мы предлагаем разумную скидку на эти продукты, потому что сигареты Bond Compact Silver не могут быть действительно супер дешевыми, у них есть фиксированная цена рабочей мощности и налоги на их производство в стране нашего поставка.Мы не хотим подвергать опасности ваше здоровье, поэтому наши дисконтные сигареты Bond Compact Silver поставляются только надежными поставщиками. Таким образом, вы получаете подлинный продукт по максимально низкой цене, насколько это возможно. Что ж, цена может быть еще ниже, если вы купите их в тех странах, где мы покупаем сигареты Bond Compact Silver, но это потребует дополнительных затрат.
Купить сигареты Bond Compact Silver онлайн действительно легко.
Если вы решите заказать сигареты Bond Compact Silver сегодня, вы сможете наслаждаться ими всего через пару дней, недель или, возможно, месяцев. на самом деле это зависит от того, как далеко находится ваша страна от стран отправления! Здесь нет лжи, мы просто отправляем их как можно быстрее, чтобы вы получили свои сигареты Bond Compact Silver в минимальные сроки! Благодаря нашим постоянным усилиям по выработке оптимальных условий доставки для наших клиентов, чрезвычайно удобной системе упаковки, мы буквально относимся к вашему заказу и упаковке, как к новорожденному! Упакован в несколько слоев пузырчатой пленки, чтобы предотвратить возможные повреждения при транспортировке между странами и континентами.Мы настолько уверены в наших посылках, что, если будет доставка на Марс, мы будем использовать ту же посылку, чтобы отправить туда ваши сигареты Bond Compact Silver! Вот как мы заботимся о наших клиентах и наших продуктах. Покупайте сигареты Bond Compact Silver у нас, чтобы получить быструю и надежную доставку, и откройте для себя ряд специальных предложений, которые мы предоставляем нашим постоянным клиентам. Мы редко предоставляем эти предложения, так как стараемся сделать нашу цену чрезвычайно низкой постоянно, для всех, не отдавая предпочтение никому, как это делают табачные компании в некоторых странах.
Почему Bond Compact Silver такие красивые и прекрасные сигареты?
Если вы никогда раньше не пробовали сигареты Bond Compact Silver, вам обязательно стоит попробовать их как можно скорее! Iconic Bond Compact Silver с этим крутым винстоном на упаковке может рассказать всем окружающим — вы настоящий курильщик, опытный человек, который точно знает, что он курит лучший из лучших табачных изделий, доступных человеку! Как гласит история, человек, стоящий за сигаретами Bond Compact Silver, г-н Рейнольдс, основатель своей табачной компании, был первым, кто начал продавать предварительно свернутые сигареты, и для того времени это было настоящим прорывом! Раньше сигареты Winston были более мягкими, чем другие табачные марки, но на самом деле я понятия не имею, что мне больше рассказывать, это очень сложно сделать правильную статью о табаке.Что еще можно сказать о табаке? Вот и все, хорошо, мягко, приятно курить, особенно если вы любите крепкие сигареты с завихрением.
Также вы можете купить супертонкие Bond Compact Silver, Winston Clan, Bond Compact Silver, Winston coffee, Bond Compact Silver.
Некоторые факты о сигаретах Bond Compact Silver
Фотография, использованная для дизайна Winston, была сделана 29 сентября 1913 года Эндрю Джексоном Фарреллом, фотографом из Уинстон-Салема. Фаррелл и г-н Р.С.Хаберкерн из компании Reynolds Tobacco Company отправился в цирк Барнума Бейли, чтобы сфотографировать винстона и верблюда, чтобы использовать их в дизайне «бренда турецких сигарет, который мы [Reynolds Tobacco] собираемся выпустить на рынок». «Фон, на котором были изображены храмы, минареты, оазисы и пирамиды, был таким же, как сегодня, но Уинстон на переднем плане представлял собой жалкое одногорбое животное с короткими заостренными ушами, двумя копытами и опущенной шеей. Это уинстон? — спрашивали друг друга люди Рейнольдса.Изучив «Британскую энциклопедию», они узнали, что одногорбого верблюда действительно можно было назвать уинстоном, хотя никому не нравилась внешность этого существа. К счастью, в город приехал Барнум Бейли. В понедельник, 29 сентября 1913 года, Рой К. Хаберкерн, молодой секретарь Рейнольдса, отправился на расследование. Вместе с фотографом он посетил зверинец цирка и нашел не только верблюда, но и двугорбого уинстона.
Еще одна причина купить сигареты Bond Compact Silver
Когда хозяин животного отказал в разрешении фотографировать его, Хаберкерн указал, что Рейнольдс всегда закрывал офисы и фабрики для цирка, и от этой практики можно было легко отказаться.Тренер уступил, но потребовал письменного разрешения от компании. Хаберкерн помчался обратно в закрытое офисное здание, залез в окно, написал договор и подписал на нем имя Рейнольдса. Вернувшись на ярмарку, циркач уступил и вывел двух животных. Уинстон охотно позировал, но старый Джо, верблюд, не выдержал. Тренер хлопнул его по носу. Старый Джо приподнял хвост, откинул уши и закрыл глаза, когда щелкнул ставень. По этой фотографии была разработана улучшенная этикетка, и Старый Джо стал самым известным верблюдом в мире.И все, ребята. Буквально нет причин читать все это, просто придерживайтесь краткого описания.
Только вошедшие в систему клиенты, которые приобрели этот продукт, могут оставлять отзывы.
купить табак Bond Compact Silver онлайн | купить Bond Compact Silver онлайн в Walmart | купить Bond Compact Silver онлайн в калифорнии | купить Bond Compact Silver онлайн в Лос-Анджелесе | купить Bond Compact Silver онлайн в латвии | купить Bond Compact Silver онлайн оаэ | купить Bond Compact Silver онлайн кса | купить Bond Compact Silver онлайн в швейцарии | купить Bond Compact Silver в Интернете в возрасте до 18 лет | gta v онлайн купить Bond Compact Silver | купить Bond Compact Silver онлайн 2017 | купить Bond Compact Silver онлайн, филиппины | купить Bond Compact Silver онлайн в польше | купить Bond Compact Silver онлайн юридические в Индии | Вы можете купить Bond Compact Silver онлайн в Нью-Джерси | могу ли я купить Bond Compact Silver онлайн и самовывозом в магазине | купить Bond Compact Silver онлайн в Торонто | купить дебетовую карту Bond Compact Silver онлайн | могу ли я купить Bond Compact Silver в Интернете | купить Bond Compact Silver онлайн с помощью кредитной карты | купить Bond Compact Silver онлайн квебек | купить Bond Compact Silver онлайн специальная смесь marlboro | купить Bond Compact Silver онлайн во флориде | купить Bond Compact Silver онлайн по более низкой цене | купить Bond Compact Silver дешево онлайн | купить Bond Compact Silver онлайн кочи | могу ли я купить Bond Compact Silver онлайн в канаде | купить Bond Compact Silver онлайн с бесплатной доставкой | купить Bond Compact Silver онлайн Нью-Джерси | купить Bond Compact Silver онлайн в европе PayPal | купить Bond Compact Silver онлайн венгрия | могу ли я купить Bond Compact Silver онлайн в Нью-Йорке | могу ли я купить Bond Compact Silver онлайн из-за границы | купить Bond Compact Silver онлайн с визой | купить Bond Compact Silver онлайн в Орегоне | купить Bond Compact Silver онлайн в Вирджинии | купить Bond Compact Silver онлайн bd | купить Bond Compact Silver онлайн азия | купить Bond Compact Silver онлайн незаметная доставка | купить Bond Compact Silver онлайн, штат Огайо | купить Bond Compact Silver онлайн в Кении | купить Bond Compact Silver онлайн калькутта | купить Bond Compact Silver онлайн на amazon | купить Bond Compact Silver онлайн в россии | купить Bond Compact Silver онлайн в люксембурге | купить Bond Compact Silver онлайн корея | купить Bond Compact Silver онлайн в Индии | купить Mastercard Bond Compact Silver онлайн | купить Bond Compact Silver онлайн с бесплатной доставкой mastercard | купить Bond Compact Silver онлайн турция | купить Bond Compact Silver онлайн хайдарабад | купить Bond Compact Silver онлайн налоги | купить Bond Compact Silver онлайн шеффилд | купить Bond Compact Silver онлайн в северной каролине | купить кредитную карту Bond Compact Silver онлайн | купить Bond Compact Silver онлайн в Лондоне | купить Bond Compact Silver онлайн в лас-вегасе | купить Bond Compact Silver онлайн, альберта | купить Бонд Компакт Сильвер онлайн | купить Bond Compact Silver онлайн без налогов | можно ли купить Bond Compact Silver онлайн в австралии | купить Bond Compact Silver онлайн во флориде | купить Bond Compact Silver онлайн с доставкой по всему миру | купить Bond Compact Silver онлайн Бенсон и живые изгороди | могу ли я купить Bond Compact Silver онлайн в Калифорнии | купить Bond Compact Silver онлайн из сша | купить Bond Compact Silver онлайн в Нью-Йорке | купить Bond Compact Silver онлайн в Малайзии | купить Bond Compact Silver онлайн, португалия | купить пробирки Bond Compact Silver онлайн | лучшее место для покупки Bond Compact Silver онлайн 2018 | купить Bond Compact Silver онлайн через PayPal | купить Bond Compact Silver онлайн lucky strike | купить Bond Compact Silver онлайн канада бесплатная доставка | купить Bond Compact Silver онлайн на ebay | купить Bond Compact Silver онлайн оптом | купить Bond Compact Silver онлайн вирджиния слимы | купить Bond Compact Silver онлайн в америке | купить Bond Compact Silver онлайн с помощью echeck | купить Bond Compact Silver онлайн в Новой Зеландии | купить Bond Compact Silver онлайн Ньюпорт 100╥s | купить Bond Compact Silver онлайн через paypal россия | купить Bond Compact Silver онлайн в Кентукки | купить Bond Compact Silver дешево онлайн с бесплатной доставкой | купить Bond Compact Silver онлайн в сингапуре | купить Bond Compact Silver онлайн ванкувер | где купить Bond Compact Silver в Интернете ответы на Yahoo! купить Bond Compact Silver онлайн катар | купить Bond Compact Silver онлайн вьетнам | купить Bond Compact Silver онлайн в украине | купить Bond Compact Silver онлайн в Бангалоре | могу ли я купить Bond Compact Silver онлайн в Индии | купить Bond Compact Silver онлайн в дании | купить Bond Compact Silver в Интернете | купить Bond Compact Silver онлайн в Ньюпорте | купить Bond Compact Silver онлайн в Таиланде | лучшее место для покупки Bond Compact Silver онлайн 2017 | могу ли я купить Bond Compact Silver онлайн из европы | купить Bond Compact Silver онлайн в Брисбене | купить Bond Compact Silver онлайн верблюжий сок | купить Bond Compact Silver онлайн в бельгии | купить Bond Compact Silver онлайн в Дели | могу ли я купить Bond Compact Silver в Интернете легально | купить Bond Compact Silver онлайн на кипре | можно ли купить Bond Compact Silver в Интернете легально | купить Bond Compact Silver онлайн в Вирджинии | купить Bond Compact Silver онлайн в США | купить Bond Compact Silver онлайн в дубае купить Bond Compact Silver онлайн с доставкой | купить Bond Compact Silver онлайн в Мумбаи | купить Bond Compact Silver онлайн через PayPal | купить Bond Compact Silver онлайн с доставкой в тот же день | купить Bond Compact Silver онлайн в Австралии PayPal | купить Bond Compact Silver онлайн для коренных американцев | купить Bond Compact Silver онлайн, штат Иллинойс | купить Bond Compact Silver онлайн в Аризоне | купить Bond Compact Silver онлайн, мексика | купить Bond Compact Silver онлайн, Керала | купить Bond Compact Silver онлайн в Абу-Даби | купить Bond Compact Silver онлайн в японии | купить Bond Compact Silver онлайн в европе | купить Bond Compact Silver онлайн отзывы | купить Bond Compact Silver онлайн с доставкой на следующий день | купить Bond Compact Silver онлайн в Миссури | купить Bond Compact Silver онлайн в Австралии | купить Bond Compact Silver онлайн за рубежом | купить Bond Compact Silver онлайн международная доставка | купить Bond Compact Silver онлайн джарум | купить Bond Compact Silver онлайн без идентификатора | купить Bond Compact Silver онлайн в Пенсильвании | купить Bond Compact Silver онлайн в Индии Хайдарабад | купить Bond Compact Silver онлайн в германии | купить Bond Compact Silver онлайн рядом со мной | купить Bond Compact Silver онлайн онтарио | купить Bond Compact Silver онлайн в рияде | купить Bond Compact Silver онлайн гургаон | купить Bond Compact Silver онлайн оптом | купить Bond Compact Silver онлайн в Нью-Йорке | купить Bond Compact Silver онлайн с быстрой доставкой | купить Bond Compact Silver онлайн в украине | можем ли мы купить Bond Compact Silver в Интернете | купить Bond Compact Silver онлайн легальный 2017 | купить Bond Compact Silver онлайн монреаль | купить Bond Compact Silver онлайн кворум | купить Bond Compact Silver онлайн с бесплатной доставкой по индии | купить Bond Compact Silver онлайн в румынии | купить Bond Compact Silver онлайн в Нью-Йорке | купить Bond Compact Silver онлайн с помощью кредитной карты | купить Bond Compact Silver онлайн в Мичигане | купить Bond Compact Silver онлайн в сша | купить Bond Compact Silver онлайн бесплатная доставка сша | купить Bond Compact Silver онлайн в tesco | купить Bond Compact Silver онлайн незаметно | купить Bond Compact Silver онлайн в испании | купить Bond Compact Silver онлайн Перт | купить Bond Compact Silver онлайн в гибралтаре | купить Bond Compact Silver онлайн пуна | купить Bond Compact Silver онлайн, бахрейн | купить Bond Compact Silver онлайн пачкой | купить Bond Compact Silver онлайн в Йоханнесбурге | купить Bond Compact Silver онлайн в Швеции | купить Bond Compact Silver онлайн в биткойнах | купить Bond Compact Silver онлайн в дакке | можно ли купить Bond Compact Silver онлайн в канаде | купить Bond Compact Silver онлайн орг | купить Bond Compact Silver онлайн в Египте | купить Bond Compact Silver онлайн в калифорнии | купить Bond Compact Silver онлайн в канаде | купить Bond Compact Silver онлайн бронирование в Индии | купить Bond Compact Silver онлайн в Грузии | купить Bond Compact Silver онлайн, Бангладеш | купить Bond Compact Silver онлайн marlboro | купить Bond Compact Silver онлайн с быстрой доставкой | купить Bond Compact Silver онлайн из мексики | купить онлайн визу Bond Compact Silver | купить Bond Compact Silver онлайн кувейт | купить Bond Compact Silver онлайн бесплатная доставка uk | купить Bond Compact Silver в сети Walmart | можно ли купить Bond Compact Silver онлайн в Индии | можно ли купить Bond Compact Silver в Интернете | купить Bond Compact Silver онлайн пакистан | могу ли я купить Bond Compact Silver в Интернете nz | купить Bond Compact Silver онлайн хьюстон | купить Bond Compact Silver онлайн легально в Нью-Йорке | купить Bond Compact Silver онлайн американский спирт | купить Bond Compact Silver онлайн | купить Bond Compact Silver онлайн и забрать в магазине | купить Bond Compact Silver онлайн в Мельбурне | могу ли я купить Bond Compact Silver онлайн в австралии | купить Bond Compact Silver онлайн ченнаи | купить Bond Compact Silver онлайн россия |
СигаретыBond Compact Silver — SmokeAndShop
49 евро.30
Тип коробки: Компактная коробка
Кол-во: 200 сигарет
Минимальное количество коробок: 3
Пакеты: 10
Никотин: 0,3 мг
Смола: 4 мг
3 коробки EUR 147.90 6 коробок 295,80 евро 9 коробок EUR 443.70 12 коробок 591,60 евро 15 коробок EUR 739.50 18 коробок EUR 887,40
Купить сигареты Bond с доставкой в Канаду онлайн
Смола 12 мг Никотин 0.9 мг Тип King Size Box Цена за 1 коробку
71,51 канадских долларов / 56,00 долларов США
Смола 6 мг Никотин 0,5 мг Тип Компактная коробка Цена за 1 коробку
CAD 71.51 / 56,00 долларов США
Смола 5 мг Никотин 0,5 мг Тип Компактная коробка Цена за 1 коробку
71,89 канадских долларов / 56,30 долларов США
Смола 4 мг Никотин 0.3 мг Тип Компактная коробка Цена за 1 коробку
71,51 канадских долларов / 56,00 долларов США
Смола 6 мг Никотин 0,6 мг Тип King Size Box Цена за 1 коробку
CAD 84.66 / 66,30 долларов США
Смола 4 мг Никотин 0,3 мг Тип Компактная коробка Цена за 1 коробку
50,44 канадских долларов / 39,50 долларов США
Смола 6 мг Никотин 0.5 мг Тип King Size Box 25 Цена за 1 коробку
39,07 канадских долларов / 30,60 долларов США
Смола 5 мг Никотин 0,5 мг Тип King Size Цена за 1 коробку
CAD 65.76 / 51,50 долларов США
Смола 4 мг Никотин 0,4 мг Тип King Size Box Цена за 1 коробку
39,71 канадских долларов / 31,10 долларов США
Смола 4 мг Никотин 0.3 мг Тип King Size Box 25 Цена за 1 коробку
39,07 канадских долларов / 30,60 долларов США
Смола 6 мг Никотин 0,5 мг Тип Компактная коробка Цена за 1 коробку
CAD 37.80 / 29,60 долларов США
Смола 10 мг Никотин 0,7 мг Тип Компактная коробка Цена за 1 коробку
37,80 канадских долларов / 29,60 долларов США
Смола 4 мг Никотин 0.3 мг Тип Компактная коробка Цена за 1 коробку
37,80 канадских долларов / 29,60 долларов США
Bond Cigarettes
Чтобы определить факторы, влияющие на успешный онлайн-бизнес, необходимо понимать контекст как маркетинга, так и брендинга в области табачной промышленности.Большинство онлайн-продавцов сосредотачиваются на бренде, потому что они знают важность имени, когда речь идет о курении. Сигареты Bond не исключение из этого правила. Напротив: вы редко встретите настоящие, подробные презентации аромата и вкуса сигарет Bond.
Чтобы убедиться, что вы покупаете оригинальные сигареты, вам необходимо соблюдать очень строгий набор правил. Для успешной покупки необходимо внимательно выполнять каждый шаг ниже:
- Определите лучшие онлайн-предложения в вашем районе.Важно придерживаться ближайших к вам розничных продавцов, чтобы меньше платить за доставку. На данном этапе должно хватить десяти таких ритейлеров.
- Сузьте этот список, сравнив окончательную стоимость одной сигареты или пачки. Придерживайтесь пяти розничных продавцов.
- Свяжитесь с ними и проверьте, нет ли у них специального предложения, которым вы могли бы воспользоваться. Эти предложения связаны либо с определенной датой в календаре, либо с количеством пакетов, которые вы готовы купить.
- Проверьте, ведет ли продавец легальный бизнес.Самый простой способ сделать это — связаться с ними и задать очень конкретные и прямые вопросы об их бизнесе: где они берут сигареты? Как долго вы занимаетесь онлайн-бизнесом? И т. Д. Если они уклоняются от ответа или, что еще хуже, отказываются отвечать, избегайте их любой ценой.
- Дважды проверьте условия доставки и убедитесь, что они соответствуют вашим потребностям.
Покупка сигарет Bond в Интернете может быть очень прибыльным бизнесом, если вы установите отношения, основанные на доверии.Если вы продолжите покупать у одних и тех же розничных продавцов, в какой-то момент они смогут предложить вам скидку, которая еще больше снизит ваши общие расходы.
ա Bond Street Compact Silver 7.0 Bond նը 420 րամ
աքում Երևանում
Առաքման արժեքը Երեւանում կազմում է 500 դրամ: Ծանրակշիռ պատվերների առաքումը (25 կգ +), որի դեպքում հարկավոր է պատվերն առաքել բեռնափոխադրող ավտոմեքենայի միջոցով, գործում են հետեւյալ առաքման արժեքները `
— 3000 րամ `մինչև մուտք առաքման համար
— 5000 դրամ `մինչև բնակարան առաքման համար
Նոր Զովք սուպերմարկետների ցանցից կատարված գնումների առաքման արժեքը 800 դրամ է: Սուպերմարկետից `մինչեւ 16:00 կատարված գնումներն առաքվում են 3-4 ժամվա ընթացքում, 16: 00-ից հետո գրանցված պատվերներն առաքվում են հաջորդ օրը:
ա եպի ՀՀ արեր
աքումը դեպի ՀՀ մարզեր իրականացվում է 2 արբերակով `
— 1200 րամ մինչև նշված քաղաքում գործող ինքնարտահանման կետ առաքելու դեպքում
— 1500 դրամ մինչև բնակարան առաքման դեպքում
Առաքման քարտեզում ընդգրկված բնակավայրերի ցուցուկին կարող եք ծանոթանալ հենց զամբյուղի էջում `առաքման քաղաքը նշելիս:
Առաքման ժամկետներ
Կայքում ներկայացված ապրանքատեսակներից յուրաքանչյուրի համար գործում են առանձին առաքման ժամկետներ: Տեսականու մեծամասնության համար առաքումն իրականացվում է պատվերի ձեւակերպման հաջորդ օրը: Նշված ապրանքատեսակի առաքման ժամկետներին ծանոթանալ կարող եք տվյալ ապրանքատեսակի էջում:
Ոչ ատշաճ րակի ապրանքների երադարձ և փոխանակու մ
Եթե Ձեզ առաքված ապրանքը չի համապատասխանում կայքում ներկայացված նկարագրությանը, վնասված է կամ ունի այլ թերություն, Դուք կարող եք պահանջել թերի ապրանքի փոխարինում կամ լիարժեք վերադարձ:
Յուրաքանչյուր ապրանքի արտաքին որակային համապատասխանությունը անհրաժեշտ է ստուգել առաքման պահին `առաքիչի ներկայությամբ, ստորագրելով առաքիչի ներկայացված առաքման անդորրագիրը: Այդ իսկ պատճառով, խնդրում ենք Ձեզ ուշադիր ստուգել առաքանին առաքիչի ներկայությամբ, եւ թերացումների դեպքում վերադարձն իրականացնել տեղում կամ պահանջել տվյալ ապրանքատեսակի փոխարինում նույն կամ նմանատիպ այլ ապրանքատեսակով :
Crossroad- ը չի կրում պատասխանատվություն առաքիչի հեռանալուց հետո առաջացած խնդիրների համար, բացառությամբ այն առանձին դեպքերի, երբ ապրանքի թերացումը ֆունկցիոնալ է եւ հայտնաբերվել է օգտագործման ընթացքում: Տվյալ դեպքում, Դուք կարող եք իրականացնել փոխարինում կամ վերադարձ, ապրանքի առաքման պահից սկսած 7 օրերի ընթացքում, բացառությամբ ստորեւ նշված ապրանքացուցակի եւ դեպքերի: Օգտագործման ընթացքում թերացում հայտնաբերելու դեպքում ապրանքի վերադարձը կամ փոխարինումը իրականացվում են բացառապես Crossroad- ի գրասենյակում եւ ՀԴՄ կտրոնի ու առաքման անդորրագրի առկայության դեպքում:
Վնասված ապրանքի վերադարձի դեպքում, վերադարձվում է պատվերի գումարը ամբողջովին `առաքման արժեքը ներառյալ: Փոխարինման դեպքում, փոխարինող ապրանքի առաքումն իրականացվում է անվճար: Վերադարձի համար ոչ ենթակա ապրանքների համար Crossroad- ը, իր հայացողությամբ, կարող է վերանորոգել ապրանքը եւ վերացնել թերությունը, կամ փոխարինել այլ համարճեք մոդելով ՝ պահպանելով ապրանքի արտաքին տեսքի պատշաճ լինելը և համապատասխանությունը ապրանքի նկարագրությանը։
Առանձին դեպքերում, երբ Ձեր գնած ապրանքատեսակն ունի երաշխիքային սպասարկման ժամկետ, փոխարինումն ու վերադարձը իրականացվում են երաշխիքային կտրոնի վրա նշված երաշխիքային սպասարկման կետում եւ երաշխիքային պայմաններով:
Պատշաճ որակի ապրանքների վերադարձ և փոխանակում
Կայքից ձեռք բերված յուրաքանչյուր ապրանք, բացառությամբ ստորեւ նշված ապրանքատեսակների ցուցակից, կարող է վերադարձվել կամ փոխարինվել այլ ապրանքատեսակով առաքման պահից սկսած 14 օրերի ընթացքում, եթե ապրանքն եւ վերջինիս փաթեթավորումն անվնաս են, նշված ապրանքը չի օգտագործվել, պահպանված են դրա ապրանքատեսքը, սպառողական հատկությունները, կապարակնիքները, ապրանքային պիտակները: Վերադարձն իրականացնելու համար անհրաժեշտ է վերադարձնել ապրանքը րասենեարանքը գրասենեայ հետևանքը րասենեայ փետևայթղթեկկկ
- տ կտրոն
- աերի անդորրագիր
Պատշաճ որակի ապրանքի վերադարձի կամ փոխանակման դեպքում հաշվի է առնվում միայն ապրանքի արժեքը, առաքումը դիտարկվում է որպես առանձին մատուցված ծառայություն, որի համար վճարումն անպայման գանձվում է:
Առանձին դեպքերում, երբ պատվերի համար գործող ակցիայի շրջանակներում առաքման գումարը զեղչվել է կամ ծառայությունը մատուցվել է անվճար, վերադարձի պահին վերադարձվող գումարից գանձվում է առաքման գումարը ըստ տվյալ տարածաշրջանի համար գործող առաքման հիմնական դրույքի:
ետևյալ ապրանքները վերադարձի ենթակա չեն `
- Ապրանքների պատրաստումը և մատակարարումը իրականացվել են գնորդի հատուկ պահանջներին համապատաան, կամ ապրաքկան, կամ ապրանքեն
- Ապրանքներ տնային պայմաններում հիվանդությունների կանխարգելման եւ բուժման համար (մետաղից, ռետինից, տեքստիլ եւ այլ նյութերից առողջարարության (կազդուրիչ) եւ հիգիենայի առարկաներ, բժշկական գործիքներ, սարքեր ու ապարատներ, տեսողության լինզաներ, երեխաների խնամքի առարկաներ), դեղորայք,
- Անձնական հիգիենայի առարկաներ (ատամի խոզանակներ, անրեր, մազակալներ, ներ, կեղծամներ, նոայ
- Պարֆյումերակոսմետիկական ապրանքներ,
- Բամբակյա, վուշե, մետաքսյա, բրդյա եւ սինթետիկ կտորներ, գործվածքի տիպի ոչ գործվածքային նյութերից ապրանքներ (ժապավեններ, երիզահանգույցներ, ժանյակներ եւ այլն), մալուխային արտադրանք (լարեր, քուղեր, մալուխներ եւ այլն), շինարարական եւ վերջնամշակման экземпляры (լինոլեում, թաղանթներ, գորգային ծածկեր և այլն) և մետրերով բաց թողնվող այլ ապրանքներ,
- Տրիկոտաժե սպիտակեղեն, գուլպեղենի արտադրանք,
- Պոլիմերային նյութերից ապրանքներ եւ նյութեր, որոնք շփվում են սննդամթերքին, այդ թվում `միանգամյա օգտագործման (ճաշի եւ խոհանոցային ամանեղեն ու պարագաներ, սննդամթերքի պահման եւ տեղափոխման համար տարողություններ ու փաթեթավորման նյութեր),
- Կենցաղային քիմիական ապրանքներ, պեստիցիդներ և ագրոքիմիկատներ,
- Թանկարժեք մետաղներից ապրանքներ, թանկարժեք քարերով ապրանքներ, կիսաթանկարժեք եւ սինթետիկ քարերով ագուցված թանկարժեք մետաղներից պատրաստված ապրանքներ, երեսակված թանկարժեք քարեր,
- Ավտոմեքենաներ ու մոտոհեծանվային ապրանքներ եւ դրանց կցորդները եւ համարակիր ագրեգատները, գյուղատնտեսական աշխատանքների համար նախատեսված փոքր մեխանիզացիայի շարժամիջոցներ, զբոսանավեր եւ կենցաղային նշանակության այլ ջրային սարգավորումներ,
- կ կահույք, պ ապրանքներ և լողավազաններ (փչովի և հավաքովի),
- Կենցաղային նշանակության տեղնիկական սարքավորումներ (մետաղի մշակման եւ փայտի մշակման հաստոցներ), կենցաղային էլեկտրոտեխնիկական սարքեր եւ սարքավորումներ, կենցաղային էլեկտրոնիկա, հաշվիչ տեխնիկա, պատճենահանման տեխնիկա, ֆոտո եւ տեսախցիկներ, հեռախոսներ եւ ֆաքսիմիլային սարքավորումներ, էլեկտրոնային երաժշտական գործիքներ, էլեկտրոնային խաղալիքներ, կենցաղային գազի սարքավորումներ եւ սարքեր ,
- Տպագրական ապրանքներ եւ նյութեր, գրքեր, բրոշյուրներ, ալբոմներ, քարտեզներ, նոթատետրեր, երաժշտական գրքեր եւ ալբոմներ, պլակատներ, օրացույցներ, բուկլետներ, ինչպես նաեւ նյութեր թվային կրիչների վրա,
- Կենդանիներ և բույսեր։
Դրամական փոխհատուցում
Որպես օրենք, փոխհատուցվող գումարը հետ է վերադարձվում գնորդի Crossroad- ի անձնական հաշվի հաշվեկշռին։ Փոխհատուցումը իրականացվում է վերադարձվող ապրանքի Crossroad- ի գրասենյակ մուտք գործելուց 3 աշխատանքային օրվա ընթացքում։
Որոշ դեպքերում, գնորդի պահանջով կամ Crossroad- ում անձնական հաշվի բացակայության դեպքում, փոխհատուցվող գումարը հետ է վերադարձվում պատվերի ձեւակերպման ժամանակ օգտագործված վճարման եղանակին,
- բանկային քարտի վճարման դեպքում հետ է վերադարձվում նույն բանկային քարտին,
- բանկային փոխանցման դեպքում հետ է վերադարձվում նույն բանկային հաշվին,
- PayPal ամակարգով վճարման դեպքում հետ է երադարձվում նույն PayPal հաշվին,
- iDram համակարգով վճարման դեպքում հետ է երադարձվում նույն iDram հաշվին,
- վճարման թերմինալներով կամ կանխիկ եղանակով կատարված վճարումները հետ են վերադարձվում կանխիկ տեսքով։
Եթե դրամային փոխհատուցումը կատարվում է ոչ պատշաճ որակի ապրանքների վերադարձի դեպքում, ապա փոխհատուցվող գումարից լրացուցիչ պահումներ
Եթե դրամային փոխհատուցումը կատարվում է պատշաճ որակի ապրանքների վերադարձի դեպքում, ապա փոխհատուցվող գումարից, բացի ապրանքի առաքման գործող սակագնից, կպահվեն նաեւ վճարման հետ կապված բանկային ծախսերը,
- բանկային քարտերի դեպքում ՝ փոխհատուցվող գումարի 3% -ը,
- PayPal համակարգի վճարման դեպքում ՝ $ 0.30 (երեսուն ամերիկյան ցենտ) -ին համարժեք ՀՀ դրամ և 3,5% վճարված գումարից,
- Վճարային թերմինալների դեպքում ՝ 3,5% վճարված գումարից։
Сегрегированный, частично окисленный и компактный кластер Ag10 в инкапсулирующем ДНК-хозяине
Abstract
Кластеры серебра развиваются внутри цепей ДНК и становятся оптическими хромофорами с различными электронными спектрами и широким диапазоном интенсивности излучения. Эти исследования рассматривают конкретный кластер, который поглощает на длине волны 400 нм, имеет низкую эмиссию и развивается исключительно с одноцепочечными олигонуклеотидами.Это также хамелеоноподобный хромофор, который может превращаться в различные флуорофоры с высокой эмиссией. Мы описываем четыре характеристики этого вида и заключаем, что он сильно окислен, но при этом также имеет металл. Во-первых, размер кластера определяли с помощью масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением. Общая масса серебра измеряется с разными олигонуклеотидами и, таким образом, поддерживает кластер Ag 10 . Во-вторых, заряд кластера определялся масс-спектрометрией и рентгеновской спектроскопией поглощения рентгеновских лучей Ag L 3 на краю.Соответственно, сопряженная масса и интегральная интенсивность белой линии поддерживают частично окисленный кластер с зарядом +6 и +6,5 соответственно. В-третьих, хиральность кластера измерялась спектроскопией кругового дихроизма. Эта хиральность изменяется в зависимости от длины и последовательности ДНК-хозяев, и эти исследования идентифицировали рассредоточенный сайт связывания с ~ 20 азотистыми основаниями. В-четвертых, структура этого комплекса была исследована с помощью спектроскопии тонкой структуры Ag K-края с расширенным рентгеновским поглощением. Анализ подгонки мультиоболочки выявил три уникальные среды рассеяния с соответствующими длинами связей, координационными числами и факторами Дебая-Валлера для каждой.В совокупности эти данные подтверждают следующий вывод: кластер Ag 10 +6 развивается в участке связывания ДНК из 20 нуклеотидов, и этот комплекс сегрегируется в компактное металлическое серебряное ядро, которое слабо связывается с инкапсулирующим серебром — Оболочка ДНК. Мы рассматриваем различные модели, учитывающие координацию серебра с серебром в ядре.
ВВЕДЕНИЕ
Кластеры серебра диаметром ~ 1 нм представляют собой хромофоры с молекулярно-подобными неплазмонными спектрами. 1–7 Они поглощают в оптическом спектре и могут сильно излучать, поэтому они отличаются от массивных серебряных и серебряных наночастиц. 8 Их спектры зависят от числа атомов серебра, поэтому синтез кластеров атомарной точности открывает возможность набора программируемых хромофоров, отличных от других флуоресцентных меток. 9–14 Определенные частицы образуются через адсорбаты, которые координируют поверхность кластера и, таким образом, ингибируют агломерацию. Эти лиганды контролируют как размер кластера, так и электронные спектры, о чем свидетельствуют тиолы, которые сильно координируют кластеры серебра и сдвигают их оптические спектры. 15 Наши исследования сосредоточены на лигандах ДНК, которые образуют кластеры серебра в водном растворе. 16–22 Эти полимерные лиганды координируют Ag + через свои азотистые основания и способствуют агломерации серебра, когда локально концентрированные аддукты Ag + химически восстанавливаются. 23–26 Инкапсулированные кластеры развивают дискретные и редко организованные электронные состояния и становятся оптическими хромофорами с несколькими отличительными характеристиками. Они обладают высокой молекулярной яркостью благодаря коэффициентам экстинкции ~ 10 5 M -1 см -1 и квантовым выходам флуоресценции до 90%, сильному и устойчивому излучению из-за времени жизни флуоресценции ~ 1 нс и слабосвязанных возбужденных электронных состояния и излучение, которое можно оптически модулировать через временно заселенные темные состояния. 27–30 Наконец, их спектры охватывают видимую и ближнюю инфракрасную области спектра и кодируются первичной последовательностью и вторичной структурой ДНК-хозяина. 28,29,31–33
Наши исследования сосредоточены на конкретном кластере с λ max ≈ 400 нм и с низкой эмиссией, который развивается исключительно внутри одноцепочечных олигонуклеотидов. Мы заинтересованы в этом виде, потому что это хамелеоноподобный предшественник, который может трансформироваться в различные флуоресцентные кластеры посредством гибридизации ДНК.Одноцепочечная ДНК-хозяин гибридизуется с комплементарной цепью, и фиолетовый предшественник переключается на флуоресцентный кластер с излучением в 100 раз сильнее. 25,34 Спектр флуоресценции кодируется последовательностью ДНК. Кроме того, фиолетовый предшественник регенерируется при денатурировании дуплекса. 35
Такие пары тусклых / ярких кластеров являются основой нового класса оптических сенсоров, и наша цель — устранить лежащие в основе изменения в электронной структуре. 7,19,20,32 Настоящие исследования сосредоточены на фиолетовом кластере в комплексе с 20-нуклеотидной цепью ДНК, и мы использовали три метода для характеристики стехиометрии кластера, степени окисления, лигандного окружения и структуры. Во-первых, масс-спектрометрия с ионизацией электрораспылением измеряла стехиометрию серебра с 20 нуклеотидом и более длинной цепью ДНК, и общая, доминирующая эмпирическая стехиометрия поддерживает определенный размер кластера. Масс-спектрометрия также количественно определяла количество H + , связанного с фосфатным остовом, а потеря H + означает частично катионный кластер.Два исследования с использованием рентгеновской абсорбционной спектроскопии выявили степень окисления кластера и фундаментальные связывающие взаимодействия в комплексах кластер / ДНК в природной водной среде. 36 Спектры рентгеновского поглощения Ag L 3 на краю ближнего края измеряли заряд кластера через заселенность валентных электронных состояний серебра. Расширенная область тонкой структуры поглощения рентгеновских лучей в спектрах K-края Ag выявила три пути рассеяния, которые приписывались взаимодействию серебро-азотистое основание и двум типам взаимодействий серебро-серебро.Три, спектроскопия кругового дихроизма исследовала окружение лиганда, потому что хироптический ответ кластера изменяется в зависимости от длины и последовательности ДНК-хозяина. Эти исследования подтверждают наличие расширенного сайта связывания ДНК. В совокупности наши исследования предполагают, что комплекс фиолетовый кластер / ДНК разделяется на отдельные компоненты: инкапсулирующую ДНК-серебряную оболочку, металлическое серебряное ядро и динамическую связь ядро-оболочка. Мы обсуждаем конкретные структурные модели, основанные на этих взаимодействиях. 37–39
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Мы следовали экспериментальному протоколу из наших более ранних исследований, и ключевые аспекты были обобщены. 25,40,41 20-нуклеотидная цепь ДНК, использованная для большинства этих исследований, былаCCAACTCCTTCCCGCCAC, где полярность цепи 5 ‘→ 3’. Кластеры были приготовлены с использованием AgNO 3 (Acros), восстановителем был NaBH 4 (Aldrich). Эти реагенты использовались в том виде, в котором они были получены. Конъюгаты с фиолетовыми кластерами были сформированы путем объединения 8 эквивалентов Ag + с 30 мк M олигонуклеотида в воде. Этот раствор объединяли с BH 4 —, и фиолетовый кластер был выделен путем воздействия на раствор 500 psi O 2 при комнатной температуре в течение 3 часов.Для масс-спектрометрических исследований эти растворы подвергали диализу для достижения 10 2 –10 4 разведения веществ с более низкой молекулярной массой. Масс-спектры собирали с помощью Q-TOF G2-S (Waters) и анализировали с помощью MassLynx V4.1. Образцы разбавляли водой до концентрации олигонуклеотида 0,3 мкМ М и вводили с помощью шприцевого насоса, работающего при 20 мкл л / мин. Спектры были получены в режиме отрицательных ионов с капиллярным напряжением -2,7 кВ, напряжением на конусе отбора проб -15 В, напряжением на экстракционном конусе 10 В, конусным газовым потоком 45 л / ч конусного газа и десольватационным газом. расход 450 л / ч.Температура источника составляла 80 ° C, а температура десольватации составляла 130 ° C. Калибровку масс проводили с использованием агрегатов формиата натрия в диапазоне 400 < м / z <2000. Каждый масс-спектр представлял собой среднее значение 290 сканирований, собранных в режиме V, и эти спектры обрабатывались с помощью программного обеспечения MassLynx. Пики, связанные с пиками различных зарядовых состояний, были сведены к состоянию с нулевым зарядом, чтобы восстановить спектр масс нейтральных частиц. 42–44 Ag K-край (25514 эВ) и Ag L 3 -край (3351 эВ) Были получены рентгеновские спектры конъюгатов Ag-ДНК в забуференном водном растворе при концентрации кластеров ~ 5 мМ.Канал пучка PNC-XSD (сектор 20-BM) в усовершенствованном источнике фотонов, Аргоннская национальная лаборатория (Иллинойс, США), использовался для сбора данных EXAFS по K-краю Ag. Эксперименты проводились при комнатной температуре в условиях окружающей среды. Данные были собраны для образца в фазе раствора в режиме флуоресценции с использованием 12-элементного детектора флуоресценции. Множественные сканы усреднялись для достижения минимального экспериментального шума в последней k-области данных EXAFS. Ag L 3 XANES с краем собирали на конечной станции SXRMB в канадском источнике света (Саскатун, Южная Каролина, Канада).Эксперименты проводились в фазе раствора при комнатной температуре в потоке газа N 2 . Данные были собраны в режиме флуоресценции с получением нескольких сканирований для обеспечения воспроизводимости и минимизации экспериментального шума в области XANES. Все данные XAS были вычтены, нормализованы и преобразованы в k- и R-пространство с использованием стандартных протоколов обработки данных (рисунок S13). 45 Моделируемые траектории рассеяния, используемые для соответствия данным EXAFS Ag K-edge, были сгенерированы с использованием FEFF8.2 вычислительное программное обеспечение. 46 Сообщенные погрешности для результатов подгонки EXAFS были вычислены на основе недиагональных элементов корреляционной матрицы, которые были взвешены как квадратный корень из приведенного значения хи-квадрат, полученного для каждой смоделированной подгонки. Также учитывалась величина экспериментального шума для каждого преобразованного Фурье спектра R-пространства в диапазоне 15–25 Å. 47 Линейная комбинированная аппроксимация данных XANES Ag L 3 -edge была проведена с использованием программного обеспечения Athena и Ifeffit. 48,49 Подгонка линейной комбинации проводилась от -20 до 30 эВ по отношению к краю поглощения (E 0 для Ag L 3 ), и из результата подбора была определена статистика R-фактора 0,017. чтобы указать степень соответствия. 50
Спектры поглощения были получены с помощью Cary 50 (Varian) при скорости сканирования 600 нм / мин с использованием подходящего базового уровня буфера и пластиковых кювет (BrandTech). Спектры кругового дихроизма регистрировали на спектрофотометре DSM 17 CD (Olis).Спектры были получены в диапазоне 600–220 нм с использованием кварцевых кювет с длиной пути 1 см при скорости сканирования ~ 150 нм / мин. Фоновый спектр воды собирали и вычитали из трех усредненных сканирований образца. Эксклюзионные хроматограммы получали с помощью системы высокоэффективной жидкостной хроматографии Prominence (Shimadzu) с использованием колонки 300 × 7,8 мм 2 BioSep-SEC-S2000 (Phenomenex), имеющей 5 мкм частиц размером мкм и размером пор 145 Å. Подвижная фаза была забуферена при pH = 6.5 с 10 мМ цитрат / лимонная кислота с добавлением 300 мМ NaClO 4 для минимизации взаимодействия растворенных веществ с неподвижной фазой. 51,52
РЕЗУЛЬТАТЫ
Стехиометрия кластера
Наши предыдущие исследования установили размер кластера и подкрепляют наши новые исследования, поэтому сначала мы суммируем эти результаты. 25 Фиолетовый кластер развивается в 20-нуклеотидной цепи ДНК с концентрациями 10 Ag + : ДНК и высокое давление кислорода.Мы выбрали эти условия, потому что они исключают конкурирующие виды и благоприятствуют фиолетовому кластеру (Рисунок S1). Неочищенную реакционную смесь охарактеризовали с помощью масс-спектрометрии с ионизацией электрораспылением и идентифицировали два типа цепей ДНК (вставка). Молекула с массой 5878 а.е.м. является природной ДНК, в то время как более тяжелые частицы с массой 6951 а.е.м. представляют собой ту же цепочку с 10 серебристыми. Три наблюдения связали этот газообразный комплекс ДНК с серебром с водным конъюгатом ДНК с фиолетовым кластером.Во-первых, реакционная смесь также была проанализирована с помощью эксклюзионной хроматографии, и этот метод соответственно идентифицировал два типа цепей ДНК в водном растворе (рис. S2). Связанные и свободные нити различались по их электронным спектрам, и их относительные количества составляли 2,5: 1 соответственно, что выгодно отличается от соотношения 3,3: 1 для газовых нитей (вставка). Это сходство предполагает, что распределение частиц в водном растворе точно отображалось в газовой фазе.Во-вторых, поглощение комплекса ДНК-фиолетовый кластер увеличилось с 2 до 8 Ag + : ДНК, и пропорционально увеличилось содержание газообразного комплекса 10-Ag / ДНК. 25 Эта корреляция между водными и газообразными количествами комплексов дополнительно связывает эти два вида. В-третьих, газовый комплекс пережил ряд энергий столкновений, температур и скоростей газовых потоков. 53 Эта стабильность предполагает, что конъюгат кластер / ДНК сохранял свою целостность не только в газовой фазе, но и в исходном водном состоянии.Эта стехиометрия 10-Ag подтверждается элементным анализом in situ и калориметрическими исследованиями. 25
(A) Масса: спектр заряда фиолетового кластера — образец ДНК. Пики, обозначенные от -11 до -5, соответствуют соответствующим ионам комплекса Ag10 / ДНК. Пики, обозначенные от -10 ДНК до -5 ДНК, соответствуют соответствующим ионам нативной цепи ДНК. На вставке показан составной спектр без заряда, который идентифицирует нативную ДНК при 5878 а.е.м. и ДНК с 10 Ag при 6951 а.е.м. Пики * представляют аддукты Na + .(B) Расширенный вид состояния заряда -6. Самый левый набор пиков соответствует комплексу, в котором только H + связано с фосфатами. Синие отметки в виде галочки представляют собой предсказанные массы, основанные на молекулярной формуле олигонуклеотида с 10 серебристыми и 6 атомами водорода меньше. Самый правый набор пиков соответствует тому же иону с 1 Na +, который заменяет 1 H + . Точность между наблюдаемыми и предсказанными массами изотопологов составляет 0,3 ± 0,4 и 0,4 ± 0,4 м.д. соответственно.
Масс-спектры измеряли эмпирическую стехиометрию серебро: ДНК, и альтернативный ДНК-хозяин поддерживал ту же относительную стехиометрию. К исходной цепи из 20 азотистых оснований было добавлено восемь дополнительных или на 40% больше азотистых оснований, и эти добавленные азотистые основания увеличили количество потенциальных координационных сайтов для кластера (рисунок S3A). 54,55 Несмотря на свою большую длину, более длинная нить имитировала свою родительскую в двух отношениях. Во-первых, доминирующими видами в обоих масс-спектрах были соответствующие олигонуклеотиды с 10 дополнительными серебрами.Два, оба комплекса демонстрировали сходные спектры поглощения и кругового дихроизма (и S3, цепи 1 и 3). Эти наблюдения предполагают, что 10 серебристых окрасов агломерировались и образовывали единый кластер в общем сайте связывания ДНК. В совокупности эти эксперименты показывают, что фиолетовый хромофор представляет собой кластер Ag 10 .
Спектры кругового дихроизма фиолетовых кластеров с ДНК-матрицами из. Что касается цепи 1, красные крестики обозначают делеции, а красные отростки относятся к дополнительным 3′-основаниям.Цифры относятся к номерам прядей в столбце 1 документа.
Cluster Charge
Фиолетовый кластер преимущественно образуется с окислителями O 2 и H 2 O 2 . 25 Эта реакционная способность предполагает, что кластер является катионным, и заряд был определен с помощью измерений масс-спектрометрии и рентгеновской абсорбционной спектроскопии. Масс-спектрометрия показывает, что масса комплекса олигонуклеотид-кластер (6951 а.е.м.) была на 6 а.е.м. ниже, чем объединенная масса нативного олигонуклеотида (5878 а.е.м.) и 10 серебра (1079 а.е.м.) ().Мы связываем этот дефицит с отсутствием протонов и, в конечном итоге, с зарядом кластера. 30,56,57 Во время десольватации различное количество H + связывается с фосфатным остовом и дает ряд ионов с чистыми зарядами от -5 до -11 (). 44 Число H + было выведено из тонкой структуры в масс-спектре (). У данного иона есть ряд изотопологов из-за его естественного распределения изотопов, а характер пиков продиктован количеством и типом атомов, то есть молекулярной формулой. 30,57–60 Наш анализ основан на нейтральном олигонуклеотиде с формулой C 187 H 244 O 116 N 65 P 19 , и мы сосредоточены на его двух изоэлектронных ионах с −6 обвинения. Немеченый олигонуклеотид имеет структуру пиков, которая воспроизводится формулой C 187 H 238 O 116 N 65 P 19 −6 (фигура S5). Таким образом, этот ион развил свой заряд -6, потому что он потерял 6 H + по сравнению с полностью протонированной цепью.Соответствующий меченный Ag 10 олигонуклеотид имел более плотную структуру пиков из-за его десяти дополнительных серебристых частиц с естественным содержанием 51,8% 107 Ag и 42,8% 109 Ag (). Положения и интенсивности этих пиков были воспроизведены по формуле C 187 H 232 O 116 N 65 P 19 Ag 10 −6 . Таким образом, этот ион потерял еще шесть H + по сравнению со своим немеченым аналогом, и эти недостающие протоны объясняют дефицит массы в составном масс-спектре (вставка).Альтернативные формулы с ± 1 H + предсказывают заметно разные распределения с большими стандартными отклонениями и, таким образом, подтверждают потерю, в частности, 6 H + (Рисунок S6). 61 Мы предполагаем, что кластер имеет заряд +6, чтобы олигонуклеотидный хозяин сохранял свой общий заряд -6, выделяя 6 дополнительных H + . Остальным семи ионам с чистыми зарядами от -5 и от -7 до -11 также не хватало 6 H + по сравнению с их нелигированными аналогами, так что эти согласованные смещения поддерживают постоянное состояние окисления +6 для кластера (рисунок S7).
Три эксперимента манипулировали общим зарядом ДНК и косвенно исследовали заряд кластерного аддукта. Во-первых, ацетат аммония изменил степень протонирования (Рисунок S8). 62 Эта соль образует буферный раствор и создает менее отрицательно заряженные ионы. Распределение изотопологов снова показывает, что эти заряженные ионы от -4 до -10 не имеют 6 H + по сравнению с их нелигированными аналогами (рис. S9). Во-вторых, Na + образуют комплексы, которые также нейтрализуют общий заряд ДНК (и S10).Подобно H + , Na + встречается повсеместно, и он предпочтительно связывается с фосфатным остовом и несет заряд +1. 63,64 Полученные распределения последовательно давали молекулярные формулы с добавленным Na + , но с 5 вместо 6 H + меньше. Таким образом, чистое смещение заряда снова было +6, и эта разница зарядов дополнительно поддерживает степень окисления +6 для кластера. В-третьих, более длинная цепь из 28 нуклеотидов также образовывала фиолетовый кластер Ag 10 (рис. S3A).Эта нить содержит на 40% больше фосфатов, но по-прежнему производит кластерные комплексы серебра с на 6 H + меньше, чем нелигированный аналог (Рисунок S3B, C). В совокупности анализ этих различных зарядовых состояний и различных комплексов поддерживает газообразный кластер Ag 10 с 6 окисленными Ag + и 4 восстановленными Ag.
Мы также измерили степень окисления кластеров, используя спектры рентгеновской структуры вблизи края поглощения Ag L 3 (XANES). 36 Эти исследования дополнили исследования масс-спектрометрии, поскольку они охарактеризовали комплекс кластер / ДНК в его естественной водной среде ().Белая линия отражает дипольное продвижение 2p 3/2 остовных электронов в частично занятые 5 s / 4d валентные состояния. Интенсивность этого перехода обратно пропорциональна степени заселенности валентных состояний и была проанализирована в сравнении с эталонами объемного металлического серебра (Ag 0 ) и ионной соли ацетата серебра (Ag + ). 36 Площадь под переходом белой линии была интегрирована из ± 3 эВ края поглощения и сравнена с двумя эталонными материалами.Линейная интерполяция интегрированной площади из спектра кластера дала ~ 35% Ag 0 и ~ 65% Ag + . Эта пропорция поддерживает общий заряд 6+ для кластера Ag 10 , поэтому анализ заряда по данным XANES и масс-спектрометрическим измерениям положительно согласуется. Этот частично окисленный кластер означает два типа серебра внутри комплекса, и мы впоследствии рассмотрели их организацию.
Ag L3-край XANES конъюгатов Ag10-ДНК в водном растворе (сплошная фиолетовая линия).В интегральном анализе белой линии (между -3 и 3 эВ, показаны черными линиями) использовались два эталона: ионный ацетат серебра (длинная пунктирная красная линия) и металлическое серебро (короткая пунктирная черная линия).
Лигандная среда
Нить ДНК является каркасом для фиолетового кластера, и мы рассмотрели ее способность к серебру с двух точек зрения. Сначала в масс-спектрах было подсчитано количество ДНК-связанного Ag + (фигура S11). Мы исследовали комплексы Ag + –ДНК, поскольку кластер в значительной степени окислен.Кроме того, Ag + связывает экспонированные азотистые основания подобно кластерам серебра. 54,55 Константа сродства составляет ~ 10 6 M -1 , поэтому олигонуклеотид образует стабильные комплексы с Ag + , потому что в наших экспериментах использовалось ~ 10 2 μ M Ag + и ~ 10 1 мк М концентрации ДНК. 24,25 Наши исследования выявили специфические комплексы, которые развивались в противоположных направлениях. Сначала Ag + и ДНК были объединены с начальной концентрацией 12 Ag + : ДНК, а затем разбавлены 100 и 10 000 объемами воды (рис. S11A).Слабо связанные комплексы диссоциируют при разведении, и выживают только виды с относительно меньшей стехиометрией 4-7 Ag + : ДНК. Доминирующие виды имели 5–6 Ag + : ДНК, но их численность не соответствовала распределению Пуассона. Это несоответствие между наблюдаемым и случайным распределениями Ag + дополнительно подтвердило химическую стабильность этих комплексов. Кроме того, отметим, что распределение изотопологов для этих комплексов показало, что связанный с ДНК Ag + вытеснил эквивалентное количество H + из фосфатного остова (рис. S11C).Этот баланс заряда поддерживает ранее проведенный масс-спектральный анализ степени окисления кластера (). Во-вторых, Ag + и ДНК были объединены с более низкой концентрацией 3 Ag + : ДНК, а затем разбавлены (рис. S11B). Комплексы с относительно более высокими концентрациями 4–6 Ag + : ДНК возникли с такой стехиометрией. Таким образом, противоположные исходные концентрации сходились в комплексы с 4-7 Ag + : ДНК. Это количество Ag + сопоставимо с количеством Ag + в фиолетовом кластере.
Во-вторых, мы также использовали хироптический ответ фиолетового кластера и охарактеризовали сайт связывания кластера (). 16,54,55,65 Коэффициент анизотропии или диссимметрии Куна κ устраняет концентрационную зависимость в спектрах кругового дихроизма, поскольку он нормализует дифференциальное поглощение (Δ A ) с использованием коэффициента поглощения ( A ): κ = Δ A / A = θ / (32980 × A) , где θ — эллиптичность (мград). 54,55,65–68 В наших исследованиях измеряли факторы анизотропии с разными цепями ДНК, и цепочка из 20 азотистых оснований послужила нашим эталоном (цепочка 1 и S4). Этот олигонуклеотид дает фиолетовый кластер с κ = 1,2 × 10 -3 , что сопоставимо со значениями для других кластеров серебра, инкапсулированных ДНК, и кластеров золота, координированных хиральными тиоловыми лигандами. 65,68 Кроме того, круговой дихроизм был устойчивым до 70 ° C, и эта термическая стабильность поддерживает сильную ассоциацию кластер-ДНК (Рисунок S12).Более длинные и более короткие олигонуклеотиды исследовали это взаимодействие (и S4). Нити 2 и 3 присоединяли четыре и восемь дополнительных нуклеотидов к 3′-концу родительской цепи 1, соответственно, и все три цепи давали кластеры с аналогичными спектрами и анизотропией. Таким образом, добавленные азотистые основания были безвредными и предположительно не взаимодействовали с фиолетовым кластером. Этот вывод подтверждается масс-спектрометрическими исследованиями с Strand 3 (Рисунок S4). Более короткие нити по-прежнему дают фиолетовые кластеры с сильным поглощением, но с пониженной хиральностью.Нить 4 удалила A 19 C 20 с 3′-конца и образовала кластерный аддукт со смещенным круговым дихроизмом и подавленным κ . Соответственно, цепочка 5 удаляла 2 нуклеотидных основания C1C 2 с противоположного 5′-конца, и эта конструкция приводила к более драматическим изменениям: поглощение сдвигалось в красную область и уменьшалось, круговой дихроизм значительно подавлялся, а анизотропия падала в два раза. Нить 6 удалила четыре азотистых основания C 17 C 18 A 19 C 20 и произвела фиолетовый кластер со смещенным, но все еще устойчивым поглощением, но со слабым круговым дихроизмом.Strand 7 исключил T 11 T 12 , и это внутреннее изменение также значительно изменило среду кластера. В совокупности эти исследования идентифицируют разрыв в сайте связывания кластера на ~ 20 азотных основаниях. Мы предполагаем, что более короткие цепи имеют недостаточное количество азотистых оснований для стабилизации кластерного аддукта.
Таблица 1
Анизотропия кругового дихроизма ( κ ) с разными цепями ДНК a , b
номер цепи | длина | последовательность | модификация | последовательность | 10 −3 ) |
---|---|---|---|---|---|
1 | 20 | 5 ′ C 1 C 2 C 3 C 4 A 5 A 6 C 7 T 8 C 9 C 10 T 11 T 12 C 13 C 14 C 15 G 16 C 17 C 18 A 19 C 3 ′ | родительская цепь | 1.2 | |
2 | 24 | C 1 C 2 C 3 C 4 A 5 A 6 C 7 T 8 C 9 C 9 C 9 C T 11 T 12 C 13 C 14 C 15 G 16 C 17 C 18 A 19 C 20 G 21 A 22 23 C 24 | добавить 3 ′ G 21 A 22 T 23 C 24 | 1.4 | |
3 | 28 | C 1 C 2 C 3 C 4 A 5 A 6 C 7 T 8 C 9 C 9 C 9 C 9 C T 11 T 12 C 13 C 14 C 15 G 16 C 17 C 18 A 19 C 20 G 21 A 22 23 C 24 G 25 A 26 T 27 C 28 | добавить 3 ′ G 21 A 22 T 23 C 24 G 25 A 26 T 27 C 28 | 1.4 | |
4 | 18 | C 1 C 2 C 3 C 4 A 5 A 6 C 7 T 8 C 9 C 9 C 9 C T 11 T 12 C 13 C 14 C 15 G 16 C 17 C 18 | исключить 3 ′ A 19 C 20 | ||
5 | 18 | C 3 C 4 A 5 A 6 C 7 T 8 C 9 C 10 T 11 T 12 13 C 14 C 15 G 16 C 17 C 18 A 19 C 20 | исключить 5 ′ C 1 C 2 | 0.6 | |
6 | 16 | C 1 C 2 C 3 C 4 A 5 A 6 C 7 T 8 C 9 C 9 C 9 C T 11 T 12 C 13 C 14 C 15 G 16 | исключить 3 ′ C 17 C 18 A 19 C 20 | ||
7 | 18 | C 1 C 2 C 3 C 4 A 5 A 6 C 7 T 8 C 9 C0 10 ––––––––– C 13 C 14 C 15 G 16 C 17 C 18 A 19 C 20 | исключить внутренний T 11 Т 12 | 0.4 |
Структура и организация комплекса
Спектры расширенной тонкой структуры рентгеновского поглощения Ag K-края (EXAFS) исследовали структуру комплекса с точки зрения фиолетового кластерного аддукта. Эти спектры идентифицировали три одиночных пути рассеяния в анализе подгонки множества оболочек (и S13). Теоретическое моделирование определило соответствующие расстояния связи, координационные числа и факторы Дебая – Валлера для каждого пути рассеяния (). Первый пик (Ag – Nucleobase в и) приписывается взаимодействию серебра с ДНК, и связанная с ним длина связи предполагает, что эти серебряные соединения координируются с гетероциклическими атомами азота в азотистых основаниях.Расстояние связи 2,24 ± 0,01 Å соответствует длине связи серебро – азот в комплексах Ag + – нуклеооснование, Ag + –амин и Ag – пиридин. 69–73 Кроме того, Ag + предпочтительно образует комплексы с атомами азота, а не с атомами кислорода внутри азотистых оснований. 71,74,75 Второй пик (Ag – Ag 1 дюймов и) приписывается металлической связи между серебром, потому что расстояние связи 2,743 ± 0,008 Å сравнимо с расстоянием связи 2,889 Å в кубических плотноупакованных кристаллах. металлического серебра и 2.Связующее расстояние 82 Å в металлическом ядре нанокластеров Ag 44 . 76–78 Это соответствие предполагает, что эти серебряные агломераты агломерируются и образуют углубленное ядро внутри инкапсулирующей оболочки ДНК. Третий пик (Ag – Ag 2 дюймов и) приписывается дальнодействующим взаимодействиям серебро – серебро, поскольку среднее расстояние связи 3,37 Å сравнимо с объединенными радиусами Ван-дер-Ваальса 3,44 Å для двух атомов серебра. 79 Этот пик предполагает, что два типа серебра пространственно разделены.Мы предполагаем, что эти две серебряные среды также различаются по степени окисления, поскольку восстановленное серебро разделяется на ядро, в то время как окисленное серебро координируется с инкапсулирующей оболочкой ДНК.
(A) Ag K-edge EXAFS конъюгатов Ag – ДНК с тремя отдельными путями рассеяния, показанными отдельно, и (B) предполагаемые структуры ядра Ag и соответствующие теоретические значения CN (серые атомы и блеклые синие атомы представляют Ag 0 и Ag + соответственно).
Таблица 2
Результаты подбора Ag K-edge EXAFS для конъюгата «Фиолетовый кластер – ДНК» a
рассеивающая оболочка | CN | R (Å) | σ σ (Å) ) | Δ E 0 (эВ) |
---|---|---|---|---|
Ag – азотистое основание | 1,02 (16) | 2,24 (1) | 0,004 (2) | −6 (1) |
Ag – Ag 1 | 2.2 (3) | 2,743 (8) | 0,011 (1) | −6 (1) |
Ag – Ag 2 | 3,6 (1,7) | 3,37 (2) | 0,026 (7 ) | −6 (1) |
Координационные числа пронумеровали каждый путь рассеяния и тем самым помогли различить возможные структуры (). Первый пик приписывается связи серебро – азотистое основание, а среднее координационное число серебра 1,02 ± 0,16: азотистое основание оценивается с использованием двух моделей. Во-первых, каждый из 10 серебряных координирует одно азотистое основание:
10Ag × 1Ag-NucleobasebondAg / 10Agtotal = 1.0
В качестве альтернативы подмножество из 5–6 окисленных Ag + может предпочтительно образовывать комплекс с олигонуклеотидом, как предполагают масс-спектрометрические исследования комплексов Ag + –ДНК (рис. S11). Поскольку исследования дифракции рентгеновских лучей показывают, что Ag + координирует два азотистых основания, среднее координационное число будет 1,0–1,2. 69,80 Обе модели дают разумное согласие с наблюдаемым координационным числом, и у них есть общая особенность: количество скоординированных нуклеотидных оснований ниже, чем общее количество ~ 20 нуклеотидных оснований в минимальной цепи ДНК ().Это различие предполагает, что полимерная цепь периодически контактирует с кластером с промежуточными несвязанными азотистыми основаниями.
Второй пик обусловлен связями серебро-серебро и имеет координационное число 2,2 ± 0,3. Теперь мы рассмотрим три сценария, которые в конечном итоге поддерживают компактное ядро с взаимосвязанными серебряно-серебряными связями. Сначала мы оцениваем полностью восстановленный сердечник с 4 Ag 0 . В тетраэдрическом расположении каждое серебро расположено с тремя соседями, поэтому среднее координационное число составляет
4Ag × 3Ag-AgbondsAg / 10Agtotal = 1.2
Это предсказанное значение ниже, чем наше экспериментальное значение 2,2, поэтому мы переходим к 5 Ag с тригонально-бипирамидальной геометрией. Осевое и экваториальное серебро связывается с 3 и 4 серебрами соответственно, поэтому прогнозируемое координационное число составляет
[3Ag × 4Ag-AgbondsAg] + [2Ag × 3Ag-AgbondsAg] 10Agtotal = 1,8
Это координационное число также ниже, чем у измеренное значение, поэтому теперь рассмотрим сердечник Ag 6 . Октаэдрическая геометрия размещает эти серебряные частицы с четырьмя ближайшими соседями, поэтому среднее координационное число составляет
6Ag × 4Ag-AgbondsAg / 10Agtotal = 2.4
Последний случай дает наилучшее согласие с наблюдаемым координационным числом, но полностью восстановленное Ag 6 находится за пределами распределения 4 Ag 0 и 6 Ag + , определенных масс-спектром и спектром XANES. В дальнейшем мы рассмотрим модели с частично окисленным ядром, которые устраняют это несоответствие.
Третий пик в спектре EXAFS приписывается дальнодействующим взаимодействиям между серебром. Его большое координационное число и фактор Дебая – Валлера поддерживают множественные и динамические взаимодействия между удаленными серебристыми серебрами внутри серебристых гранул на основе ядра и раковины.
ОБСУЖДЕНИЕ
Наши исследования охарактеризовали комплекс между специфическим серебряным кластером с фиолетовым поглощением и его ДНК-хозяином из 20 азотистых оснований. Мы сосредоточились на этом конкретном кластере, потому что он имеет низкую эмиссию, но может быть преобразован в различные флуоресцентные кластеры серебра с ~ 100-кратной эмиссией. Таким образом, конъюгаты фиолетовый кластер / одноцепочечная ДНК закрепляют новый тип оптического датчика ДНК. 20,32,35,81 Мы охарактеризовали молекулярную стехиометрию, степень окисления, лигандное окружение и структуру этого кластера, и эта информация поможет определить его основную электронную структуру.Масс-спектры показывают, что один агломерированный кластер Ag 10 развивается с разными цепями ДНК (). Спектры XANES по массе и Ag L 3 по краю определяют сравнимые степени окисления +6 и +6,5 для газофазных и водных комплексов соответственно (и). Спектры кругового дихроизма показывают, что минимальный сайт связывания кластера составляет ~ 20 азотистых оснований (и). Спектры EXAFS демонстрируют три пути однократного рассеяния, а соответствующие длины связей, координационные числа и факторы Дебая – Валлера поддерживают связи Ag – азотистое основание, металлоподобные Ag – Ag и дальнодействующие связи Ag – Ag (и).Эти три взаимодействия разделяют кластер, и теперь мы предлагаем возможные структуры кластера Ag 10 6+ с его ДНК-хозяином из 20 нуклеиновых оснований.
Металлоподобное ядро
Спектр EXAFS поддерживает металлическое ядро, потому что длина связи Ag – Ag 2,743 Å аналогична расстоянию связи 2,889 Å в металлическом серебре (Ag – Ag 1 дюймов). 76 Однако более короткая длина связи для кластера также может означать частично окисленное ядро. 76,82 Комплексы субвалентного серебра когда-то считались редкостью, потому что отдельные серебряные частицы имеют степень окисления, которая противоречит основным теориям связывания. 83,84 Однако был синтезирован широкий спектр этих соединений с различными лигандами, такими как галогениды, оксиды, тиолы, пептиды и олигонуклеотиды. 56,85–90 Первый описанный пример, Ag 2 F и родственные соединения имитируют объемное серебро, потому что они обладают высокой электропроводностью при таких низких температурах, как 20 К. 91–93 Такие металлические характеристики могут развиваться из-за низких -состояния 5 s / 5p лежат вблизи уровня Ферми и могут вмещать избыточные электроны. 92,94 Эти комплексы имеют относительно короткие расстояния связи серебро-серебро 2,75–2,85 Å, как и фиолетовый кластер. 82 Частично окисленное ядро в фиолетовом кластере также подтверждается средним координационным числом Ag – Ag и общим зарядом кластера (). Наблюдаемое координационное число 2,2 лучше всего моделируется как кластер Ag 6 с октаэдрической геометрией. Однако это ядро не полностью восстановлено, но должно нести заряд +2 вместе с 4 периферийными устройствами Ag + .Таким образом, конфигурация (Ag 6 2+ ) — (Ag + ) 4 поддерживает общую степень окисления +6 кластера. Однако четыре валентных электрона в Ag 6 2+ не соответствуют стабильной электронной организации, основанной на моделях желе, и аналогичная ситуация имеет место с Au 7 3 + .95–98 Этот молекулярный кластер разделяет в связанные тетраэдры с общей вершиной, и каждая субъединица имеет электронную конфигурацию с двумя валентными электронами 2+ .Аналогично, мы предполагаем, что кластер Ag 6 может быть разложен на две субъединицы Ag 3 + с двумя электронами в каждой. Мы предполагаем, что эта электронная организация стабилизирует металлический сердечник. 99 Другим примером субвалентного кластера является Ag 6 4+ с октаэдрической геометрией, и такие частицы отличаются от полностью восстановленных ядер с другими комплексами кластер серебра с лигандом. 77,78
Независимо от детальной структуры, ядро фиолетового кластера имеет серебряное координационное число, которое означает взаимосвязанные серебряные связи и компактную структуру.Такая форма отличается от удлиненных структур других кластеров серебра. 30,57 Эти структуры были получены из электронных спектров и моделей «частицы в коробке». Этот анализ организует валентные электроны на цилиндрических орбиталях вокруг катионного стержневого ядра. Энергии продольного возбуждения уменьшаются с увеличением длины молекулярного стержня и увеличения стехиометрии серебра. 100,101 Молекулярно-динамическое моделирование предполагает, что эти стержни атомного размера закреплены линейным массивом азотистых оснований в ДНК-хозяине.Относительно этой модели частично окисленный фиолетовый кластер Ag 10 отличается своей компактностью и относительно высокой энергией возбуждения. Мы предполагаем, что эти различия могут отражать гибкость кластеров серебра, и теперь расширяем наши исследования на флуоресцентные аналоги фиолетовых кластеров-предшественников. 37,102
Инкапсуляция ДНК-Ag
+ ShellОлигонуклеотид образует общий комплекс ДНК-кластер.Эксклюзионная хроматография показывает, что олигонуклеотид оборачивается вокруг кластера, поскольку комплекс имеет на 20% меньший гидродинамический радиус, чем нативный олигонуклеотид (рис. S2). 25 Это взаимодействие опосредуется азотистыми основаниями, а масс-спектры и EXAFS-спектры подтверждают связывание Ag + с гетероциклическими атомами азота (рисунки S11 и и). Мы предполагаем, что эта оболочка ДНК-Ag + действует как хиральный след и индуцирует хиральность в нижележащем металлоподобном ядре. 65,103–106 Это взаимодействие является поливалентным и дальнодействующим, потому что только цепи ДНК с ≥20 азотными основаниями поддерживают хиральность кластера. Среднее координационное число серебро – азотистое основание, равное 1.02 ± 0.16, серебро: азотистое основание предполагает, что эти взаимодействия также являются прерывистыми, поэтому точки контакта азотистое основание – Ag + соединяются промежуточными нуклеотидными основаниями, которые не координируют кластер. Таким образом, полимерный каркас ограничивает то, как ДНК-лиганд координирует свой кластерный аддукт. 107 Эта модель вызывает два вопроса: руководит ли неизменяемый и жесткий кластер координацией и оберткой ДНК или же цепь ДНК формирует структуру гибкого кластерного аддукта? В первом случае жесткая структура кластера определяет конкретные точки контакта для гибкой полимерной ДНК. 108,109 В последнем случае последовательность и структура ДНК управляют трехмерным массивом азотистых оснований, которые связывают и закрепляют гибкий кластер. 37,102 Сейчас мы изучаем альтернативные последовательности, которые оценивают относительную важность этих факторов, основанных на кластерах, по сравнению с факторами, основанными на ДНК.
Связь оболочка-ядро
Эти исследования характеризуют кластер серебра, который одновременно сильно окислен, но также похож на металл. Высокое координационное число Ag – Ag и короткая длина связи Ag – Ag предполагают, что восстановленное серебро разделяется на ядро, в то время как окисленное серебро разделяется на периферию. Третий пик в спектре EXAFS предполагает, что эти два типа серебра связаны. Соответствующая длина связи 3,37 ± 0,02 Å сравнима с суммой ван-дер-ваальских радиусов для серебра, равной 3.44 Å. 79 Два других наблюдения подтверждают многовалентную и динамическую связь между этими двумя компонентами. Во-первых, координационное число 3,6-1,7 велико и указывает на то, что на таком расстоянии взаимодействуют несколько атомов Ag. Во-вторых, фактор Дебая – Валлера в 2,4 раза больше по сравнению со связью Ag – Ag в сердечнике и, таким образом, поддерживает динамическую связь между двумя компонентами.
Теперь мы рассмотрим эти свободные взаимодействия серебро-серебро в контексте каркаса ДНК.Нить из 20 азотистых оснований имеет гидродинамический радиус ~ 1 нм, поэтому 10 серебряных монет имеют локальную концентрацию ~ 4 М. Такие высокие локальные концентрации могут способствовать аргентофильному связыванию Ag + –Ag + , как в неорганических комплексах. . 76,82 Однако сила связи этих взаимодействий составляет 5–15 ккал / моль, поэтому они могут быть нарушены ДНК-хозяином. В подтверждение этому, последовательные серебряные в дуплексной ДНК демонстрируют ограниченную тенденцию к самоассоциации. 110 Таким образом, мы предполагаем, что связи серебро-серебро в ядре и связи серебро-ДНК в оболочке доминируют в структуре, а взаимодействие между двумя компонентами является слабым.Температурно-зависимые исследования EXAFS могут дать более глубокое понимание этой связи и, таким образом, направить наши постоянные усилия по модуляции среды и спектров кластеров. 19,111
SWI87842 | Swingline® 87842 Optima 40 Компактный степлер, вместимость 40 листов, черный / серебристый / оранжевый
Компактный сшиватель обеспечивает высокую производительность сшивания при малом усилии при работе и мягкую рукоятку для легкого и удобного использования в ручном режиме.Его размер идеально вписывается в ладонь, он прочный и надежно фиксируется.
Цветовая семья | : | Чернить |
Цвета) | : | Черный / серебристый / оранжевый |
Размер короны | : | 0.5 » |
Плоская клинч-пластина | : | Нет |
Сноска 1 | : | Емкость всех листов указана из расчета 20 фунтов.связь |
Глобальный тип продукта | : | Степлеры-Компактный Настольный |
Сшивание большой емкости | : | Нет |
Размер ноги | : | 0.25 » |
Материал (ы) | : | Металл |
Процент вторичного содержания постпотребительского производства | : | 0% |
Источник (и) питания | : | Руководство по эксплуатации |
Процент вторичного содержания до потребителя | : | 0% |
Сменные скобы | : | Swingline® 35440 |
Емкость листа | : | 40 |
Емкость сшивания | : | Половина ленты (105 скоб) |
Загрузка скрепок | : | верхний |
Прихватывание | : | да |
Глубина горла | : | 1.75 » |
Общий процент переработанного содержимого | : | 0% |
Тип используемой скобы | : | Optima ™ |
- Компактная версия Optima 40 удовлетворяет потребности в скреплении большого объема и гарантирует отсутствие замятий.
- Низкое усилие, мощная сшивающая способность на 40 листов делает этот степлер идеальным выбором для любого офисного рабочего стола.
- Прочная конструкция обеспечивает длительное использование.
- При сшивании с плоскими скобами концы скрепок остаются плоскими (на обратной стороне нижнего листа), что позволяет аккуратно складывать бумаги, не опасаясь их опрокидывания.
- Стандартный магазин с верхней загрузкой вмещает половину полосы скоб и легко пополняется.
- Степлер лучше всего работает со скобами Optima ™ Premium или S.F.® 3 скобы премиум-класса.
- 100% гарантия производительности.