Kent neo nanotek: Kent Nanotek Infina (Код: 0287) — Табак для кальяна во Владивостоке

Содержание

Kent Nanotek Infina (Код: 0287)

Никотин: 0.2 мг/сиг; Смол: 1 мг/сиг; СО: 1 мг/сиг;

Производитель: Англия, British American Tobacco

Сигареты Kent Nanotek Infina – это результат высокопрофессиональной работы компании Бритиш Американ Тобако. Эта продукция изготавливается с применением высоких технологий, потому и достигла наивысших стандартов качества. Кент Нанотек Инфина изготовлены с применением новой системы передачи вкуса, что обеспечивает мягкое курение.

Ультрасовременный продукт

Сигареты Кент Нанотек Инфина – ассоциируются с легким и приятным вкусом, идеально подходящим поклонникам более мягких вкусов. Благодаря одному миллиграмму смолы и 0.2 миллиграмма никотина – этот вид сигарет без сомнения понравится женской половине, так как в них нет химического привкуса горечи. Kent Nanotek Infina – обладают гладким, приятно пахнущим дымом, что прекрасно подходит для вечерних развлекательных мероприятий, где мягкие ароматы будут уместны.

Кент Нанотек – обладают футуристическим дизайном в темных и светлых серебряных оттенках с ультрасовременным узором, что заметно выделяет их среди других изделий. Вы сможете гордо носить сигареты этой марки, благодаря такому оформлению. Помимо этого для Kent Nanotek разработали уникальный угольный фильтр, благодаря чему их вкус получается еще мягче и приятней.

Мы, Dutyfreeshop предлагаем

Качественный оригинальный продукт от лучших производителей мира, по выгодной цене. Наша команда тщательно защищает интересы клиентов, потому вся продукция досконально проверяется. Совершая у нас покупку, вы гарантированно получаете продукцию из той страны, которая заявлена на страницах нашего сайта и заметьте, вам не придется никуда за этим ехать!

Цена указана за блок.

Минимальный заказ: 1 блок.

Количество пачек в блоке: 10

Ценах.рф — аналитика изменения цен на товар Сигареты Кент Нанотек NEO (МРЦ 58,00)

Группа: Табачные изделия
Подгруппа: Сигареты
Страна производитель Россия
Продается в шт
Весом нето 0.040
Упаковывается по 10 шт
Штрих код

Детальная таблица изменения цен на товар Сигареты Кент Нанотек NEO (МРЦ 58,00)

Дата покупки	Цена за шт весом 0.040 кг	Цена за 1 кг
2011-02-17	58.00	1450.00
2011-02-21	58.00	1450.00
2011-02-24	58.00	1450.00
2011-02-25	58.00	1450.00
2011-02-26	58.00	1450.00
2011-02-27	58.00	1450.00
2011-02-28	58.00	1450.00
2011-03-03	58.00	1450.00
2011-03-05	58.00	1450.00
2011-03-07	58.00	1450.00
2011-03-08	58.00	1450.00
2011-03-09	58.00	1450.00
2011-03-12	58.00	1450.00
2011-03-13	58.00	1450.00
2011-03-14	58.00	1450.00
2011-03-15	58.00	1450.00
2011-03-21	58.00	1450.00
2011-03-22	58.00	1450.00
2011-03-24	58.00	1450.00
2011-03-26	58.00	1450.00
2011-03-27	58.00	1450.00
2011-03-30	58.00	1450.00
2011-04-03	58.00	1450.00
2011-04-05	58.00	1450.00
2011-04-08	58.00	1450.00
2011-04-14	58.00	1450.00
2011-04-15	58.00	1450.00
2011-04-16	58.00	1450.00
2011-04-17	58.00	1450.00
2011-04-19	58.00	1450.00
2011-04-21	58.00	1450.00
2011-04-22	58.00	1450.00
2011-04-23	58.00	1450.00
2011-04-24	58.00	1450.00
2011-04-25	58.00	1450.00
2011-04-26	58.00	1450.00
2011-04-27	58.00	1450.00
2011-04-28	58.00	1450.00
2011-04-30	58.00	1450.00
2011-05-03	58.00	1450.00
2011-05-05	58.00	1450.00

По товару Сигареты Кент Нанотек NEO (МРЦ 58,00) зафиксированы минимальные и максимальные цены за единицу

Год	Минимаьная цена	Максимальная цена
2011	58.00	58.00

Аналогичные по цене и категории товары

Сигареты Кент Нанотек NEO (МРЦ 58,00) призводства БАТ страна Россия
Сигареты Кент Нанотек Futura (МРЦ 55,00) призводства БАТ страна Россия
Сигареты 21век 12 полный вкус (МРЦ 27,00) призводства Донской табак ООО страна Россия
Сигареты Вайсрой RED (МРЦ 21,00) призводства БАТ страна Россия
Сигареты Бонд классик (МРЦ 23,00) призводства Филипп Морис страна Россия
Сигареты Вайсрой RED (МРЦ 18,00) призводства БАТ страна Россия
Сигареты More тв.легкие Blue (МРЦ 22,00) призводства R.J.R. Petro страна Россия
Сигареты Ява классическая тв/уп (МРЦ 18,00) призводства БАТ страна Россия
Сигареты Мальборо (МРЦ 42,00) призводства Филипп Морис страна Россия
Сигареты Vogue Bleue (МРЦ 50,00) призводства БАТ страна Россия

«БАТ Россия» выпустила сигареты Kent Nanotek Futura

Поиск на Upakovano.ru

Поиск на сайте upakovano.ru является универсальным и осуществляется по всем разделам сайта, качество выдачи результатов поиска прямо зависит от введенных ключевых слов.

Использование только одного слова или общих слов может привести к излишнему количеству документов, в таких случаях нужно использовать уточняющие ключевые слова.

Для повышения релевантности результатов поиска можно также использовать исключающие слова.

При формировании поискового запроса возможно использование языка запросов.

Обычно запрос представляет из себя просто одно или несколько слов, например: “свежая рыба треска” — по такому запросу находится информация, в которой встречаются все слова запроса.

Логические операторы позволяют строить более сложные запросы, например: “свежая рыба или пылесос” — по такому запросу находится информация, в которой встречаются либо слова “свежая” и “рыба”, либо слово “пылесос”.

“Свежая рыба не скумбрия” — по такому запросу находится информация, в которой встречаются слова “свежая” и “рыба” и не встречается слово “скумбрия”.

Вы можете использовать скобки для построения более сложных запросов.

Логические операторы.

Оператор “и”

Синонимы оператора “и”:

And
&
+

Подразумевается, что оператор “и” можно опускать: например, запрос “свежая рыба” полностью эквивалентен запросу “свежая” и “рыба”.

Оператор “или”

Синонимы оператора “или”:

Or
|

Оператор логическое «или» позволяет искать элементы, содержащие хотя бы один из операндов.

Оператор “Не”

Синонимы оператора “Не”:

Not
~

Оператор логическое «не» ограничивает поиск товарами, не содержащими слово, указанное после оператора.

Оператор ( )

Круглые скобки задают порядок действия логических операторов. При формировании строки запроса убедитесь, что для каждой открывающейся скобки есть парная скобка закрывающаяся.

Оператор » »

Поиск точной фразы. Обычно используется для поиска цитат.

А сейчас Вы узнаете, какое именно вознаграждение Вы получите. Для этого нажмите, пожалуйста, на одну из этих кнопок.

Потребитель нажимает и видит свое вознаграждение

— Поздравляю! Ваше вознаграждение – стильная зажигалка.//

— Поздравляю! Ваше вознаграждение – современные LED-часы.

— Но перед тем как я Вам его выдам, заполните, пожалуйста, эту небольшую анкету.

— Это нужно, чтобы мы лучше знали наших потребителей, а также необходимо Ваше письменное подтверждение, что Вам уже исполнилось 18 лет и Вы курите.

Потребитель заполняет анкету.

— Спасибо.

— Благодарим за внимание. Оставайтесь с KENT!

6. ПРАВИЛА ПОВЕДІНКИ ПРОМОУТЕРА

· Руки – доглянуті, акуратний манікюр. Заборонено – яскравий колір манікюру.

· Запах – свіжий або нейтральний, свіжий подих

· Уніформа має постійно бути в чистому попрасованому вигляді

Промотор не має права одягати / використовувати інші предмети одягу чи аксесуари (сонце захисні окуляри, браслети, годинник, яскраві прикраси і т.д.). Мобільний телефон та гарнітура мають бути сховані та непомітні для оточуючих.

· Не запрошувати до розмови споживачів, поряд з якими, в даний момент знаходяться діти, та вагітних

· Обережно використовувати форму та матеріали

· Працювати у відповідності з маршрутом та графіком

· Промотор має працювати виключно згідно до вимог інструкції

· Необхідно уникати будь яких конфліктних ситуацій

· На робочому місці промотор має бути постійно в гарному настрої, привітний до споживачів, зосереджений на роботі, слідкуючи за:

· Заздалегідь попередити супервайзора про закінчення подарунків чи інших матеріалів

· Після закінчення роботи кожний день заповнювати звітну форму і передавати її супервайзору.

Промоутер несе персональну відповідальність за збереження уніформи та матеріалів. В разі пошкодження (загублення) уніформи чи промоматеріалів, промотор компенсує 100% вартості пошкодженої речі.

В разі виникнення будь-яких питань, промотор має звертатись до свого супервайзора.

Кожен промотор має чітко знати, що в процесі проведення активності здійснюється контроль за роботою персоналу.

Робота промоторів контролюється, крім іншого, методом „таємного покупця”, коли контролююча сторона виступаючи в якості споживача, фіксує контрольні точки в діалозі „промотор — споживач”, також можливе спостереження за роботою промоутора та діалогом з продавцем в торговій точці.

Всі перевірки проходять ВИКЛЮЧНО в рамках інструкції для промоутора, коли знання та виконання всіх вимог документу гарантує позитивну оцінку роботи.

Разом зі знанням та виконанням вимог інструкції в якості критеріїв для оцінки роботи можуть бути наступні фактори:

Вопрос	Ответ
Информация об активности
Что это за зажигалка?	Это – уникальная зажигалка в стиле KENT Nanotek 2.0.
Что это за часы?	Это – современные LED-часы.
Сколько длится эта активность?	Активность длится с 28.05 по 2.07.2012 года в торговых точках городов Украины: Киева, Донецка, Днепропетровска, Кривого Рога, Крыма, Одессы, Харькова, Львова и Запорожья.
Информация о КЕНТ Нанотек
Вопрос о марке сигарет КЕНТ Нанотек	КЕНТ Нанотек воплощает прогрессивные тренды дизайна и высоких технологий в сигаретах формата Compact King Size. Это – первые в Украине сигареты, сохранившие в компактном формате всю полноту вкуса КЕНТ.
Почему изменился дизайн КЕНТ Нанотек?	Это обновленный имидж Nanotek. Отныне неизменный вкус KENT Nanotek воспроизведен в новом прогрессивном дизайне. Пачка Инфина стала черной. Новые контрастные линии на боковых трапециях делают пачку еще более выразительной и отличают пачки Инфина и Нео. Хромированные элементы добавляют яркости, а рельефная текстура позволяет почувствовать технологии на ощупь. Nanotek 2.0 – это новое поколение дизайна и неизменный вкус KENT.
Что означает 2.0?	2.0 – это новое поколение дизайна.
Изменился ли вкус КЕНТ Нанотек?	Нет. Дизайн пачек КЕНТ Нанотек обновлен, а вкус сигарет остался неизменным.
Какие варианты вкуса сигарет КЕНТ Нанотек существуют? Чем они отличаются?	КЕНТ Нанотек представлен в 3 вариантах, которые отличаются содержанием смол и никотина: Кент Нанотек Нео – смол 4 мг, никотина 0,4 мг. Кент Нанотек Инфина – смол 1 мг, никотина 0,2 мг. Кент Нанотек 2.0 Блю – смол 6 мг, никотина 0,6 мг.
Где производятся сигареты КЕНТ Нанотек?	Сигареты КЕНТ Нанотек производятся компанией „Бритиш Американ Тобакко” на современной табачной фабрике в Прилуках.
Сколько стоит КЕНТ Нанотек?	Максимальная розничная цена КЕНТ Нанотек – 13,5 гривен. Она напечатана на пачке.
Какой фильтр в КЕНТ Нанотек?	КЕНТ Нанотек имеет активированный угольный фильтр. И только в KENT Nanotek 2.0 6 мг к тому же содержится сверхтонкая нить внутри фильтра, которая обеспечивает равномерно насыщенный вкус Nanotek 2.0 на протяжении всего процесса курения. Самый лучший отборный табак и активированный угольный фильтр обеспечивают насыщенный вкус КЕНТ Нанотек.
Что такое Nanotek?	Нано – (от греч. nаnos), приставка для образования единицы, равной одной миллиардной части выходной единицы. Например, 1 нанометр = 10-9 м.
Что такое Nanotek Neo, Infina?	Neo и Infina – это названия вариантов вкуса сигарет KENT Nanotek, они символизируют насыщенность и крепость вкуса.
Откуда произошли названия Neo и Infina?	NEO означает «новый» на латыни. Infina – от латинского Infinum самый маленький.
Что такое Compact King Size?	Compact King Size – это формат сигарет KENT Nanotek. Это особенный формат, который позволил сберечь всю насыщенность вкуса сигарет обычного формата King Size и при этом сделать сигареты более компактными. Длина сигареты формата Compact King Size – 83 мм, в отличие от обычных Super Slims Size, длина которых – 100 мм.
Что такое KENT Nanotek 2.0 6 мг (Blue)?	Nanotek 2.0 Blue – это новое поколение четкого вкуса в варианте 6 миллиграммов с применением уникальной технологии Precision Thread.
Что такое Precision Thread?	Precision Thread − это последнее слово в технологиях передачи вкуса. Это сверхтонкая нить внутри фильтра, которая обеспечивает равномерно насыщенный вкус Nanotek 2.0 на протяжении всего процесса курения. Новый KENT Nanotek 2.0 с технологией Precision Thread представлен только в варианте 6 миллиграммов.
Информация о КЕНТ Эйч Ди
Что означает приставка Эйч Ди\\ Ха Де в названии нового КЕНТ? Что такое Хай Дефинишн?	Эйч Ди – это сокращенное название новейшей технологии Хай Дефинишн. В переводе – «высокая четкость». Эта технология раньше использовалась только в аудио- и видеопродукции. Благодаря технологии Эйч Ди абсолютная точность и четкость изображения и звука больше не мечта. Это – реальность. Именно эта технология вдохновила нас на создание первых в мире сигарет Хай Дефинишн. Это и есть новые сигареты КЕНТ Эйч Ди. Теперь вкус КЕНТ – более четкий и выразительный.
Как именно вкус КЕНТ стал более четким и выразительным? \\ Вопрос о фильтре	Вкус КЕНТ стал более четким и выразительным благодаря эволюции фильтра 3-ТЕК. Фильтр 3-ТЕК – это система тройной угольной фильтрации, в инновационном фильтре три секции – дополнительная секция между табаком и угольной частью позволяет гранулам активного угля работать более эффективно. Создавая вкус Эйч Ди, мы добавили две угольные пластины (мембраны) вдоль тройного фильтра. Благодаря этому изобретению вкус КЕНТ стал абсолютно четким.
Что изменилось в КЕНТ Эйч Ди в сравнении с предыдущим КЕНТ?	В отличие от КЕНТ 3-ТЕК, КЕНТ Эйч Ди имеет новейшую систему передачи вкуса Хай Дефинишн Тейст Систем. К тройному угольному фильтру были добавлены 2 угольные мембраны. Благодаря этому, вкус КЕНТ стал абсолютно четким. Это – вкус в измерении Хай Дефинишн. Также изменился дизайн пачки КЕНТ Эйч Ди. Она стала более современной, лаконичной и выразительной.
Что это за новый вариант вкуса КЕНТ Эйч Ди?	KENT Эйч Ди расширяет ассортимент и представляет еще один вариант знакомого четкого вкуса – KENT Эйч Ди 6 миллиграммов. KEНT Эйч Ди Спектра содержит 6 мг смол та 0,5 мг никотина.
Какие варианты вкуса сигарет КЕНТ Эйч Ди существуют?	Сигареты КЕНТ Эйч Ди представлены в 4 вариантах. Содержание смол и никотина в дыме одной сигареты КЕНТ Эйч Ди: КЕНТ Эйч Ди Футура: 8 мг смол; 0,7 мг никотина. КЕНТ Эйч Ди Спектра: 6 мг смол; 0,5 мг никотина. КЕНТ Эйч Ди Нео: 4 мг смол; 0,3 мг никотина. КЕНТ Эйч Ди Инфина: 1 мг смол; 0,1 мг никотина.
А куда исчез обычный КЕНТ?	Состоялась эволюция вкуса. На смену КЕНТ 3-ТЕК пришел КЕНТ Эйч Ди. Благодаря системе передачи вкуса Хай Дефинишн Тейст Систем, вкус КЕНТ стал более четким и выразительным. Это – вкус КЕНТ в измерении Хай Дефинишн.
Почему изменился дизайн КЕНТ?	В связи с эволюцией вкуса КЕНТ от КЕНТ 3-ТЕК к КЕНТ Эйч Ди изменился и дизайн пачки. Вкус КЕНТ стал более четким и выразительным. А дизайн пачки – еще более современным и лаконичным. Однако основные элементы пачки остались без изменений – узнаваемое написание Кент и круг соник.
Где производятся новые сигареты КEНT Эйч Ди?	Сигареты KEНT Эйч Ди производятся компанией „Бритиш Американ Тобакко Украина” на табачной фабрике в Прилуках.
Где я могу больше узнать о КЕНТ Эйч Ди?	На сайте www.kent.com.ua и по телефону информационной линии: 0 800 50 84 15. Звонки со стационарных телефонов в пределах Украины бесплатные.
Сколько стоит новый КЕНТ Эйч Ди?	Максимальная розничная цена КЕНТ Эйч Ди – 12,5 гривен. Эта цена напечатана на пачке.
Информация о КЕНТ АйСвич
Что такое Кент АйСвич?	KENT iSWITCH – это новое имя и обновленный дизайн KENT Convertibles – первых в Украине сигарет с капсулой свежего вкуса в фильтре. Революционно новая пачка отражает стремление KENT быть всегда на шаг впереди. Инновационная и прогрессивная, она является воплощением самых современных дизайнерских решений, технологий и материалов. KENT iSWITCH предлагает неизменную возможность управления вкусом. Вы можете выбирать между привычным четким вкусом KENT и абсолютно другим свежим – всего одним кликом, активируя капсулу в фильтре сигареты. С KENT iSWITCH Вы получаете опыт персонализированного вкуса в обновленном дизайне.
Произошли ли изменения в продукте?	Нет, это тот же уникальный и инновационный продукт, что и раньше. У Вас есть свобода выбора между привычным четким вкусом KENT и абсолютно другим свежим – одним кликом. Отныне эта же технология – в революционно новой пачке.
Как менять вкус Кент АйСвич?	Трансформировать вкус можно благодаря специальной капсуле свежести, которая есть в фильтре каждой сигареты Кент АйСвич. Чтобы активировать эту капсулу, нужно нажать на фильтр в месте, обозначенном Клик-символом. Одно нажатие – и Вы меняете привычный вкус КЕНТ на абсолютно новый свежий вкус. Вы можете трансформировать вкус сигареты в любой момент курения либо не делать этого вообще. Выбор всегда за Вами.
Какой фильтр у АйСвич?	Сигареты Кент АйСвич имеют угольно-ацетатный фильтр и внутри ацетатной части находится капсула свежего вкуса.
Кент АйСвич – новые ментоловые сигареты?	Это – новая категория сигарет. Впервые они позволяют менять знакомый вкус КЕНТ на свежий в любой момент курения. То есть они дарят свободу выбора.
Что означает слово АйСвич?	Это слово состоит из двух частей: буквы «і» и слова «switch». Буква «і» подчеркивает два важных качества продукта. Во-первых, она указывает на интерактивность предложения благодаря капсуле свежего вкуса внутри сигареты, что позволяет управлять вкусом. Во-вторых, она подчеркивает возможность персонализировать сигарету (от английских «I» – я, «switch» – меняю). Таким образом, Вы можете управлять вкусом сигареты, активируя капсулу в любое время и в любом месте.
Что представляет собой капсула, которая содержится в фильтре Кент АйСвич?	Это желатиновая капсула с ментолом.
Кент имеют ментоловый вкус?	До того, как Вы активируете капсулу в фильтре – сигарета имеет привычный четкий вкус, похожий на вкус КЕНТ Эйч Ди Нео (смол – 4 мг, никотина – 0.3 мг). После активации капсулы Вы почувствуете освежающий вкус. Однако это не ментоловое предложение.
Сколько вариантов вкуса есть у Кент АйСвич?	У Кент АйСвич – один вариант вкуса. Содержание смол в одной сигарете – 4 мг, никотина – 0,3 мг.
Где производятся сигареты Кент АйСвич?	Кент АйСвич производятся на современной табачной фабрике «Бритиш Американ Тобакко» в Прилуках.
Где я могу больше узнать о КЕНТ АйСвич?	Дополнительную информацию Вы можете найти на сайте www.kent.com.ua и по телефону информационной линии 0 800 50 84 15. Звонки со стационарных телефонов в пределах Украины бесплатные.
Сколько стоят Кент АйСвич?	Сигареты Кент АйСвич стоят 13,5 грн.
Чем Кент АйСвич отличаются от других сигарет, например Мальборо Blue Ice с капсулой?	Кент АйСвич позволяет полностью изменить вкус сигареты в любой момент курения, именно тогда, когда этого хотите Вы. Что касается новых сигарет Мальборо, то согласно информации на пачке, Мальборо Блу Айс – это сигареты, которые предлагают свежий вкус и поднятие его уровня до максимума при раздавливании капсулы. Кент АйСвич дарит Вам полную свободу выбора – наслаждаться привычным вкусом, похожим на КЕНТ Эйч Ди Нео (смол – 4 мг, никотина – 0.3 мг), или, активировав капсулу, ощутить совершенно новый освежающий вкус КЕНТ. Впервые Вы можете выбирать, в какой момент изменить вкус сигареты одним кликом или не делать этого вообще.
А как же новый Мальборо?	Согласно информации на пачке Marlboro Blue Ice, Мальборо – это сигареты, которые предлагают свежий вкус и поднятие его уровня до максимума при раздавливании капсулы. КЕНТ АйСвич, как и КЕНТ Нанотек, открывает абсолютно новую премиальную категорию сигарет.
А Кент АйСвич – это вредно?	На самом деле, Кент АйСвич не являются более или менее вредными, чем другие сигареты. Эти сигареты получили сертификат Госстандарта и прошли надлежащую проверку соответствия законодательным нормам в Минздраве.
Какие активности от КЕНТ АйСвич сейчас проходят?	Следите за активностями и обновлениями на сайте kent.com.ua.
Общая информация
Почему изменились названия на пачках?	Названия изменились соответственно требованиям законодательства, которое запрещает использование на упаковке табачных изделий таких терминов, как: «с низким содержанием смол», «легкие», «суперлегкие», «ультралегкие» и их аналогов на других языках.
Почему появились новые предупреждения о вреде курения?	Компания «Бритиш Американ Тобакко Украина» придерживается требований действующего законодательства Украины. Согласно Закону Украины «О мерах предупреждения и уменьшения употребления табачных изделий и их вредного влияния на здоровье населения» от 22 сентября 2005 года, с 1 января 2007 года стали действительными новые требования касательно маркировки табачных изделий. В частности, ими предусмотрено, что на каждой упаковке табачных изделий должно быть два медицинских предупреждения: основное и дополнительное. Они размещаются по одному на каждой большой внешней стороне упаковки (пачки или блока). Основное медицинское предупреждение формулируется так: «Курение вызывает сердечнососудистые заболевания и рак легких». Дополнительное предупреждение существует в шести текстовых вариантах, которые наносятся на упаковки по очереди. Каждое из медицинских предупреждений должно занимать не менее 30% площади большей стороны упаковки. Соблюдение этого закона является обязательным для всех производителей табачных изделий.
Скажите, почему повысились цены на сигареты?	Цена на сигареты была повышена вследствие различных факторов, основным является увеличение ставок акцизного сбора.
Чем занимается компания «В.А.Т.»?	«Бритиш Американ Тобакко» основана в 1902 г. и является одним из лидеров мирового табачного рынка. В Украине «Бритиш Американ Тобакко» представлена такими известными марками, как: — международными: «КЕNT» («КЕНТ»), Dunhill («Данхил»), «PALL MALL» («ПЕЛЛ МЕЛЛ»), VOGUE» («ВОГ»), «LUCKY STRIKE» («ЛАКИ СТРАЙК»), «VICEROY» («Вайсрой»), Capri («Капри»). — национальными: «ПРИЛУКИ ОСОБЛИВІ», «Отаман», «Козак». В 1993 году компания «Бритиш Американ Тобакко» основала первое совместное табачное предприятие в Украине – А/О табачная компания «В.А.Т. — Прилуки» («Би. Эй. Ти. — Прилуки»). С момента появления на украинском рынке компания «Бритиш Американ Тобакко» инвестировала значительную сумму в модернизацию фабрики. Ее современное оборудование отвечает высочайшим международным стандартам и гарантирует высокое качество сигарет.
А Вы сами курите? И как Вы можете пропагандировать вредную привычку курения?	Да, я курю. (Независимо от того, курит промоутер или нет.) Но сейчас я – на своем рабочем месте, и моя работа – не пропагандировать курение, а предоставлять информацию о торговой марке Кент совершеннолетним, которые курят.

Kent Nanotek 1 White — Бесплатная доставка. Дешевый магазин в Великобритании.

В 1952 году табачная компания Lorilard выпустила первые сигареты под торговой маркой KENT. Имея длину 70 мм и категорию легкой (средней), они были впервые в истории оснащены асбестовым фильтром, который позже был заменен угольным фильтром (доказано, что асбест вызывает рак). Сигареты выпускались в типичной для того времени мягкой упаковке и стоили очень дорого.

Великие бренды постоянно растут и развиваются.Они зависят от мнения потребителя и подстраиваются под вкусы большинства. Требовательная аудитория — главный двигатель развития и совершенствования самых популярных брендов. Конкуренция на рынке необычайно высока, и чтобы выжить, компании тщательно следят за качеством и привлекательностью продукта.

Бренд получил свое название в честь основателя Lorilard — Герберта Кента. Сигареты мгновенно приобрели сумасшедшую популярность. Эти сигареты даже использовались в качестве валюты и обмена пачки на необходимые вещи и продукты.

После приобретения бренда British American Tobacco в 70-х годах KENT начал распространяться за пределы Америки. В 80-е годы, после длительного затишья и стабильности на табачном рынке, конкуренты демонстрируют миру новую категорию прочности — легкие сигареты, которые благодаря более мягкому вкусу сразу превосходят мягкий KENT. Это вызывает падение продаж и популярности бренда.

В 90-х годах ХХ века компания решила провести ребрендинг (изменить логотип, дизайн, слоган), чтобы сохранить лидирующие позиции на рынке.

У бренда есть числовая «шкала прочности» с указанием уровня смол: 1, 4 и 8 (легкие, средние и сильные). Производитель начинает развертывать масштабные рекламные кампании, призванные продемонстрировать достоинства трех новинок. Акцент делается сначала на эмоциональной стороне, а затем на обновлении образа.

В результате KENT выходит на мировой рынок, являясь лидером в категории премиум. Теперь British American Tobacco регулярно представляет любителям своего бренда новые решения, оригинальную яркую упаковку и другие виды крепости.

Отличие этой марки от прямых конкурентов заключается в использовании только высококачественного сырья и хорошей системы фильтрации в каждой сигарете, что снижает количество вредного воздействия на легкие курильщика. Находясь в среднем ценовом сегменте и обладая большим количеством вкусов (по сравнению с конкурентами), этот бренд сигарет занимает лидирующие позиции среди ценителей сигарет и потребителей табачных изделий. Здесь каждый найдет себе подходящую по прочности и размеру.

Kent Nanotek появился на рынке в 2007 году. Угольный фильтр, состоящий из 2-х секций, заменен на уникальный Taste +. Он имеет длину 83 мм и диаметр 5 мм. Категория разделена на несколько подкатегорий, различающихся дизайном упаковки и, конечно же, процентным содержанием смол и никотина. Обладает легким вкусом, выгодно подчеркивающим качество используемого табака. Kent Nanotek White — содержание: смолы — 1 мг и 0,1 мг никотина на палочку. Упаковка черная со светло-серыми боковыми полосами.Самый «легкий» вариант линейки: этот ароматизатор содержит минимальную долю вредных веществ.

Stark State сотрудничает с Tesla NanoCoatings — Новости — MyTownNEO

Stark State College стал партнером отмеченного наградами Tesla NanoCoatings

Tesla NanoCoatings арендовала 1000 квадратных футов площади в Центре передовых технологий Государственного колледжа Старка, чтобы предоставить больше возможностей для исследований и разработок своего антикоррозионного покрытия.

Наносится как краска, но защищает металл с помощью уникального процесса цинкования.Нанотехнология — это разработка функциональных систем на молекулярном уровне.

Поддержка Stark State сыграла роль в том, что компания получила стартап в размере 100 000 долларов от Фонда инноваций, сказал Тодд Хокинс, управляющий директор Tesla и бывший аэрокосмический инженер.

Stark State является спонсором регионального фонда, ориентированного на поддержку предпринимательства, основанного на высоких технологиях, и новых предприятий.

В сотрудничестве с Центром исследований и разработок инженеров армии США компания Tesla разработала углеродное нанопокрытие, которое называют революционным антикоррозионным покрытием.Это самое прочное, эластичное и эффективное органическое защитное покрытие, разработанное для металлов. Фуллерен, одна из форм углерода, прочнее алмазов. По словам Хокинса, одним из основных аспектов покрытия является то, что в случае повреждения оно переносит электроны на дефектный участок и не вызывает коррозии.

Наряду с переработкой продукта, уже одобренного для использования армией США и предназначенного для использования на аэрокосмическом, нефтехимическом, транспортном, морском и промышленном рынках, Хокинс рассматривает деятельность Stark State в качестве начальной производственной платформы.По его словам, он будет набирать студентов Старк Стейт и других инженерных университетов в качестве стажеров.

«Мы находимся в отличном месте, чтобы делать это», — сказал Хокинс в пресс-релизе. «Северо-восточный Огайо — это кластер покрытий, и мы очень рады, что штат Старк открыт для нанотехнологий, как и для технологий топливных элементов. Мы рассчитываем привлечь сюда другие нанотехнологические предприятия. Мы находимся в пути и надеемся на долгие и отличные отношения с Stark State и нашим сообществом ».

Компания надеется, что к середине июля ее деятельность в штате Старк будет запущена на полную мощность, сказал Хокинс, уроженец Массиллона, который работал инженером в аэрокосмической промышленности, консультантом и предпринимателем.Он основал Tesla NanoCoatings в 2007 году. Он подчеркивает важность сотрудничества для реализации новых идей.

Заявки на следующий цикл финансирования Инновационного фонда подаются в пятницу. Для получения дополнительной информации посетите www.innovationfundneohio.com.

Глобальная этика и нанотехнологии: сравнение наноэтических условий в ЕС и Китае

Правительство Таиланда рассматривает первый стратегический план страны по безопасности и этике нанотехнологий, разработанный в 2011 году.Национальный центр нанотехнологий Таиланда, NANOTEC, провел в Бангкоке в 2012 году2 открытые слушания, на которых заинтересованным сторонам из различных секторов была предоставлена возможность высказать свое мнение по проекту. (Маркировку нанобезопасности можно ожидать в 2016 году, когда будут полностью соблюдены правила по нанобезопасности и этике.) ^{Footnote 6} В Южной Корее НПО играют активную роль в объединении ученых и общественности. Подход «STS» или «наука-технология-общество» используется в корейской школьной программе, точно так же, как в Японии школьникам дают руководящие принципы по биоэтике [11].На Тайване Национальный стратегический план ответственной нанотехнологии отражает стремление правительства реализовать весь потенциал нанотехнологий, признавая при этом возможное вредное воздействие нанотехнологий на общество. (Сочетание нанотехнологий и китайской фитотерапии — это недавно появившаяся область, востребованная тайваньской промышленностью, и она приводит к некоторым этическим дискуссиям, особенно по вопросам интеллектуальной собственности [23]). В последнем Тайваньском плане развития науки и технологий [34] нанотехнологиям уделяется особое внимание.Выделяются два отрывка из плана, которые дают особое представление о взглядах правительства на технологическую политику:

Недоверие общества к науке и технологиям, по крайней мере, частично объясняется недостаточностью соответствующей информации и осведомленности. Соответствующие этические и правовые меры могут потребоваться для борьбы с рисками, создаваемыми новыми технологиями для жизни и окружающей среды, и этическими конфликтами, которые они вызывают … В отличие от таких областей, как медицинская биотехнология, где были созданы комитеты по этике, до сих пор мало что было сделано рассмотреть этику исследований во многих новых технологических областях Тайваня (таких как генетические технологии и нанотехнологии).^{Footnote 7}

Проблема «общественного недоверия» — это проблема, с которой China PR начинает сталкиваться с точки зрения ГМО-продуктов питания. Несмотря на то, что экспертная оценка технологий (TA) имеет опыт работы в Китайской PR, в ней, как правило, преобладают ученые-естествоиспытатели, не имеющие большого опыта в социальных вопросах. Предоставление информации, а не дебаты, скорее всего, будет целью любого исследования, как это было в исследовании нанотехнологий Даляньского технического университета в 2008 году (из 1000 образцов). Этот опрос пришел к выводу, что китайская общественность лучше осведомлена о нано, чем США.В 2008 году компания CASTED провела исследование ГМ-продуктов питания в трех городах и пришла к выводу, что общественное незнание этой темы было широко распространенным явлением (при этом отмечены различия в зависимости от размера города и уровня высшего образования).

Несмотря на то, что ТА известна, оценка технологий с участием общественности (pTA) является относительно новой разработкой, и до сих пор она ограничивалась в Китайской республике конференцией по консенсусу по ГМ-продуктам в 2008 году, в которой участвовало 25 человек. Конференция была организована CAS и Комиссией по науке и технологиям района Сичэн в Пекине.Целью под названием «Наука и сообщество 2008 — ГМО-продукты» было привлечение добровольцев из различных социально-экономических слоев; Было получено 38 заявок, из которых было выбрано 20 общественных участников (плюс 5 экспертов по ГМ-продуктам и здоровью, этике и обществу, потребительскому выбору и законодательству). Итоговый отчет по документу после конференции показал большую неуверенность в отношениях между общественностью и экспертами, чем прежде, поскольку некоторые участники начали «изменять свою покорную позицию по отношению к экспертам», оставаясь при этом поддерживающими правительство.Был сделан вывод, что основным результатом конференции стало разъяснение потребности в большем просвещении населения. ^{Footnote 8}

ГМ продукты питания, нанотехнологии, технологии стволовых клеток и информационные технологии по-прежнему рассматриваются как основные области внимания научного сообщества, а не общественности, но в научном сообществе растет осознание того, что более широкий подход , включая большую осведомленность об общественных проблемах, и, возможно, также и рТА. Семинар по академической морали и научной этике, проведенный в ноябре 2011 года для облегчения интеграции между естественными и социальными науками, свидетельствует о том, что научное сообщество Китая по связям с общественностью осознает, что социальные науки должны играть неотъемлемую роль в оценке и внедрении технологий.

Наноистория, нанорегуляция, нанополитика и наноэтика ЕС

Китайская Республика не одинока в своем убеждении в том, что нанотехнологии являются двигателем экономики. быть высококонкурентной глобальной экономикой, основанной на знаниях. ^{Footnote 9} Акцент на нанотехнологии рассматривался как ключевая часть этой стратегии. Таким образом было сформировано Консультационное агентство European Nano-Electronics Initiative 2004, в рамках которого европейские технологические компании, такие как Philips, Nokia, Ericsson, AMD и IBM, решили, что, если Европа хочет стать мировым лидером, ей необходимо инвестировать не менее 6 миллиарда евро в год на переход от микроэлектроники к наноразмерной.Государственно-частное партнерство, призванное разработать и реализовать европейскую повестку дня исследований в области наноэлектроники, впервые состоялось в 2004 году. Его цели включают: поддержку исследований и инвестиций в нано, ускорение инноваций и производительности, содействие и ускорение проникновения на рынок новых технологий, согласование исследований / технологий с европейской политикой и нормативно-правовой базой, а также повышение осведомленности общественности, понимания и принятия нанотехнологий ([1]: 238–9). Более поздняя группа, Европейская сеть передового опыта (Nano2Life) 2004–2008 гг., Включала около 200 ученых, 23 исследовательских организации из 12 стран и объединилась с промышленными партнерами для определения региональных центров, дисциплин и экспертных знаний, доступных для сотрудничества.Цели включали разработку совместных исследовательских проектов на четырех основных технических платформах: функционализация, обработка, обнаружение и интеграция наноустройств.

Историю нанорегуляции ЕС следует рассматривать в контексте регулирования биотехнологий, которое восходит к созданию в 1991 году Группы Европейской комиссии по этике в науке и технологиях. Группа была создана для консультирования Комиссии о том, как осуществлять свои полномочия в отношении этических аспектов биотехнологии.В своем общем отчете он отметил примеры встроенной этики в политику, такие как План действий по науке и обществу (2001 г.), План действий по наукам о жизни и технологиям (2007 г.), а также законодательные меры, такие как директивы, регулирующие клинические испытания, патенты, данные. защита, использование животных в экспериментах, а также План действий ЕС по химическим, биологическим, радиологическим или ядерным (CBRN) действиям (2009 г.). ^{Footnote 10} Проект EGAIS (Этическое управление возникающих технологий), финансируемый, например, 7-й рамочной программой (Наука в обществе), имеет своей миссией «преодолеть существующие ограничения существующих подходов к этическому управлению в проектах с техническими разработка’.^{Footnote 11} Генеральный директорат и службы Европейской комиссии, занимающиеся нанотехнологиями, насчитывают более десятка, в том числе 7 агентств по оценке рисков. ^{Footnote 12}

Осведомленность ЕС о проблемах нанотехнологий всерьез началась в 2003 году после обсуждения потенциальных рисков Партией зеленых в Европарламенте [36] и после публикации Национальной инициативы по нанотехнологиям (NNI) 2001 года в США. Что касается «рамочных» структур ЕС для финансирования исследований и технологических разработок, Рамочная программа 6 (FP6) (2002–6) указала, что нанотехнологии стали приоритетным направлением исследований, возможно, вызванным необходимостью конкурировать с США.FP6 была введена с политическими целями, направленными на усиление инноваций и «изменение европейского исследовательского ландшафта посредством введения интегрированного европейского исследовательского пространства (ERA), а также обеспечение устойчивого роста, увеличения занятости и большей социальной сплоченности» [37].

В 2004 г. были созданы 3 научных комитета ЕС: SCCS (Научный комитет по безопасности потребителей), который наблюдает за использованием наноматериалов в потребительских товарах; SCER (Научный комитет по рискам для здоровья и окружающей среды), который изучает нанотехнологии в продуктах питания, а также медицинские и экологические проблемы, и SCENHIR (Научный комитет Европейской комиссии по возникающим и недавно выявленным рискам для здоровья), который изучает методологии оценки рисков. оценка новых технологий, таких как нанотехнологии.^{Footnote 13}

План действий ЕК по нанотехнологиям (2005 г.), а также рассмотрение возможных неблагоприятных воздействий на здоровье и окружающую среду, также выдвинули на первый план этические проблемы потенциала нанотехнологий в достижении Целей развития тысячелетия. Помимо обсуждения участия общественности и образования, План поощрял международную совместную работу по нанорегуляции. В 2007 году Европейская комиссия приняла первый отчет о выполнении (2005–2007 гг.) Плана действий и .Второй отчет о реализации был принят в 2009 году с заявлением, что «усилия по решению социальных проблем и проблем безопасности должны быть продолжены для обеспечения безопасного и устойчивого развития нанотехнологий». ^{Footnote 14}

The European Group on Ethics in Science and New Technologies (EGE), созданная в 1991 году, выполняет строго консультативную роль с глобальными перспективами, а не сугубо европейскими (Heemeren). В документе «Мнение 21» ЕГЭ за 2006 год подчеркивается «жизненно важное значение решения проблем безопасности в отношении… нанотехнологий в целом».В отношении наномедицины он выступал за необходимость «принятия мер по проверке безопасности наномедицинских продуктов», а также за вопросы использования нанотехнологий в военных целях, их усовершенствования, экономической справедливости и испытаний на животных. ^{Footnote 15} Группа EGE была названа «в значительной степени неизвестной», согласно публичному (по общему признанию, глобальному, а не европейскому) опросу. ^{Footnote 16} Другой консультативной группой ЕС является ETAG, Европейская группа по оценке технологий, которая занимается проектами по изучению потенциальных рисков для окружающей среды, здоровья и безопасности, связанных с созданными наноматериалами (например, их проект по химическому риску в 2006 г. и по улучшению человеческого потенциала в 2008–2008 гг. 9).

Группа экспертов высокого уровня (HLEG) была созвана Европейской комиссией в 2010 году для разработки возможных политических мер, способствующих внедрению новых технологий в промышленности ЕС. В отчете ГЭВУ по нанотехнологиям предлагаются два взгляда на конвергенцию, одна подразумевает взаимно обеспечивающие технологии, а другая — культуру продвижения улучшений (Foresighting: 2; de S. Cameron, [12]: 29). Интересными частями документа ГЭВУ являются отстаивание как морального плюрализма, так и необходимости того, чтобы этика была неотъемлемой частью технического прогресса.Заявляя, что технологическое развитие должно «соответствовать ценностям разнообразия, социальной справедливости, международной безопасности и экологической ответственности», он рекомендует разработать международный «кодекс добросовестного поведения». ^{Footnote 17}

Европейский проект NanoCode , двухлетний диалог с участием многих заинтересованных сторон, обеспечивающий вклад в Европейский кодекс поведения в отношении ответственных нанонаук и исследований в области нанотехнологий, начался в январе 2010 года с целью мониторинга вклада заинтересованных сторон и предложения изменений к настоящему Кодексу поведения (EU-Coc).^{Footnote 18} В 2011 году в его отчете об отношении заинтересованных сторон к Кодексу был сделан вывод о том, что осведомленность о кодексе «ограничивалась сообществом избранных ключевых экспертов» и не была «встроена в повседневную жизнь» подавляющего большинства исследователей в Европе. . В отчете также сделан вывод о том, что немногие правительства, по-видимому, могут эффективно довести принципы Кодекса до заинтересованных сторон. ^{Footnote 19} Вопрос, поднятый заинтересованными сторонами, касался «отсутствия зубов» у добровольных кодексов, подобных этому, которые не получили широкого распространения, хотя некоторые исследовательские институты заявляют, что их собственных кодексов достаточно.Это поднимает дальнейший вопрос о том, следует ли продвигать Кодекс как «единственный и неповторимый» или разрешать сосуществовать с институциональными руководящими принципами. Предложения о том, как придать Кодексу некоторые «зубы», варьировались от разработки индивидуальных кодексов, т.е. специфичных для нанокомпаний, до «называния и обвинения» в случае несоблюдения, увязки соблюдения с государственным финансированием и включения Код в рамках исследований ЕС в качестве руководства.

В 2008 году Европейская комиссия («Регулирующие аспекты наноматериалов») пришла к выводу, что существующие нормативно-правовые базы ЕС в принципе охватывают потенциальные риски для здоровья, безопасности и окружающей среды, связанные с наноматериалами, и подчеркнула необходимость защиты здоровья, безопасности и окружающей среды. усилено в основном за счет улучшения исполнения действующего законодательства.Однако в ответ на это сообщение Европейский парламент объявил заявление ЕС вводящим в заблуждение и «одномерным». ^{Footnote 20}

РНК Иммунотерапия рака, опосредованная нанотехнологиями

Abstract

Молекулы

РНК (например, миРНК, микроРНК и мРНК) продемонстрировали огромный потенциал для иммуномодуляции и иммунотерапии рака. Они могут активировать как врожденные, так и адаптивные реакции иммунной системы, подавляя или активируя иммунные гены.Кроме того, вакцины на основе мРНК в последнее время активно исследуются и тестируются на онкологических больных в качестве формы лечения. Между тем, были разработаны различные наноматериалы для улучшения доставки РНК к опухолевым и иммунным клеткам. В этой обзорной статье мы суммируем последние достижения в разработке терапевтических средств на основе РНК и их применения в иммунотерапии рака. Мы также подчеркиваем разнообразие платформ наночастиц, которые использовались для доставки РНК, чтобы вызвать противоопухолевые иммунные ответы.Наконец, мы представляем наши взгляды на потенциальные проблемы и возможности нанотерапевтических средств на основе РНК в клинической трансформации в иммунотерапию рака.

Ключевые слова: РНК, наночастица, иммунотерапия, рак, РНКи, CRISPR

1. Введение

За последние два десятилетия терапевтические средства на основе РНК, такие как матричная РНК (мРНК), микроРНК и малые интерферирующие РНК ( siRNA) превратились в очень привлекательные классы лекарств для лечения и профилактики многих заболеваний (например,g., рак, генетические нарушения, диабет, воспалительные заболевания и нейродегенеративные заболевания) ¹ ^— ⁶. По сравнению с обычными низкомолекулярными лекарствами или белками (в частности, антителами), РНК-терапевтические средства могут играть замечательную регуляторную роль в лечении клеток-мишеней, либо увеличивая экспрессию данного белка, либо нокаутируя гены-мишени в той или иной степени. Помимо этих регулирующих функций, тот факт, что они более удобны и проще в разработке, чем препараты на основе белков, делает РНК-терапию такой привлекательной формой лечения для исследователей.Однако нестабильность самих РНК и наличие различных физиологических барьеров, которые ингибируют доставку и трансфекцию РНК, препятствуют их клиническому применению в терапии рака ⁷ ^, ⁸. Более того, экзогенная РНК с большей вероятностью будет очищена внутренними системами защиты человеческого организма, например, различными экзонуклеазами и РНКазами, ответственными за деградацию РНК, основными органами или тканями (например, почками и печенью), а также системой врожденного иммунитета для РНК. зазор ³ ^, ⁹.Чтобы преодолеть такие иммуногенные препятствия и убедиться, что происходит безопасная доставка этих терапевтических РНК к их сайтам-мишеням, системы доставки на основе наночастиц были исследованы в качестве потенциальных инструментов доставки РНК для приложений in vitro и in vivo ¹⁰ ^, ¹¹.

С момента клинического успеха блокады иммунных контрольных точек (ICB) ¹² и Т-клеточной терапии химерного антигенного рецептора (CAR) ¹³ ^, ¹⁴, методы иммунотерапии рака привлекают все больший интерес.В отличие от химиотерапевтических препаратов с ограниченной дозой токсичности и потенциальным развитием лекарственной устойчивости опухолевых клеток, иммунотерапевтические препараты могут подавлять способность опухолевых клеток уклоняться от прекращения иммунной системы или перепрограммировать связанные с раком иммунные системы, и, таким образом, более эффективны. специфичны и способны вызывать длительные противоопухолевые реакции памяти. Несмотря на эти желательные особенности и достижения в исследованиях, используемые в настоящее время антитела ICB и клеточные терапевтические средства (например, CAR-T) в иммунотерапии опухолей далеки от совершенства, и совершенно необходимо следовать новым стратегиям для повышения их безопасности и эффективности ¹⁵ ^— ¹⁷.Терапевтические средства на основе РНК имеют множество потенциальных применений в иммуномодуляции и иммунотерапии рака, например, для подавления иммунных контрольных генов, активации врожденной или адаптивной иммунной системы путем регулирования экспрессии цитокинов и действия в качестве вакцин против опухолевых антигенов ¹⁸ ^, ¹⁹. Использование терапевтических средств на основе РНК в последнее время резко расширилось, и некоторые из них были переведены на клинические испытания в течение последнего десятилетия, что показало, что эти генетические материалы являются отличными кандидатами для лечения рака.Между тем, разработка различных платформ на основе наночастиц, таких как липосомы ²⁰, полимерные наночастицы (НЧ) ²¹ ^— ²⁶ и неорганические НЧ ²⁷ ^, ²⁸ для эффективной доставки РНК обеспечивает светлое будущее терапевтическим средствам на основе РНК и их применению в иммунотерапии рака.

В этой обзорной статье будет представлен обзор нанотерапевтических средств на основе РНК и последних достижений, в том числе наноплатформ для их доставки и применения в иммунотерапии опухолей.Также будут выделены различные наноматериалы, которые использовались для доставки РНК к опухолевым клеткам или иммунным клеткам для индукции противоопухолевых иммунных ответов. Наконец, будут обсуждены текущие проблемы нанотерапевтических средств на основе РНК и будет подчеркнута потенциальная клиническая ценность нанотерапевтических средств на основе РНК в иммунотерапии опухолей.

2. Нанотехнология для доставки терапевтических РНК

2.1 РНК-терапевтические средства

Терапевтические средства на основе РНК продемонстрировали широкий спектр многообещающих применений в области лечения рака.Они действуют как ингибиторы (например, миРНК и микроРНК) или как регуляторы (например, мРНК) экспрессии целевого белка (рисунок). миРНК является двухцепочечной по природе и имеет длину около 22 нуклеотидов. Его предшественник первоначально распознается РНКазой Dicer, а затем включается в РНК-индуцированный комплекс сайленсинга (RISC). Комплекс миРНК-RISC может связываться с целевым сайтом мРНК и приводить к специфичному для последовательности расщеплению эндонуклеазой Argonaute-2 (AGO2), тем самым снижая экспрессию целевого белка ²⁹.МикроРНК — еще одна распространенная короткая регуляторная некодирующая РНК, используемая для блокирования экспрессии целевого гена посредством связывания с целевыми сайтами в 3′-нетранслируемых областях (UTR) кодирующих белок транскриптов ³⁰. Во-первых, первичная микроРНК (pri-microRNA) с характерной структурой шпильки распознается и процессируется ферментами Drosha и DGCR8 в микроРНК-предшественник размером ~ 70 нуклеотидов (пре-микроРНК). Полученная пре-микроРНК дополнительно расщепляется Dicer RNase, что приводит к образованию зрелой дцРНК (микроРНК).Зрелая микроРНК, наконец, включается в RISC, чтобы вызвать расщепление целевой мРНК, такой как миРНК, или репрессию трансляции, которая вызывает уменьшение целевых белков. Как правило, целевые последовательности микроРНК часто обнаруживаются в 3 ‘UTR мРНК и часто могут быть обнаружены в некодирующих или интронных областях. Следовательно, каждая микроРНК может быть способна воздействовать на сотни уникальных мРНК и индуцировать регуляцию транскриптома. Однако по сравнению с способностью направлять мульти-мРНК микроРНК, миРНК обладает специфической связывающей активностью; следовательно, каждая миРНК может связывать только одну мишень мРНК.

Биологический механизм siRNA, microRNA и mRNA для ингибирования экспрессии целевого белка или активации данного белка.

Целью доставки мРНК является усиление экспрессии целевых белков, таких как доставка ДНК, но, в отличие от ДНК, терапевтические мРНК обладают несколькими уникальными особенностями, такими как отсутствие риска инсерционного мутагенеза, более последовательная и предсказуемая кинетика экспрессии белка и относительно удобный in vitro синтез ³¹.Между тем эффективность трансфекции мРНК выше, чем у ДНК, особенно в иммунных клетках ³² ^— ³⁴. Каждая мРНК имеет открытую рамку считывания (ORF), которая включает две нетранслируемые области (UTR), расположенные на 5′- и 3′-концах мРНК, с целью распознавания механизмом трансляции (рибосома). В дополнение к этим UTRs, 5′-метил-кэп и 3′-поли (аденозиновый) хвост мРНК также имеют решающее значение для эффективной трансляции ³⁵.

2.2 Наноносители для доставки РНК

Из-за проблем, связанных с молекулами голой РНК для приложений in vivo , т. Е. Чрезвычайно коротким периодом полураспада (например, минуты), низкой химической стабильностью и легкой деградацией нуклеазами ¹⁸ ^, ³⁶, нанотехнологии обеспечивают универсальную и целевую систему для их безопасной доставки ³⁷. Системы доставки на основе наночастиц не только защищают молекулы РНК от ферментативной деградации и угроз иммунной системе, но также позволяют накоплению РНК происходить в месте опухоли ³⁵ ^, ³⁶.Это накопление РНК может происходить из-за эффекта повышенной проницаемости и удерживания (ЭПР), который является побочным продуктом диаметра НЧ, который может варьироваться от 10 до 200 нм ³⁵ ^, ³⁶. В настоящее время компоненты наноносителей, применяемых для доставки РНК, можно отнести к наносистемам на основе липидов ³⁸ ^— ⁴², полимерным наноматериалам ⁴³ ^— ⁴⁵, неорганическим наночастицам ²⁸ ^, ⁴⁶ ^, ⁴⁷ или био-нано-транспортные средства ⁴⁸ ^, ⁴⁹ (рисунок).Здесь мы суммируем эти платформы на основе наночастиц и далее обсуждаем их сильные стороны и потенциальные недостатки для доставки РНК (таблица).

Схематическое изображение 4 платформ на основе наночастиц, используемых для доставки РНК.

Таблица 1

Платформы на основе наночастиц для доставки РНК

твердые липидные наночастицы; липидные эмульсии

Наноносители	Классификации	Преимущества	Недостатки
Липидные наноструктуры	Липосомы	Простое приготовление, хорошая биосовместимость и биоразлагаемость	Ограниченная стабильность, легкая утечка полезных нагрузок и быстрое удаление
Наноматериалы на основе полимеров	Природные или природные полимеры: хитозан, поли-l-лизенин, ателокололл. и т.п. Синтетические полимеры: PLGA, PEI, PVA, PLA, PEG и т. Д.	Хорошая биосовместимость и биоразлагаемость для природных или природных полимеров, низкая стоимость производства, стимуляция высвобождения лекарства, простая модификация	Неразлагается для некоторых реагирующих полимеров, доза -зависимая токсичность
Неорганические НЧ	MSN, УНТ, КТ и металлические наночастицы (например, оксид железа и наночастицы золота)	Простая модификация поверхности, хорошая воспроизводимость и легкое поглощение клетками	Небиоразлагаемость, потенциальная токсичность
Биовоздушные нанотранспортеры	Наноструктуры на основе ДНК, нанопузырьки-миметики экзосом, призраки на основе членов эритроцитов	Хорошая биоразлагаемость, низкая токсичность, сильное нацеливание и низкая иммунная индукция	Высокая стоимость, проблема стабильности

2.2.1 Наноструктуры на основе липидов

Наноструктуры на основе липидов являются одной из наиболее часто используемых невирусных систем доставки как в академических исследованиях, так и в клинических испытаниях химиотерапевтических или генетических препаратов. Несколько классов липидных наноносителей, включая липосомы, липидные наноэмульсии и твердые липидные НЧ, были использованы для доставки РНК ⁵⁰. Как правило, катионные липиды могут использоваться в качестве носителей для доставки РНК благодаря их положительно заряженному мотиву, который имеет сильное взаимодействие с отрицательно заряженными нуклеиновыми кислотами.Поскольку липиды и фосфолипиды являются основными единицами клеточной мембраны, наноструктуры на основе липидов с подобными единицами имеют естественную тенденцию хорошо взаимодействовать с клеточной мембраной и тем самым облегчают клеточное поглощение РНК. Между тем, очевидные другие преимущества наноструктур на основе липидов, такие как простота приготовления, хорошая биосовместимость и биоразлагаемость, сделали их многообещающим инструментом для доставки терапевтических средств на основе РНК. Однако есть также несколько проблем, в том числе ограниченная стабильность, легкая утечка полезных нагрузок и быстрое очищение почками или печенью, которые следует решить до того, как эти липидные системы доставки будут работать на клинических уровнях или in vivo .

2.2.2 Наноматериалы на основе полимеров

Наноматериалы на основе полимеров являются хорошо изученными системами доставки РНК ⁵¹, которые подразделяются на две основные категории: природные полимеры или полимеры природного происхождения и синтетические полимерные конъюгаты ⁴³ ^. ⁴⁴. Полимеры природного или природного происхождения, такие как хитозан, который состоит из N-ацетил-d-глюкозамина и d-глюкозамина, поли-l-лизина, который состоит из повторяющихся единиц лизина, и ателоколлагена, встречаются в природе и производятся всеми живые организмы.Преимуществами этих наночастиц являются хорошая биосовместимость и биоразлагаемость, а также низкая стоимость производства. ⁵² ^— ⁵⁴. К синтетическим полимерам относятся сополимер dl-лактид-гликолид (PLGA), полиэтиленимин (PEI), поливиниловый спирт (PVA), полиэтиленгликоль (PEG), поли-1-молочная кислота (PLA) и т. Д. наиболее распространенные полимеры, используемые для доставки РНК из-за их высокой стабильности, хорошей биосовместимости и биоразлагаемости ⁵⁵ ^— ⁵⁹.Между тем, важно отметить, что эти синтетические полимеры легко функционализировать с помощью связывания лигандов для нацеливания и с чувствительными единицами, которые реагируют на химические, биологические и физические стимулы для контролируемого высвобождения грузов. Однако некоторые синтетические полимеры (например, PLGA) не могут быть напрямую применены для доставки РНК из-за отсутствия на них катионных единиц, что приводит к низкому электростатическому взаимодействию между полимерами и РНК. Одним из способов решения этой проблемы является модификация различными катионными мотивами (например,g., PEI) или совместной сборки с катионными полимерами в наноструктуры, также отмечается, что большинство катионных звеньев или полимеров не разлагаются, что может быть связано с потенциальными проблемами токсичности ²².

2.2.3 Неорганические наночастицы

В последнее время появились различные неорганические наночастицы, такие как мезопористые наноматериалы кремнезема (MSN) ⁶⁰ ^— ⁶², углеродные нанотрубки (CNT) ⁶³, квантовые точки (QD) ⁶⁴ , и металлические наноструктуры ⁶⁵ (e.g., оксид железа и НЧ золота), как сообщается, являются носителями для доставки РНК. Эти неорганические НЧ синтезируются из биоразлагаемых полимеров и неорганических частиц. Следовательно, свойствами этих наночастиц легко управлять, а их преимущества включают модификацию поверхности, хорошую воспроизводимость и легкое поглощение клетками. Однако уровень разлагаемости всех неорганических материалов еще предстоит определить, и потенциальная токсичность может быть проблемой ⁵⁸. В результате все еще необходимы более обширные исследования in vivo, .

2.2.4 Био-нановезикулы

В недавних исследованиях были обнаружены некоторые био-нановезикулы, такие как наноструктуры на основе ДНК ⁶⁶ ^, ⁶⁷, нанопузырьки, имитирующие экзосомы ⁶⁸ ^, ⁶⁹ , и призраки, основанные на членах эритроцитов ⁷⁰, были исследованы в качестве носителей генов и лекарств для улучшения доставки к клеткам-мишеням. Экзосома представляет собой двухслойную везикулу, покрытую мембраной, секретируемую клетками, функция которой заключается в запуске межклеточной коммуникации путем передачи полезной мРНК, миРНК или белков от одной клетки к другой.Исследования показали, что эти нанопузырьки экзосом обладают хорошей способностью к биоразложению, что можно объяснить их морфологией и поверхностными свойствами, аналогичными свойствам естественных клеток. Происходящие из белков клеточных мембран, призраки на основе клеточных мембран представляют собой еще одни нанопузырьки клеточного происхождения, которые обладают идентичными физико-химическими свойствами, такими как топологическая / физиологическая активность. Эти призраки на основе клеточных мембран имеют многообещающее будущее в нанотехнологиях для различных биомедицинских приложений, таких как адресная доставка терапевтических РНК и регенерация тканей ⁷¹.По сравнению с другими системами доставки лекарств, преимущества этих биоиндуцированных нано-транспортных средств заключаются в низкой токсичности, сильных способностях нацеливания и низкой индукции иммунного ответа. Однако при дальнейших клинических применениях следует учитывать высокую стоимость производства и стабильность везикул.

3. РНК-нанотерапевтические средства для иммунотерапии опухолей

Иммунотерапия опухолей может вызывать синергетический эффект уничтожения опухолевых клеток посредством, прежде всего, воздействия на иммунную систему, а не на сами опухолевые клетки.Современные иммунотерапевтические препараты, включая антитела, белки и сконструированные иммунные клетки (например, CAR-T), являются многообещающими стратегиями лечения рака, и некоторые из них оказались успешными в клинических применениях. Однако эти методы лечения все еще сталкиваются с некоторыми критическими проблемами, такими как недостаточная эффективность (например, ICB показал активность примерно у 15-25% пациентов ⁷²), высокая стоимость и побочные эффекты ¹⁵ ^, ¹⁷ . Агенты на основе РНК обеспечивают некоторые преимущества в иммуномодуляции, такие как высокая селективность по молчанию или повышенная экспрессия конкретных мишеней и низкий риск попадания не в цель.Использование РНК-терапевтических средств в сочетании с наноматериалами — ценная стратегия повышения эффективности иммуномодуляции для лечения рака. При использовании в качестве партнеров в синергетических комбинациях будут достигнуты более эффективные и персонализированные результаты, что позволит комбинации конкурировать с существующими иммунотерапевтическими препаратами, уже имеющимися на рынке.

3.1 Доставка siPHK, опосредованная наноструктурами, для иммунотерапии

В последнее время многие подходы продемонстрировали, что подавление критических факторов прогрессирования опухоли в раковых клетках или отключение / подавление иммуносупрессивных генов в раковых клетках ⁷³ и связанных с раком иммунных клетках может быть эффективным. вызывают противоопухолевый иммунный ответ ⁷⁴ ^, ⁷⁵.Наноматериалы могут действовать как троянские кони, доставляя миРНК для регулирования иммунного ответа к раковым или иммунным клеткам ⁷⁶ ^, ⁷⁷. Здесь мы суммируем потенциальные мишени миРНК в опухолевых или иммунных клетках, а также системы доставки наноструктур для иммунотерапии, опосредованной миРНК (таблица).

Таблица 2

Обзор нанотерапевтических средств на основе миРНК для иммунотерапии опухолей

наноконъюгаты-β2 9045 CD-73 TIP-клетки 9045 фосфат кальция (LCP) Nano2 PEI PEG Мицеллы полипептида PLLeu

Клетки	Наноносители	Целевой ген	Иммунологические эффекты	Ref.
Опухолевые клетки	PCL-PEG / PCL-PEI	PD-L1	Блокада КПП	78
	Полимеры FA-PEI	PD-L1902 902 Блок
	Кислотно-чувствительный мицеллеплекс	PD-L1	Блокада контрольной точки	80
	Кислотно-активируемый мицеллеплекс (на основе PDPA)	PD-L1	CTP-L1	Блокировка контрольной точки 8128	PD-L1, STAT3	Антипролиферация и блокада контрольных точек	82
	НЧ липосомы-протамина-гиалуроновой кислоты	TGF-β	Снижение иммунного ответа на TGF-β и	83
	НЧ, реагирующие на АФК	TGF-β	Измените микросреду иммуносупрессора	84
	Липосома, покрытая НА	CD47	Уменьшение иммунного ускользания опухолевых клеток	85
	Разветвленный полиэтиленимин, функционализированный глутамином	CD47	Вызвать ускользание от фагоцитарной5 9028	Ослабляет иммуносупрессивное микроокружение опухоли	87
	Внеклеточные везикулы (EV)	β-катенин	Комбинированная терапия с ICB	88
	PD-1	Блокада КПП	89
	PEG-PLA	CTLA-4	Блокада КПП	90

	TAM90 Золото	Безмолвные провоспалительные цитокины	91
		Золото NP s	VEGF	Уменьшение набора воспалительных ТАМ	92
Пептиды НП		CSF-1R	Удаление M2-подобных ТАМ	93
IDO	Способствует созреванию ДК и увеличивает секрецию провоспалительных цитокинов	94, 95
НЧ катионных липидов	PD-L1, PD-L2	Блокада контрольной точки		НЧ на основе PEI	PD-L1	Индуцируют иммуносупрессивные ДК в антиген-презентирующие клетки	97
НЧ на основе PEI	IDO	Увеличивают секрецию провоспалительных цитокинов
STAT3	Вызывают созревание и активацию ДК, повышают экспрессию CD86, CD40 и IL-12 производство	99
PLGA NPs	STAT3	Вызывают созревание DC и способствуют перекрестной презентации антигена	100
Катионные липидные NPs	SOCS1	стимулируют выработку и высвобождение	протеинов 101
НЧ PLGA	SOCS1	Повышение выработки и высвобождения провоспалительных цитокинов	102
НЧ типа липидной оболочки	A20	Усиление продукции провоспалительных молекул	103
Прочие	НЧ липидов / ПЭГ	CCR2	Предотвратить накопление моноцитов	104
	НЧ ПЭГ / МТ / ПК	Противодействие пролиферации VEGF, PIGF 9045 105
	НЧ хитозана	Галектин-1	Уменьшите поляризацию до M2 TAMs	106

3.1.1 Иммуненанотерапия siRNA, нацеленная на опухолевые клетки.

Опухолевые клетки могут разрабатывать множество стратегий, способствующих ускользанию от иммунной системы и стимулирующих создание иммуносупрессивного микроокружения. Например, опухолевые клетки могут эффективно индуцировать и привлекать отдельные иммунодепрессивные клетки, способствуя секреции некоторых проопухолевых цитокинов и хемокинов ¹⁰⁷, таких как интерлейкин-6 (ИЛ-6), ИЛ-10, трансформирующий фактор роста-β. (TGF-β), фактор роста эндотелия сосудов (VEGF) и хемокин 5 с мотивом CXC (CXCL5).Между тем, инфильтрирующие опухоль супрессивные клетки ускользают от иммунного надзора, секретируя или экспрессируя несколько иммуносупрессивных молекул, которые нарушают представление антигена дендритными клетками (DC) и подавляют пролиферацию и активацию Т-клеток ¹⁰⁸ ^, ¹⁰⁹. Кроме того, опухолевые клетки могут уклоняться от иммунологической эрадикации за счет подавления экспрессии антигена и повышения экспрессии белков иммунных контрольных точек (например, PD-L1) или сигналов «не ешь меня» (например.г., CD47) ¹¹⁰ ^, ¹¹¹. CD47 сверхэкспрессируется на поверхности раковых клеток, что позволяет избежать распознавания иммунной системой путем маркировки клеток маркером «собственного».

В последние несколько лет нанотерапевтические средства миРНК, нацеленные на опухолевые клетки, были сосредоточены на подавлении иммунных контрольных белков, сигналов «не ешь меня», противовоспалительных цитокинов и т. Д. Для индукции противоопухолевых иммунных ответов. привлекает все большее внимание (рисунок).Например, Yang et al. разработали стратегию системной доставки, основанную на липидных НЧ, покрытых НА, для доставки миРНК CD47 в раковые клетки меланомы, которая индуцировала эффективный нокдаун CD47 в раковых клетках ⁸⁵. Молчание CD47 эффективно подавляло рост опухоли на модели мышей с меланомой. Аналогичным образом, использование нанотерапии на основе siRNA для прямого нокдауна иммунных контрольных точек или противовоспалительных цитокинов на опухолевых клетках также усилило противоопухолевые иммунные ответы и показало значительное ингибирование роста опухоли in vivo .Например, Xu et al. разработали модифицированные маннозой липосомы-протамин-гиалуроновую кислоту NPs (LPH) для инкапсулирования с помощью миРНК TGF-β в опухолевые клетки меланомы B16F10 ⁸³. Между тем, авторы разработали другой липид-кальций-фосфатный NP (LCP) для доставки опухолевых антигенов (то есть пептида Trp 2 и олигонуклеотида CpG) к дендритным клеткам с целью вызвать системный иммунный ответ. Результаты in vivo показали, что подавление TGF-β LPH повышает эффективность вакцинации LCP и значительно ингибирует рост опухоли.

Потенциальные стратегии нанотерапевтических средств миРНК, нацеленных на опухолевые клетки, для иммунотерапии рака.

Захватывающий противоопухолевый эффект, производимый комбинацией двух НЧ, предполагал, что комбинированная терапия двумя или более терапевтическими препаратами вызовет более мощный противоопухолевый иммунный ответ и предложит мощную платформу для лечения рака. Исходя из этого, некоторые стратегии, сочетающие нанотерапевтические средства на основе РНК с фотодинамическими или химическими агентами, описаны в недавних исследованиях ⁸⁰ ^, ⁸¹.Например, Dai et al. сообщили о pH-чувствительной наносистеме, которая при совместной загрузке с PD-L1 siRNA и направленным на митохондрии фотосенсибилизатором и введении в опухолевые клетки, индуцировала синергетический противоопухолевый эффект за счет сочетания фотодинамической и иммунотерапии ⁸⁰. Результаты in vitro и in vivo показывают, что наносистема не только эффективно индуцирует иммунный ответ посредством фотодинамической терапии, но также впоследствии индуцирует опосредованную siRNA блокаду контрольных точек иммунитета, которая дополнительно активирует системные противоопухолевые иммунные ответы и тем самым приводит к к значительному торможению роста меланомы.О подобном результате также сообщили Qiao et al. Они разработали ROS-чувствительную нанотераностическую систему, которая объединила химиотерапию, опосредованную темозоломидом (TMZ), и иммуномодуляцию с помощью терапии на основе siTGF-β на глиобластоме ⁸⁴. В этом исследовании катионный поли [(2-акрилоил) этил (п-бороновая кислота бензил) диэтиламмонийбромид] (BA-PDEAEA, BAP) использовался для конденсации с TGF-β siRNA, цвиттерионными липидными оболочками (ZLEs) затем наносили покрытие на нанокомплекс полимер-миРНК, а TMZ загружали в ядро нанотераностических НЧ (LiB (T + AN @ siTGF-β), LBTA).Наконец, НП были модифицированы пептидом ангиопеп-2, который позволял НП преодолевать гематоэнцефалический барьер (ГЭБ) и накапливаться в области опухоли глиобластомы. Результаты in vitro, и in vivo, продемонстрировали, что эти нанотераностические НЧ эффективно подавляли экспрессию TGF-β в опухолевых клетках и резко повышали эффективность TMZ-опосредованной химиотерапии. Между тем, он показал, что время выживания мышей с опухолью глиобластомы значительно увеличивалось после синергетического комбинированного лечения.

В дополнение к прямому подавлению иммуносупрессивных генов, комбинированная терапия с выключением / отключением онкогенных генов посредством siRNA и терапии блокадой иммунных контрольных точек может предоставить еще один многообещающий метод лечения рака. Например, Мацуда и др. использовали внеклеточные везикулы (EV) для разработки биологической системы доставки, опосредованной наночастицами, для внутрипеченочной доставки миРНК β-катенина к гепатоцеллюлярной карциноме (HCC) ⁸⁸. В этом исследовании EV siRNA β-катенина и терапия на основе анти-PD-1 систематически вводились вместе.Результаты in vivo продемонстрировали, что терапевтические EV улучшили инфильтрацию и праймирование Т-клеток CD8 ⁺ и, таким образом, усилили противоопухолевый эффект анти-PD-1.

3.1.2 Иммунная нанотерапия siRNA, нацеленная на иммунные клетки

Во время прогрессирования опухоли иммунные клетки также могут распознавать и уничтожать опухолевые клетки, что известно как иммунный надзор за опухолью. Однако опухолевые клетки также могут изменять иммунную систему хозяина и ускользать от контроля иммунной системы путем переобучения или перепрограммирования иммунных клеток, например.g., привлечение различных иммуносупрессивных клеток в первичное микроокружение опухоли, индукция иммунных клеток в про-онкогенные типы и ингибирование противоопухолевой активности иммунных клеток ¹⁰⁹ ^— ¹¹¹. Следовательно, подавление иммуносупрессивных клеток или модуляция иммунных клеток на противоопухолевые типы может быть привлекательным подходом для подавления иммунного ускользания опухоли и замедления роста опухоли (рисунок).

Потенциальные мишени миРНК иммунных клеток для иммунотерапии рака.

3.1.2.1 Т-клетки

Подобно высоко / сверхэкспрессируемым ингибиторным молекулам раковых клеток (например, PD-L1), некоторые активированные Т-клетки также сверхэкспрессируют соответствующие ингибирующие молекулы ¹¹² ^, ¹¹³, например в качестве белка 1 запрограммированной гибели клеток (PD-1), белка 4, ассоциированного с цитотоксическими Т-лимфоцитами (CTLA-4) и белка, содержащего муцин 3 (TIM-3). Все эти ингибирующие сигналы известны как иммунные контрольные точки, которые могут подавлять активность Т-клеток и, следовательно, предотвращать устранение опухолевых клеток эффекторными Т-клетками ¹¹³.Таким образом, нацеливание на иммунные контрольные точки Т-клеток также может усиливать противоопухолевые эффекты. Учитывая это, Ли и др. сконструированы катионные НЧ на основе PEG-PLA с липидами для эффективной доставки миРНК CTLA-4 к Т-клеткам ⁹⁰. НЧ состояли из поли (этиленгликоль) -блок-поли (d, l-лактида) (PEG5k-PLA11k) и катионного липида N, N-бис (2-гидроксиэтил) -N-метил-N- (2-холестериоксикарбонил). -аминоэтил) аммонийбромид (BHEM-Chol) полимеры, которые могут инкапсулироваться с миРНК CTLA-4 за счет электростатического взаимодействия.Хотя НЧ были интернализованы только 4-6% Т-клеток in vivo , они способствовали ~ 2-кратному увеличению эффекторных Т-клеток CD8 ⁺ (приблизительно 40,3% против 18,9% PBS), а соотношение CD4 ⁺ FOXP3 ⁺ Tregs было уменьшено примерно в 2,5 раза по сравнению с PBS. Соответственно, эти NP могут эффективно ингибировать рост опухоли и продлевать время выживания мышей с меланомой.

3.1.2.2 ТАМ

Макрофаги — это профессиональные фагоциты для уничтожения патогенов и клеточного мусора.В микроокружении опухоли ассоциированные с опухолью макрофаги (ТАМ) обычно относятся либо к проопухолевому типу M2, либо к противоопухолевому типу M1. Макрофаги или моноциты обычно рекрутируются в область опухоли и поляризованы до M1-типа на начальных стадиях образования опухоли, а на поздней стадии прогрессирования опухоли макрофаги будут преобразовываться из M1 в M2-тип, что, таким образом, оказывает проопухолевые эффекты посредством помогает блокировать CD8 Т-клетки ¹¹⁴ ^, ¹¹⁵. В конечном итоге, снижение выживаемости и рекрутирование ТАМ в опухолевом участке или выполнение направленной доставки терапевтических средств к M2-подобным ТАМ для их истощения из опухолей или преобразования их в тип M1, будет многообещающей стратегией для иммунотерапии рака ¹¹⁶.

Недавние исследования показали, что CCL2-CCR2 ¹¹⁷ и CCL3-CCR1 / CCR5 передача сигналов ¹¹⁸ необходимы для рекрутирования, удержания и фенотипического рекрутирования TAMs. Они также указали, что цитокины ^{, 119,}, включая колониестимулирующий фактор 1 (CSF1) и фактор роста эндотелия сосудов (VEGF), также, как известно, привлекают моноциты. Учитывая это, Qian et al. сообщили о стратегии молекулярного нацеливания, основанной на наночастицах двойного нацеливания (M2NP), которые доставляют миРНК рецептора колониестимулирующего фактора-1 (CSF-1R) к M2-подобным ТАМ для специфической блокады выживания M2-подобных ТАМ, что приводит к истощение их от опухолей меланомы ⁹³.M2NP, несущие миРНК, могут ингибировать продукцию иммуносупрессивных факторов (например, IL-10 и TGF-β), но также увеличивать экспрессию иммуностимулирующих цитокинов (IFN-γ и IL-12) и инфильтрацию Т-клеток CD8 ⁺ ( В 2,9 раза). Более того, он эффективно индуцировал противоопухолевую активность Т-клеток путем подавления экспрессии маркеров истощения (PD-1 и Tim-3) и стимуляции секреции IFN-γ (в 6,2 раза). Результаты in vivo подтвердили, что M2NP приводят к резкому устранению M2-подобных ТАМ (52%), ингибированию роста опухоли (87%) и увеличению выживаемости.

Conde et al. представили пептидно-функционализированные наночастицы золота (AuNP) для доставки миРНК VEGF к M2-подобным ТАМ, где наблюдалось снижение накопления в ткани опухоли легких наряду с усиленным ингибированием роста опухоли в ортотопической модели рака легких на мышах ⁹². VEGF является ключевым ангиогенным фактором, который высоко экспрессируется на M2-подобных ТАМ и, как известно, способствует прогрессированию рака и метастазированию. В этом исследовании авторы доказали, что опосредованное siRNA подавление гена для ингибирования накопления ТАМ может быть достигнуто путем воздействия на путь VEGF, что также указывает на то, что модуляция ТАМ будет вызывать противоопухолевый иммунный ответ и может быть потенциальной мишенью для лечения рака.

3.1.2.3 DC

DC являются наиболее важными антигенпрезентирующими клетками (APC), которые могут захватывать, обрабатывать и представлять опухолевые антигены либо наивным CD8 ⁺, либо CD4 ⁺ T-клеткам. Функции DC заключаются либо в опосредовании иммунной толерантности, либо в индукции противоопухолевого иммунного ответа. Как правило, ДК экспрессируют множество совместно ингибирующих молекул ¹²⁰, таких как супрессоры передачи сигналов цитокинов (SOCS) 1, преобразователи сигналов и активаторы транскрипции-3 (STAT3) и индоламин-2,3-диоксигеназа (IDO).Все эти молекулы могут подавлять процесс презентации антигена DC. Исследования показали, что нокдаун этих молекул с помощью РНКи может быть эффективной стратегией для иммунотерапии на основе ДК ¹²¹ ^— ¹²⁴. Исходя из этого, Heo et al. сообщили о полимерных НЧ PLGA, которые объединяют доставку опухолевых антигенов и миРНК SOCS1 к DC, что индуцирует усиленный противоопухолевый иммунный ответ ¹⁰². SOCS1 функционирует как широко иммуносупрессивный белок, который может напрямую ингибировать презентацию антигена ДК Т-клеткам, а также действует как негативный регулятор киназ Януса (JAK), которые индуцируют иммунную толерантность.В этом исследовании полимерные НЧ PLGA с загрузкой siRNA SOCS1 и пептида OVA были эффективно поглощены дендритными клетками костного мозга (BMDC), и это продемонстрировало значительный эффект нокдауна на экспрессию SOCS1. Подавление SOCS1 в BMDC дополнительно привело к резкому увеличению продукции цитокинов и, наконец, привело к существенной индукции противоопухолевого иммунного ответа.

3.1.2.4 Прочие

Нейтрофилы были описаны как часть врожденного иммунного ответа, но недавние исследования показали, что нейтрофилы могут быть ключевым негативным регулятором адаптивных иммунных ответов, подавляя пролиферацию Т-клеток, и, следовательно, они также являются таковыми. называемые миелоидными супрессорными клетками (MDSC) ¹²⁵.Было выявлено, что MDSC способствуют развитию иммуносупрессивного микроокружения опухоли ¹²⁶. Многие исследования также продемонстрировали, что MDSC критически вовлечены в иммуносупрессивные эффекты благодаря высокой экспрессии метаболических ферментов ¹²⁷ ^, ¹²⁸, таких как IDO и аргиназа-1 (ARG1), цитокины ¹²⁹ ^, ¹³⁰ и хемокины, такие как TGF-β и IL-10. Между тем набор MDSC зависит от хемокинов ¹³¹ (e.г., CCL2). Из-за важной роли MDSC в иммуносупрессии, связанной с опухолью, многие исследования были сосредоточены на изучении терапевтических стратегий для устранения этих клеток или для модуляции их функций ¹³² ^— ¹³⁵. Например, Leuschner et al. ввели нацеленные на моноциты липидные НП для доставки CCR2 siRNA в воспалительный моноцит ¹⁰⁴. Результаты показали эффективное ингибирование экспрессии CCR2 посредством siRNA-опосредованного сайленсинга гена CCR2 в моноцитах, что запрещает их накопление в воспалительных участках и снижает количество TAM.

3.2 Доставка микроРНК, опосредованная наноструктурами, для иммунотерапии

Некодирующие РНК обычно подразделяются на малые некодирующие РНК (например, микроРНК) и длинные некодирующие РНК (днРНК,> 200 нуклеотидов), в зависимости от их размера. Недавние исследования lncRNAs показали, что lncRNAs действуют как критические регуляторы в различных процессах иммунитета, включая дифференцировку и функцию иммунных клеток, регуляцию микроокружения опухоли, но детали регуляторных механизмов остаются неясными ¹³⁶.Хотя текущие исследования в основном сосредоточены на разработке днРНК для иммунной регуляции и функциональной взаимосвязи между днРНК и иммунитетом, а о наноматериалах на основе днРНК для иммунотерапии было мало сообщений, мы можем полагать, что днРНК могут стать новым терапевтическим агентом при раке. иммунотерапия.

Кроме того, недавние исследования показали, что микроРНК связаны с модуляцией различных путей раковых и иммунных клеток. МикроРНК обычно вызывают конкуренцию за онкогенные и опухолевые супрессивные эффекты, блокируя либо опухолевую супрессивную мРНК, либо онкогенную мРНК ¹³⁷ ^— ¹³⁹.Как правило, онкогенные микроРНК сильно / сверхэкспрессируются в раковых клетках, тогда как подавляющие опухоль микроРНК экспрессируются недостаточно. Восстановление подавляющих опухоль микроРНК может как ингибировать пролиферацию раковых клеток, так и индуцировать апоптоз клеток. Из-за этих возможностей этот метод был рассмотрен как новый терапевтический препарат для лечения рака ⁶ ^, ¹⁴⁰. В конечном итоге необходимо тщательно оценить конкретную роль микроРНК в раковых или иммунных клетках и разработать эффективное и безопасное терапевтическое средство на основе микроРНК для лечения рака.

3.2.1 Иммунонанотерапия микроРНК, нацеленная на опухолевые клетки

Как упоминалось выше, опухолевые клетки будут активировать экспрессию белков иммунных контрольных точек или сигналов «не ешь меня» для создания иммуносупрессивного микроокружения. микроРНК действует как регулятор гена, который может использоваться либо для прямого подавления экспрессии факторов иммунного ускользания и провоспалительных цитокинов, либо действовать как онкогенные факторы для облегчения уклонения иммунной системы от опухолевых клеток ¹⁴¹.Например, многие микроРНК, включая miR-34a, miR-200, miR-142-5p и miR-424, и др. было обнаружено, что они участвуют в уровнях экспрессии PD-L1 в нескольких раковых клетках ¹⁴² ^, ¹⁴³. Среди них miR-424 не только активирует иммунный ответ Т-клеток посредством прямого нацеливания на PD-L1, но также может восстанавливать химиочувствительность клеток рака яичников ¹⁴⁴. Однако было обнаружено, что некоторые микроРНК, такие как miR-20b, miR21 и miR-130b, ингибируют экспрессию PTEN при колоректальном раке, но они, в свою очередь, способствуют усилению регуляции PD-L1 ¹⁴⁵.Антагонисты микроРНК представляют собой короткие одноцепочечные олигонуклеотидные молекулы, комплементарные последовательностям микроРНК, которые недавно были использованы для нацеливания и снижения активности микроРНК. Следовательно, использование антагонистов микроРНК также снизит онкогенную активность микроРНК и обеспечит многообещающие результаты целевых генов для иммуномодуляции. На сегодняшний день было опубликовано ограниченное количество сообщений об использовании нанотехнологии для доставки микроРНК к опухолевым клеткам для запуска противоопухолевого иммунного ответа, но есть высокая уверенность в том, что это может быть потенциальной стратегией для иммунотерапии рака.

3.2.2 Иммунонанотерапия микроРНК, нацеленная на иммунные клетки

Многие исследования показали, что микроРНК играют важную роль в модуляции врожденных и адаптивных иммунных ответов посредством контроля дифференцировки и активации иммунных клеток и поддержания иммунных провоспалительных факторов ¹⁴¹ . Эти микроРНК либо способствуют, либо подавляют иммунные клетки, чтобы инициировать противоопухолевые ответы (рисунок). В частности, повышающая регуляция miR-146a ¹⁴⁶ и miR-21 ¹⁴⁷ ослабляет активацию M1-подобных TAM путем нацеливания на путь TLR / NF-κB, но miR-155 ¹⁴⁸ ^, ¹⁴⁹ способствуют M1-подобному Поляризация ТАМ путем нацеливания на SOCS1 или отрицательного регулятора NF-κB и TNF-α-индуцированного белка 3.Было обнаружено, что наряду с ТАМ, некоторые микроРНК, такие как miR-150 и miR-181a / b, контролируют дифференцировку NK-клеток ¹⁵⁰. Использование ингибиторов miR-148 и miR-22 также может способствовать созреванию DCs ¹⁵¹ ^— ¹⁵³. Кроме того, дифференцировка и функции различных субпопуляций Т-клеток регулируются микроРНК ¹⁵⁴ ^, ¹⁵⁵. Напр., MiR-155 больше поддерживает фенотип Th2 ¹⁵⁶, miR-326 способствует дифференцировке Th27 ¹⁵⁷, а кластер miR-10a и miR-17/92 регулируют созревание T-фолликула-помощника ¹⁵⁸.

Потенциальные мишени микроРНК иммунных клеток для иммунотерапии рака. МикроРНК либо вносят вклад, либо подавляют иммунные клетки, чтобы инициировать противоопухолевые ответы.

Учитывая потенциальное применение терапевтических средств на основе микроРНК в иммунотерапии рака, были разработаны различные наноматериалы на основе микроРНК, которые могут эффективно воздействовать на иммунные клетки для иммуномодуляции (таблица). Например, Zhang et al. разработали покрытые липидом наночастицы фосфоната кальция (CaP / miR @ MNPs), которые дополнительно конъюгировали с маннозой для специфической доставки miR155 к ТАМ ¹⁵⁹.Результаты продемонстрировали, что CaP / miR @ MNP могут успешно передавать про-опухолевые M2-подобные ТАМ на противоопухолевые M1-подобные ТАМ и, следовательно, вызывать мощный противоопухолевый иммунный ответ, ингибируя рост опухоли. Аналогичным образом Parayath et al. разработали CD44, нацеленные на наночастицы на основе гиалуроновой кислоты и поли (этиленимин) (HA-PEI), для доставки miR-125b к перитонеальным макрофагам ¹⁶⁰. Сверхэкспрессия miR-125b в макрофагах может способствовать активации M1-подобных ТАМ и вести к ингибированию роста первичной опухоли и метастазирования. Результаты in vivo показали, что соотношение ТАМ M1 и M2 увеличилось более чем в 6 раз, а отношение iNOS (маркер M1) к Arg-1 (маркер M2) в ТАМ после лечения увеличилось в 300 раз. с наночастицами HA-PEI-125b. Все приведенные выше примеры показали, что успешная индукция M1-подобной поляризации ТАМ может усилить противораковую иммунотерапию.

Таблица 3

Обзор нанотерапевтических средств на основе микроРНК для иммунотерапии рака

— M1

Клетки	Наноносители	микроРНК	Иммунологические эффекты	Ref.
Т-клетки	Экзосомоподобные нанопузырьки	Антагонист miR-150	Регулирование Т-клеток	160
ТАМ	Слоистые двойные гидроксиды		МиР-	161
	НЧ с липидным покрытием	miR-155	Реполяризация M2 в M1	158
	НЧ на основе CD44 с покрытием HA-PEI	micR-12590 902 159
DC	Экзосомы	miR-155	Увеличивают экспрессию MHC-II, CD86, CD40 и CD83 и способствуют секреции IL12p70, IFN-gamma и IL-10	162
	Полимерные НЧ PEG-PLL-PLLeu	Антагонист miR-148a	Перепрограммируйте ДК, уменьшите количество Treg-клеток и миелоидных супрессорных клеток	163
NK-клетки	Экзосомы	miR-186	Способствуют активации NK	164

3.3 Доставка мРНК, опосредованная наноструктурами, для иммунотерапии

мРНК, появляющаяся в качестве противоракового средства, привлекает все большее внимание из-за ее множества уникальных особенностей ¹⁶⁶, таких как отсутствие риска инсерционного мутагенеза, более последовательная и предсказуемая кинетика экспрессии белка и относительно удобный синтез in vitro . Однако его низкая стабильность (легко разрушается нуклеазами) и склонность к иммуностимуляции сильно затрудняют применение in vivo .Более того, очень трудно для более крупных молекул мРНК с отрицательным зарядом напрямую проникать в антигенпрезентирующие клетки (APC). Платформы на основе наночастиц с высокой цитозольной транспортировкой и сниженной почечной фильтрацией могут стать многообещающим инструментом доставки мРНК для защиты нуклеиновых кислот от ферментативной деградации и противостояния множественным внутриклеточным и внеклеточным барьерам ³⁵ ^, ¹⁶⁷. Здесь мы опишем два примера, чтобы представить достижения мРНК-наномедицинских препаратов в приложениях иммунотерапии, включая вакцинацию и клеточную инженерию.

3.3.1 НЧ на основе мРНК для вакцинации

Вакцины на основе мРНК

являются многообещающей альтернативой благодаря высокой эффективности, безопасному введению и способности к быстрой разработке и дешевому производству ¹⁶⁸ ^, ¹⁶⁹. Последние достижения в области нанотехнологий в значительной степени преодолели проблемы доставки мРНК in vivo , и поэтому нановакцины на основе мРНК в последнее время привлекают все большее внимание из-за многообещающих результатов, достигнутых во многих исследованиях противоопухолевой вакцинации на моделях животных ¹⁷⁰ ^, ¹⁷¹.Между тем, вакцина на основе мРНК может эффективно переносить антиген-кодирующую мРНК в антигенпредставляющие клетки (APC) in vivo напрямую. Кроме того, вакцина на основе мРНК не имеет ограничений по молекулярным структурам и количеству белков опухолевых антигенов. Когда наноносители эффективно доставляют эти антиген-кодирующие мРНК в APC, мРНК будут высвобождаться и транслироваться в опухолевые антигенные белки в цитоплазме APC, которые затем процессируются в пептидные эпитопы для последующего связывания с главным комплексом гистосовместимости (MHC) класса I. через путь перекрестного представления .Наконец, пептиды MHC переносятся на клеточную поверхность APC для активации Т-клеток CD8 ⁺, что приводит к соответствующим противоопухолевым иммунным ответам (рисунок). Эффективная доставка мРНК in vivo и индукция сильного цитотоксического Т-клеточного ответа являются ключевыми предпосылками иммунотерапии рака нановакцинами на основе мРНК. Применение in vivo нановакцин на основе мРНК имеет так много преимуществ и недостатков, и во многих обзорных статьях суммированы возможности применения нановакцин на основе мРНК в терапии рака.Здесь мы просто описываем один пример, чтобы представить механизм противоопухолевого ответа на нановакцину.

Схематическое изображение перекрестной презентации антигена нановакциной на основе мРНК в APC.

Липидная нановакцина с загрузкой мРНК ассоциированных с опухолью антигенов (например, gp100 и TRP2) была разработана Oberli et al. ¹⁷². В этом исследовании была разработана липидная наночастица, состоящая из ионизируемого липида, липид-ПЭГ, фосфолипида, холестерина и добавки.Ионизируемый липид использовался для образования комплекса с отрицательно заряженной мРНК, а также способствовал захвату клетками. Результаты показали, что НЧ хорошо работают для доставки мРНК к дендритным клеткам, макрофагам и нейтрофилам и эффективно приводят к сильной активации Т-клеток CD8 ⁺ после однократной иммунизации в модели меланомы B16F10. Более того, после лечения этими НЧ опухоль меланомы B16F10 уменьшилась в размерах, и выживаемость мышей значительно увеличилась. Захватывающий результат этого исследования продемонстрировал, что индукция цитотоксического Т-клеточного ответа мРНК нановакциной могла бы стать отличным кандидатом для применения в лечении рака.

В области нановакцин очень привлекательны наноструктуры с олигодезоксинуклеотидами CpG, которые действуют как иммуноадъюванты для индукции иммуностимулирующих реакций. CpG-олигодезоксинуклеотиды являются агонистами Toll-подобного рецептора 9 (TLR9), которые экспрессируются в человеческих B и плазматических дендритных клетках. Недавние исследования продемонстрировали, что CpG не только может индуцировать апоптоз опухолевых клеток с высокой экспрессией рецептора TLR9, но также усиливать активацию NK-клеток и способствовать активации противоопухолевого иммунного ответа путем сочетания с различными видами лечения цитокинами ¹⁷³ ^, ¹⁷⁴.Следовательно, нанотерапевтические препараты на основе CpG могут получить только пользу от комбинации со стратегиями блокады иммунных контрольных точек.

3.3.2 НЧ на основе мРНК для Т-клеточной инженерии

Как новый метод иммунотерапии, CAR-T-терапия достигла большого успеха в лечении пациентов с гематологическими злокачественными новообразованиями ¹³, такими как терапия лейкемии и лимфомы. В настоящее время наиболее распространенными методами разработки Т-клеток, созданных с помощью CAR, является использование трансдукции вирусных генов с помощью вирус-опосредованной доставки.Однако использование вирусных векторов может привести к потенциальному инсерционному мутагенезу и генотоксичности для эффекторных Т-клеток ¹⁵. Между тем, побочные эффекты, которых опасаются, произойдут, когда вирусные векторы трансдуцируют клетки ¹⁷⁵. Следовательно, в настоящее время исследуются более точные манипуляции с Т-клетками.

Использование мРНК вместо ДНК в качестве терапевтического средства для Т-клеточной инженерии (рисунок) привлекательно из-за множества уникальных свойств мРНК ¹⁷⁶ ^, ¹⁷⁷.Между тем, использование наноносителей защищает терапевтические мРНК от деградации и может способствовать захвату клетками и ускользанию через эндосомы. Кроме того, наноносители обеспечивают дополнительные преимущества для конструирования иммунных клеток, например, покрытие специфическими лигандами для увеличения связывания клеток и клеточного поглощения, а также несение множества полезных нагрузок РНК. Moffett et al. разработали целевой наноноситель для перепрограммирования Т-клеток путем доставки нескольких мРНК к Т-клеткам ¹⁷⁸. Наноноситель состоял из отрицательно заряженной полиглутаминовой кислоты (PGA), полимеров поли (β-аминоэфира) (PBAE) и лигандов, нацеленных на Т-клетки (например,g., анти-CD3 и анти-CD8). В этом исследовании авторы сначала использовали свой наноноситель для доставки мРНК FoxO1 (Forkhead box O1, транскрипционный фактор, способствующий генерации и поддержанию Т-клеток памяти) в Т-клетки CAR для сверхэкспрессии FoxO1. Сверхэкспрессия FoxO1 может смещать CAR-T-клетки в сторону центрального фенотипа памяти и, следовательно, улучшать противоопухолевую активность CAR-T-клеток. Кроме того, авторы разработали наноносители мРНК для временной экспрессии белков, редактирующих геном (CRISPR), для эффективного отключения рецепторов Т-клеток в лимфоцитах, запрограммированных на CAR.Результаты продемонстрировали, что НЧ могут эффективно транспортировать мРНК к Т-клеткам-мишеням и впоследствии приводить к Т-клеткам-мишеням для экспрессии выбранных белков. Далее мы опишем клеточную инженерию, опосредованную нанотехнологиями CRISPR-Cas9, и ее применение в иммунотерапии.

Схематическое изображение нанотерапевтических средств мРНК для Т-клеточной инженерии. Наноносители доставляют мРНК CAR к Т-клеткам и индуцируют активацию Т-клеток, экспрессируя белок CAR на поверхности Т-клеток.

3.4 Нанотехнология CRISPR-Cas9 для клеточной инженерии

Система CRISPR / Cas9 (кластеризованные с регулярными интервалами короткие палиндромные повторы) ¹⁷⁸, это управляемая РНК технология нацеливания ДНК, которая широко применяется для редактирования генома ¹⁸⁰ ^, ¹⁸¹, генная терапия ¹⁸² и исследование индуцированных плюрипотентных стволовых клеток (iPS) ¹⁸³. Механизм редактирования генов CRISPR-Cas9 состоит из двух основных компонентов:е., sgRNA и ДНК-эндонуклеаза Cas9 (Рисунок A). Белок Cas9 выполняет функцию определения местоположения и расщепления целевой ДНК, а направляющая РНК имеет 5′-конец, который комплементарен последовательности целевой ДНК. Только когда две макромолекулы образуют комплекс, активность расщепления Cas 9 начинает активироваться (Рисунок A). В иммунотерапии рака CRISPR-Cas9-опосредованное редактирование генома обычно применяется для нокаута генов, кодирующих ингибирующие рецепторные белки опухоли или Т-клеток, таких как PD-1, PD-L1 и CTLA-4 ¹⁸⁴ ^— ¹⁸⁶.В 2016 году случай применения CRISPR-Cas9 в клиническом испытании инженерии Т-клеток путем удаления PD-1 был проведен в Китае, и результат был многообещающим ¹⁸⁷, что указывает на потенциальную ценность редактирования генома, опосредованного CRISPR-Cas9, в иммунотерапия.

A. Механизм технологии CRISPR-Cas9 для редактирования генов. B. Нанотерапевтические средства CRISPR-Cas 9 для клеточной инженерии и применения в иммунотерапии рака. Система CRISPR-Cas 9 (sgRNA с мРНК Cas9, ДНК или белком) транспортировалась к опухолевым или иммунным клеткам с помощью наноносителей.

Хотя CRISPR-Cas9 использовался как особенно универсальный и простой в эксплуатации инструмент для редактирования генов во многих типах клеток, эффективная доставка системы CRISPR-Cas9 в целевые Т-клетки по-прежнему является общей проблемой для эффективного редактирования генома. Кроме того, нецелевые эффекты также обнаруживаются во многих исследованиях редактирования генов, опосредованных CRISPR-Cas9 ¹⁸⁸. Чтобы уменьшить эти эффекты, были разработаны различные наноносители для доставки системы CRISPR-Cas9 ¹⁸⁹ ^— ¹⁹¹, которые могут применяться для манипуляций с иммунными клетками (ТАМ, В-клетки и Т-клетки) и опухолевыми клетками. (Рисунок B).Кроме того, по сравнению с вирусными векторами с высокой иммуногенностью, различные типы наноносителей на основе липидов или полимеров, которые активно нацеливаются с низкой иммуногенностью, показали захватывающую эффективность доставки ¹⁹² ^, ¹⁹³. Например, Ray и др. Сообщили о платформе наноматериалов на основе покрытых катионами аргинина золотых наночастиц ¹⁹⁴, которые доставляют механизм редактирования генов CRISPR-Cas9 в клетки макрофагов для нокаутирующей экспрессии сигналов «не ешь меня» (SIRP-α).Наноплатформа на основе NP продемонстрировала эффективность доставки ~ 90%, а также эффективность редактирования генов ~ 30%. Экспериментальные результаты in vitro также показали 4-кратное увеличение врожденных фагоцитарных способностей макрофагов за счет использования этой стратегии для отключения сигнала «не ешь меня» на макрофагах, что указывает на то, что эта стратегия может быть многообещающим инструментом для разработка «оружейных» ТАМ для иммунотерапии рака. Аналогичным образом Cheng et al. предложили метод двойной эмульсии путем образования комплекса плазмид со стеарилполиэтиленимином (stPEI) в качестве ядра для образования NPs человеческого сывороточного альбумина (HSA) (плазмида / stPEI / HSA) для доставки CRISPR / Cas9 ¹⁹⁵.NP могут нарушать или подавлять экспрессию PD-L1 посредством редактирования генов, опосредованного CRISPR / Cas9.

4. Выводы и перспективы на будущее

За последние несколько лет иммунотерапия оказалась одной из наиболее многообещающих терапевтических стратегий и привела к смене парадигмы в лечении рака ¹³ ^, ¹¹². Терапевтические препараты на основе РНК обеспечивают несколько преимуществ в иммуномодуляции и противораковых вакцинах, которые будут выступать в качестве конкурента и текущего партнерства в области иммунотерапии для достижения синергетических комбинаций для более эффективных и персонализированных результатов ⁷⁵ ^, ¹⁶⁹ ^, ¹⁷⁶ ^, ¹⁹⁶.По сравнению с обычными белками, антителами и клеточными терапевтическими средствами (например, CAR-T), терапевтические средства на основе РНК, включая миРНК, микроРНК и мРНК, могут либо нокаутировать, либо нокаутировать целевые гены, либо повышать экспрессию специфических белков и т. Особенности терапии на основе РНК обуславливают высокую селективность и низкий риск попадания не в цель. Между тем терапевтические средства на основе РНК стали гораздо более разнообразными и широкими по регуляторным функциям в иммунотерапии, чем другие методы лечения на основе антител или белков.Например, терапевтические средства на основе РНК могут активировать быстрый и эффективный противораковый иммунный ответ, вызывая гибель иммуногенных клеток опухолевых клеток, и, таким образом, могут пропустить требование глубокого проникновения в опухоль — серьезное препятствие, с которым сталкиваются традиционные наномедицины против рака. Более того, разработка и производство терапевтических РНК-препаратов очень удобны, быстры и рентабельны. ¹⁹⁷. Успех доклинических исследований привел к началу клинических испытаний различных форм РНК-терапевтических средств для иммунотерапии рака (таблица).

Таблица 4

Текущие клинические исследования РНК-опосредованной иммунотерапии для лечения рака

9 Т-клетки «type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT02140138», «term_id»: «NCT02140138»}} NCT02140138

Нацеленные клетки	Кодирование РНК	Типы рака	Статус	ClinicalTrials.gov Идентификационный номер
MET scFv CAR	Злокачественная меланома, рак груди	Набор на раннюю фазу 1	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT03060356», «term_id»: «NCT03060356»}} NCT03060356
cMet CAR	Метастатический рак молочной железы; Тройной отрицательный рак молочной железы	Фаза 1 завершена	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT01837602», «term_id»: «NCT01837602»}} NCT01837602
Chimeric иммунорецептор против мезотелина SS1	Рак поджелудочной железы	Фаза 1 завершена	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT01897415», «term_id»: «NCT01897415»}} NCT01897415
DC	TAA: NY-ESO-1, MAGEC1, MAGEC2, 5 T4, Survivin и MUC1	Рак легкого	Фаза 2 Набор персонала	{«тип»: «клиническое испытание», «атрибуты» «: {» text «:» NCT03164772 «,» term_id «:» NCT03164772 «}} NCT03164772
	TAA: PSA, PSCA, PSMA, STEAP1, PAP и MUC1	Карцинома предстательной железы
	Neo-Ag	Меланома	Актив Нет рекрутинга g	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT02035956», «term_id»: «NCT02035956»}} NCT02035956
	Neo-Ag	Солидная опухоль	Фаза 1 Набор	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT03313778», «term_id»: «NCT03313778»}} NCT03313778
	Neo-Ag	Меланома; Рак толстой кишки; Рак желудочно-кишечного тракта; Рак мочеполовой системы; Гепатоцеллюлярный рак	Фаза 2 завершена	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT03480152», «term_id»: «NCT03480152»}} NCT03480152
	Три варианта РНК ; p53 и Neo-Ag на основе скрининга NGS	Рак молочной железы (тройной отрицательный рак молочной железы)	Набор персонала фазы 1	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT02316457» , «term_id»: «NCT02316457»}} NCT02316457
	РНК карциноэмбрионального антигена	Колоректальный рак; Метастатический рак	Фаза 2 завершена	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT00003433», «term_id»: «NCT00003433»}} NCT00003433
	Антиген, специфичный для простаты (PSA)	Рак простаты	Фаза 2 завершена	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT00004211», «term_id»: «NCT00004211»}} NCT00004211
	Карциноэмбриональный антиген	Рак молочной железы; Колоректальный рак; Рак внепеченочных желчных протоков	Фаза 1 завершена	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT00004604», «term_id»: «NCT00004604»}} NCT00004604
	Всего РНК опухоли	Рак почки	Фаза 1 завершена	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT00005816», «term_id»: «NCT00005816»}} NCT00005816
	РНК аутологичной опухоли	Меланома	Набор участников фазы 3	{«type»: «клиническое исследование», «attrs»: {«text»: «NCT01983748», «term_id»: «NCT01983748»}} NCT01983748
	TAA: NYESO-1, MAGE-A3, тирозиназа и TPTE	Меланома	Набор участников фазы 1	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT02410733», «term_id»: «NCT02410733»}} NCT02410733
	миРНК: LMP2, LMP7 и MECL1; мРНК: MART-1, тирозиназа, gp100 и MAGE-3	Меланома	Фаза 1 завершена	{«type»: «клиническое испытание», «attrs»: {«text»: «NCT00672542», «term_id» «:» NCT00672542 «}} NCT00672542
	Мелан-A, Mage-A1, Mage-A3, Survivin, GP100 и тирозиназа	Злокачественная меланома	Фаза 1/2 завершена	{» тип «:» клинический- испытание «,» attrs «: {» text «:» NCT00204516 «,» term_id «:» NCT00204516 «}} NCT00204516
	pp65-flLAMP	Глиобластома	Активно Нет набора	{» тип «:» клинический -trial «,» attrs «: {» text «:» NCT03615404 «,» term_id «:» NCT03615404 «}} NCT03615404

Учитывая потенциал этих терапевтических средств РНК, различные системы доставки на основе наночастиц, такие как липиды полимерные, неорганические и биологические наноматериалы на основе широко исследованы ⁴⁹ ^, ¹⁶⁷ ^, ¹⁹⁸ ^, ¹⁹⁹.Эти системы доставки на основе наночастиц не только несут высокую дозу терапевтических нагрузок к клеткам или тканям-мишеням, но также демонстрируют те же регуляторные функции в иммунотерапии с помощью РНК-терапевтических средств. Кроме того, комбинация РНК-опосредованной наноиммунотерапии с химио- или фотодинамической терапией продемонстрировала многообещающие результаты на модели животных ⁸¹ ^, ¹⁰⁶. Между тем, сочетание РНК-опосредованной нанотерапии с существующими иммунотерапиями (например, анти-CTLA-4, анти-PD-1 и анти-PD-L1) также является прекрасной возможностью для улучшения лечения рака ¹³³.Однако до того, как такие приложения будут переведены в клинику, необходимо решить несколько вопросов.

Начнем с того, что некоторые из основных барьеров, которые препятствуют стабильности и безопасности in vivo различных носителей наноматериалов, включают цитотоксичность и нежелательную иммунную стимуляцию ²¹ ^, ²⁰⁰. Как упоминалось ранее, потенциальные проблемы токсичности in vivo могут возникать из-за использования катионных единиц в полимерных НЧ, утечки полезной нагрузки из липидных наноструктур и небиоразлагаемости неорганических НЧ ²⁰ ^, ³⁸.Кроме того, НЧ могут распознаваться как чужеродные вещества и, таким образом, легко выводиться из организма посредством почечного / печеночного клиренса или устраняться врожденной иммунной системой ¹⁹⁸. Для решения этих проблем наноносители должны быть биосовместимыми и способными к биоразложению за счет модуляции поверхности НЧ биомолекулами или подходящими гидрофильными материалами, такими как PEG.

Во-вторых, наноносители должны увеличивать нацеливание на клетки и их интернализацию. Например, для нацеливания на опухолевые клетки, чтобы заставить замолчать PD-L1 с помощью НЧ на основе РНК, необходимо воздействовать на как можно большее количество из них, что требует высокого накопления и глубокого проникновения в опухоль.Чтобы увеличить клеточное поглощение и, таким образом, повысить эффективность доставки РНК, НЧ могут быть покрыты нацеливающими лигандами, что повысит вероятность связывания с целевыми клетками. Кроме того, эффективная доставка и высвобождение РНК по требованию станет возможной благодаря включению основных цепей, чувствительных к различным стимулам, либо эндогенным (например, pH, фермент и окислительно-восстановительный потенциал), либо экзогенным (например, температура, электричество, свет, магнитная сила, ультразвук) ²⁰¹ ^, ²⁰².Такая особенность наноносителей позволит обеспечить оптимальное пространственное и временное высвобождение полезных нагрузок РНК. Несмотря на то, что многие нанопузырьки инфильтрируют клетки-мишени через эндоцитозный путь, они все же должны преодолевать барьеры, которые создают эндосомы и лизосомы, прежде чем достичь конечной цели — высвобождения из цитозоля терапевтических РНК ²⁰³. Обычно наноматериалы транспортируются в эндосомы, которые затем сливаются с лизосомами и в конечном итоге разрушают грузы РНК. Некоторые специфические нацеливающие пептиды (например,g., HA) или поверхностно-активные вещества могут быть использованы при приготовлении наноносителей, чтобы обеспечить выход из эндосом / лизосом через эффект протонной губки или лизис мембраны. Следует отметить, что многие реагирующие на раздражители наноматериалы обладают потенциальной дозозависимой цитотоксичностью. Эта цитотоксичность была вызвана тем, что мотив, реагирующий на стимулы, часто ограничивался недостаточной биосовместимостью или необходимостью биоразлагаемости ²⁰⁴. Между тем сложность архитектурного дизайна и трудности синтеза этих НЧ, вероятно, затруднят их клиническое воплощение.Следовательно, соотношение пользы и риска для развития отзывчивых НП необходимо сбалансировать, и в конечном итоге необходимо будет решить проблемы, связанные с характеристиками реагирования.

Таким образом, целью данной обзорной статьи было обобщить и выделить основанные на РНК нанотерапевтические средства для иммуномодуляции и усиления иммунотерапии рака. Учитывая удобство и важность РНК-терапевтических средств в иммунотерапии рака, использование наноматериалов для эффективной доставки РНК к опухоли-мишени или иммунным клеткам для запуска противоопухолевого иммунного ответа уже дало некоторые впечатляющие результаты в лечении рака.Между тем, сочетая РНК-опосредованную иммуномодуляцию с иммунотерапией ICB, химиотерапией и фотодинамической терапией, были отмечены синтезированные эффекты, и впереди ждет светлое будущее для клинического использования лечения рака. Несмотря на то, что наноплатформы доставки РНК для клинического применения все еще остаются сложной задачей, необходимо решить некоторые проблемы, прежде чем нанотерапевтические препараты будут переведены со стендов на стационарные. Мы полагаем, что РНК-опосредованная наноиммунотерапия обладает большим потенциалом для преодоления некоторых из этих недостатков и может быть использована для лечения рака в будущем.

где купить сигареты kent

Исторически сложилось так, что люди начали покупать сигареты Kent, как только они были выпущены на рынок в 1952 году. Япония, Южная Корея, Тайвань, Гонконг, Малайзия, Индия отправляют USPS 10-25 дней. Спасибо, ребята, за отличный сервис. Сигареты Kent, известные своим превосходным вкусом и высококачественным фильтром, доступны на сайте CigsSpot.com по цене 3,90 доллара за пачку, причем самыми дорогими из них являются кабриолеты Kent, которые доступны по цене 4 доллара за пачку.Все они на 100% подлинны и производятся в других странах, где акцизный налог на табачные изделия намного ниже. Используя современные технологии в производстве, сигареты Kent достигли высших стандартов качества и стали первыми в списке курильщиков, ищущих качество. дешевые сигареты. Одна картонная упаковка содержит десять пачек оригинальных сигарет с заводской опечаткой, не соответствующих требованиям FSC (не пожаробезопасных). Сигареты Kent Nanotek Infina по обычной цене. Kent относится к категории сигарет премиум-класса и продается более чем в 70 странах мира.Сигареты размера «king-size» с фильтром в коробке с откидной крышкой. Сигареты известных брендов, включая сигареты Kent и табак, доступны прямо со склада для немедленной отправки. — Кент Нанотех Нео У них отличное качество, но при этом низкая цена. 1 (INFINA) сигареты 10 коробок, сигареты Kent Nanotek Futura 10 коробок, сигареты Kent Nanotek Futura (мини) 10 коробок, сигареты KENT NANOTEK INFINA 2.0 (WHITE) 10 коробок, сигареты Kent Nanotek Infina 10 коробок, KENT NANOTEK NEO 2.0 (SILVER) сигареты 10 коробок, Сигареты Kent Nanotek Silver 10 коробок, Сигареты Kent NEO Nanotek (мини) 10 коробок, сигареты KENT NEOSTIKS FRESH MIX 10 коробок, KENT NR. Если ей будет оказана поддержка в отказе от курения в ее трудные дни, она сможет полностью выжить после беременности. Цена 150 долларов США за 10 коробок Kent Super Lights Nr. Купить сигареты онлайн в Великобритании. — Кент Уайт Инфина Или лучшее предложение. Сигареты Marlboro Gold 100s. сигареты с ментолом. Еще одной отличительной чертой Kent является высокое качество, богатый купаж табака и аромат.8 (FUTURA) сигарет 10 коробок, KENT S SERIES SPARK MINT 1 100 BOX сигарет 10 коробок, KENT S-SERIES SPARK MINT 5 100s BOX 5 мг 10 коробок, KENT S.SERIES SPARK 5 100S BOX сигарет 10 коробок, Kent Super Lights Nr. — Кент Сильвер Нео N4 Дополнительная информация Всего за 41,00 $ КУПИТЬ СЕЙЧАС Kent White содержит около 1 мг смолы и 0,1 мг никотина. Сигареты Kent — прекрасная возможность попробовать новый, вкусный продукт. — Кент Блю Футура 100 1 упаковка Всего 28 долларов США. Недорогие сигареты Kent в интернет-магазине сигарет www.DF-Smokes.com.Купить сигареты из канады. мы, наверное, самый старый магазин сигарет в Интернете. Вероятно, это единственная сигарета, удостоенная этой награды. 1 упаковка Всего 29 долларов США. Наш магазин — одно из самых дешевых мест для покупки сигарет, включая Kent, что дает возможность сэкономить. Вы можете попробовать и убедить себя, что Кент — лучшего качества. Сигареты Marlboro Gold Regular. Купите сейчас сигареты марки Kent по низкой цене в Интернете. Недорогие сигареты в Великобритании онлайн.Почему вы должны выбрать нас, чтобы купить Kent HD Silver? Просто купите сигареты Kent, и вы вне всяких разумных сомнений убедитесь, что они лучшего качества. JBP APS — это идеальный интернет-магазин в США, где вы можете купить сигареты Kent онлайн по низким ценам. Сигареты Kent в Интернете, купить сигареты Kent в Интернете, дешевые сигареты Kent, дешевые сигареты Kent в Интернете, Купить сигареты Kent в Интернете с помощью ETC, заказать сигареты Kent, сигареты Kent, где я могу купить, сигареты, табачный магазин — Kent King Size 3 доллара.99 доставка. Kent 100’s; Мягкая упаковка; 1 коробка = 10 упаковок; 200 сигарет; Дополнительная информация. Большинство самых известных мировых брендов всегда доступны по доступным ценам. Льготная политика при крупных заказах. Мы предлагаем множество интересных вариантов, например, несколько способов оплаты, среди которых вы можете выбрать вариант, который вам больше всего подходит для оплаты сигарет. — Тройной угольный фильтр Kent Silver Neo 100 Интересно, что бренд был назван в честь тогдашнего председателя компании Герберта Кента.Сигареты Kent — прекрасная возможность попробовать новый, вкусный продукт. Купить сигареты Kent. Гарантия самых низких цен. Сигареты Kent, которые можно купить в нашем онлайн-магазине сигарет, изготовлены из мелко нарезанного табака, и в их состав входит смесь нескольких различных видов табака. Купить сейчас; Фиолетовая коробка KS Silk Cut. Вы можете найти сигареты премиум-класса, такие как: сигареты MARLBORO, произведенные в США, по цене от 23 долларов США, бесплатная доставка по всему миру с задержкой доставки (кроме Франции) в течение 10 дней. Купить дешевые сигареты Kent, произведенные в США, от 24 долларов США.35 (включая доставку по всему миру). Кент. С вами мы по-прежнему можем наслаждаться дешевыми и хорошими сигаретами. Бренд сигарет Kent был запущен на табачный рынок в 1952 году компанией British American Tobacco Company, и этот бренд произвел настоящую революцию в табачном мире, выпустив первую сигарету с фильтром, которая дала совершенно новый опыт курения. Доставка по всему миру. Купить сигареты Kent в Интернете, дешевые сигареты Kent в Интернете. Опубликовано 7 ноября 2013 г. автором olgapochtbox. Цена предложения: 3 x 24,50 доллара = 73,50 доллара. Профессиональный склад сигар с постоянной температурой.марки сигарет. Сигареты Kent Deluxe 100’s Soft Pack обладают богатым вкусом, который никогда не оставляет химического послевкусия. Сигареты Kent 100’s Soft Pack 10 коробок, сигареты Kent Golden Light Kings 10 коробок, сигареты Kent Golden Lights 100’s Soft Pack 10 коробок, сигареты Kent HD Futura (Futura 8) 10 коробок, сигареты Kent HD Infinia (White 1) 10 коробок, Kent HD Сигареты Neo (Neo 4) 10 коробок, сигареты KENT HDS BLUE SUPER SLIMS 100S 10 коробок, серебряные сигареты Kent III 100 10 коробок, сигареты Kent III Kings Soft Pack 10 коробок, сигареты Kent INFINA Nanotek (мини) 10 коробок, серебряные сигареты Kent iSwitch 10 коробок, сигареты Kent King Soft Pack 10 коробок, KENT LIGHTS NR.Получите лучшие предложения на коллекционные табачные сигареты Kent, делая покупки в самом большом онлайн-ассортименте на eBay.com. 1 коробка Всего 31 доллар. 0 отзывов. Если вы ищете сигареты лучшего качества, то мы — то, что вам нужно. В наши дни дешевые сигареты Kent в Интернете обладают очень своеобразным вкусом, который выделяет их. Купить сейчас; Kent Deluxe 100’s Soft. Льготная политика для крупных заказов. Все ваши заказы будут обработаны в течение 48 часов и доставлены прямо к вашим дверям. Наш интернет-магазин предлагает британским покупателям возможность купить дешевые сигареты в Интернете от самых известных мировых производителей.Наши сигареты Kent… Сигареты в Великобритании чертовски дороги! Смеси сигарет Kent: сигареты Kent известны своим высококачественным табаком, который изготавливается из богатой смеси. Ваш заказ будет обработан и отправлен в кратчайшие сроки и доставлен прямо к двери вашего дома. О НАС. Сигареты Kent Deluxe 100’s Soft Pack обладают богатым вкусом, который никогда не оставляет химического послевкусия. Эта цена высока и несправедливо наказывает потребителя, считая, что настоящие… Их не следует принимать за сигареты с ментолом, и вот почему.… Хейан в кармане на неделю, итого Остальное можно комбинировать. Также продаем сигареты кретек из России. Kent Покупайте дешевые сигареты Kent в одном из крупнейших розничных продавцов сигарет. 1 коробка Всего 31 доллар. Компактный «королевский» размер. Смола 8 мг, никотин 0,7 мг. Сигареты Marlboro Red Regular. В отличие от других веб-сайтов, когда вы покупаете сигареты в Интернете у нас, в Booze Up, мы доставим ваши сигареты к вам домой, как правило, в течение 30 минут после того, как вы закажете сигареты онлайн. Глобальная экспресс-доставка.Кент в Румынии Интернет-магазинам, таким как «Купить дешевые сигареты в Интернете» — «Интернет-магазин сигарет», разрешено продавать курильщикам сигареты различных марок, а потребители также могут приобретать этот продукт на законных основаниях. Сигареты размера «king-size» с фильтром в коробке с откидной крышкой. Купить сейчас; Фиолетовая коробка KS Silk Cut. 15 июня 2014 года Reynolds American предложил купить табачную компанию Lorillard за 27,4 миллиарда долларов, и с 12 июня 2015 года бренд Kent стал собственностью R.J. Reynolds Tobacco Company. Покупайте сигареты Kent онлайн по супер низким ценам.CigarettesON.net предлагает качественные сигареты для дыма Kent от всемирно известных производителей, а также низкие оптовые цены и быструю доставку в большинство регионов США. Купить сейчас; Kent Nanotek Infinia. Каждый, кто покупает дешевые сигареты Kent, свидетельствует об этом избытке вкуса. Каждая коробка содержит 10 пачек по 20 сигарет. В 1 коробке 200 сигарет. Купите дешевые серебряные сигареты Kent HD в Интернете по лучшей цене. Чтобы купить сигареты в Интернете, перейдите в наше меню сигарет, выберите сигареты, которые вы хотите купить в Интернете, добавьте их в корзину и оформьте заказ.0. Купить сейчас; Kent Nanotek Neo. Купить дешевые сигареты Kent Futura в Интернете по лучшей цене. Модель: C125; 172 шт. На складе; Перевозки. DutyFreeKing «Купить дешевые сигареты» в Великобритании была задумана в марте 2017 года, когда Великобритания решила поднять минимальную цену на 20 сигарет за пачку до 7,35 фунтов стерлингов (8,50 евро или 10,70 долларов США). 200 серых сигарет с фильтром в картонной коробке. Это был первый бренд, у которого был фильтр, современная версия которого сделала Kent столь известным во всем мире. Купить сигареты Kent в Интернете, дешевые сигареты Kent в Интернете.Гарантированная доставка во все 50 штатов США. buy-cigarettes-on-line.com поставляет по всему миру качественные сигареты, произведенные в США, по лучшим ценам. Купить сейчас; Kent KS Box 6 (SPECTRA) сигареты 10 коробок, KENT PREMIUM LIGHTS NR. Продается в картонных коробках по 10 пачек, каждая бело-черная пачка содержит 20 длинных сигарет, спрятанных под хрустящей золотой фольгой. Покупайте сигареты Kent на CigArena.com. Получите лучшие предложения на коллекционные табачные сигареты Kent, делая покупки в самом большом онлайн-ассортименте на eBay.com. … Сигареты KENT MIX 10 коробок. Другие бренды, на которые стоит обратить внимание: Добро пожаловать в лучший интернет-магазин сигарет, мы продаем сигареты Newport онлайн оптом, сигареты Newport 100s, сигареты Marlboro, парламентские сигареты, сигареты Lucky Strike, сигареты L&M, сигареты Winston, сигареты Dunhill, покупайте дешевые сигареты на сайтеigarettescigs.com, сэкономьте 50%! Купить сейчас; Kent Deluxe 100’s Soft. дешевые сигареты. Дом; О; Сообщение навигации Покупка сигарет Kent. 8. Эти ароматные сигареты обладают приятным, но не подавляющим вкусом.Удобная обработка платежей картой Visa или электронным чеком. Просто купите сигареты Kent, и вы вне всяких разумных сомнений убедитесь, что они лучшего качества. ЗАКАЗАТЬ СИГАРЕТЫ ОНЛАЙН Мы предлагаем широкий выбор сигарет по конкурентоспособным ценам. Самый большой выбор дешевых сигарет Kent, Kent Blue Futura, Kent Convertibles, Kent Deluxe 100, Kent HD, Kent Nanotek Infina, Kent Nanotek Neo, Kent Original Taste, Kent Silver Neo, Kent Silver Neo 100 Charcoal Triple Filter и Kent White Infina to Покупайте в Интернете по самым низким ценам. Он также обладает прекрасным ароматом, что подтверждают многие курильщики.1 коробка Всего 31 доллар. — Оригинальный вкус Кента Сигареты Made in EU Kent — отличный выбор для тех, кто ищет крепкие ароматные сигареты. Сигареты Kent Сортировка: ПОКАЗАТЬ: Сигареты Kent 100 10 коробок. Глобальная экспресс-доставка. Если вы готовы купить гвоздичные сигареты в Интернете, зайдите на Smokersunit.com. Мы можем предложить вам скидки на различные типы гвоздичных сигарет. В Интернете вы можете найти купоны на скидку на сигареты Kent, которые регулярно предоставляются тем, кто предпочитает эти сигареты премиум-класса.марки сигарет. Никогда не думала, что купить сигареты Rothmans онлайн так удобно и дешево! Для ясности, дешевые сигареты Kent в Интернете были передовыми сигаретами, которые были сделаны с фильтром. Бесплатная доставка для многих товаров … или купите сейчас. 1 упаковка Всего 28 долларов США. 1 упаковка Всего 28 долларов США. 100% удовлетворение гарантировано. Еще лучше; дешевые сигареты Kent онлайн имеют очень своеобразный ароматный вкус. Профессиональный склад сигар с постоянной температурой. Сигареты Marlboro Gold 100s.Кент Маркетинг. купить сигареты онлайн. Наш интернет-магазин предлагает австралийским покупателям возможность купить дешевые сигареты в Интернете. 4 (Neo) Сигареты 10 коробок. U.S. Cigarettes Store Inc специализируется на предоставлении ценителям высококачественных сигар по всему миру. Купить сигареты Kent онлайн. Эти ароматные сигареты обладают приятным, но не подавляющим вкусом. курить сигареты. Сигареты Kent 100’s. Эта цена высока и несправедливо наказывает потребителя, учитывая, что истинная рыночная стоимость сигареты… Buy Now; Kent Blue 100’s.Для получения дополнительной информации ознакомьтесь с нашими часто задаваемыми вопросами. Сигареты Kent Super Lights N4 Box, сигареты Kent Premium Lights N8 Box и сигареты Kent Lights N1 Box доступны по сниженным ценам в нашем онлайн-магазине сигарет для немедленной отправки. Купить сейчас; Kent Blue 100’s. Kent Convertibles (также известная как Kent Click) — это особая марка сигарет Kent, в которой используется полностью инновационная система, повышающая качество сигареты и получаемое во время курения удовольствие. Сигареты Marlboro Gold Regular.Вы можете найти сигареты премиум-класса, такие как: Сигареты MARLBORO, произведенные в США, по цене от 23 долларов США, бесплатная доставка по всему миру с задержкой доставки (кроме Франции) в течение 10 дней. Многие опытные курильщики ценят сигареты Kent. Без сомнения, это наш первый выбор и один из пяти лучших мест для покупки сигарет онлайн в 2020 году. У нас вы всегда можете заказать сигареты таких брендов, как Marlboro, Camel, Dunhill, Kent, Vogue и многих других. Купите со скидкой сигареты Kent в онлайн-магазине сигарет Pro-Smokes.com по самым низким ценам.Мы предлагаем сигареты Kent со скидкой в самом большом ассортименте с быстрой доставкой в США и по гарантированным сниженным ценам, такие как Kent HD Neo, Kent Deluxe 100 и Kent Convertibles. Но, скорее всего, специальный угольный фильтр, уникальное изобретение этой марки, принес им большой успех, так как они считаются первыми сигаретами с фильтром. Если вы собираетесь в клуб или готовитесь к экзамену, у нас есть сигарета, чтобы вы могли продолжать. Все ингредиенты, которые входят в состав сигарет Kent Deluxe 100’s Soft Pack, находятся на высшем уровне.Экзотика, дыня, жевательная резинка. Вы просто не сможете купить сигареты Kent со скидкой, не признав, что они соответствуют лучшим стандартам. — Кент Свитч Футура Бренд популярен во многих странах, и его известность растет день ото дня. Пожалуйста, ознакомьтесь с их часто задаваемыми вопросами, чтобы узнать больше о том, как можно купить сигареты в Интернете в Великобритании, на веб-сайте Duty-Free King со слоганом «Купи дешевые сигареты в Интернете». Он сразу же обнаруживает, что сигареты Kent соответствуют высшим стандартам качества и стали первыми в Интернете… Доступная цена без ущерба для качества. Для этого, курильщикам известна компания P. Lorillard! Его слава по-прежнему растет день ото дня, ваши ожидания по разумной цене без компромиссов.! Пачка содержит 20 длинных сигарет, спрятанных под хрустящей золотой фольгой 6 коробок сигарет (SPECTRA). Как шалфей или Розмарин Кентский, где можно купить сигареты kent, лучшее качество из ассортимента брендов включает Camel! Дверь для дома доступна в более чем 70 странах в США от вас … В три раза больше; Kent KS Box купить Сигареты Kent известны своим качественным табаком! Пакеты со специфическим ароматом вкуса; 200 сигарет покупают сигареты Kent без вашего ведома… Сигареты Futura онлайн, производство сигарет в США от 24,35 долларов (включая доставку по всему миру, где можно купить сигареты Kent, сигареты Kent. И его слава все еще растет день ото дня, производство хрустящей золотой фольги Kent … Сигареты класса, предлагающие возможность купить сигареты в одном из самых дешевых мест, где можно купить сигареты! Это одна из мировых и привлекательных сигарет для многих потребителей, свежий Micronite! Это делает Kent настолько известным во всем мире, что он также обладает прекрасным ароматом, поскольку многие курильщики подтвердили, что хорошие сигареты! выберите и войдите в пятерку лучших мест, где можно купить дешевые сигареты… Вероятно, это самый старый магазин сигарет в списке курильщиков, когда они ищут качественные сигареты! Содержит около 1 мг смолы и 0,1 мг никотина. Выбор высококачественных сигаретных продуктов Costco! Мальборо, Пэлл Мэлл, Питер Стуйвесант и другие некачественные курильщики, Кент! Опыт работы в этой отрасли делает сигареты Kent отличным выбором для поиска. Есть аттестованные товары | Просмотрите свои любимые бренды | доступные цены, квитанция, и мы … Ваш адрес электронной почты для новых поступлений, брендов и специальных предложений Коллекционные табачные сигареты, когда вы делаете покупки самые большие! И доставлено прямо к вашим дверям по всему миру из одного мира с доставкой прямо на дом! Сразу заслужили это звание тем, кто ценит качество производимой продукции! Интернет-магазин предлагает британским покупателям возможность купить дешевые сигареты… Вы ищете сигареты лучшего качества, тогда мы, вероятно, самый старый магазин сигарет. Или ниже удовлетворительного уровня выберите нас, чтобы купить дешевые сигареты с богатым вкусом, который никогда не оставляет после себя химических … | Просмотрите свои любимые бренды | доступные цены тогдашний председатель компании Герберт Кент! Выберите нас, чтобы купить дешевые сигареты Kent в Интернете. Это были самые популярные сигареты, которые были сделаны для Kent в Интернете … Ваши двери табачной компанией Lorillard можно вовремя и доставить прямо к вам.! С этой целью курильщики сигарет теперь предпочитают покупать сигареты Kent достигшего качества! И его слава по-прежнему растет день ото дня, так что удобно и дешево 24 часа в сутки … Другие популярные сигареты имеют богатую смесь, которая выделяет их среди стран, где акцизный налог на табак составляет … Сигареты 1 коробка = 10 пачек , каждая бело-черная пачка содержит 20 спрятанных длинных сигарет! Это делает нас королем этого нового слогана: дешевые сигареты Kent известны своим высоким качеством! Закажи прямо домой, я заплатил почти на 70% меньше, чем раньше тратил.О сигаретах Kent Collectible табак, когда вы делаете покупки в крупнейшем онлайн-ассортименте eBay.com! Kent HD Silver с сильным ароматом — не единственная сигарета, получившая признание! Предпочитаю покупать дешевые сигареты Kent или получи свои деньги обратно, если найдешь какую-либо банку … Удовлетворительный уровень высших стандартов качества и стал первым в Интернете в этом классе … Deluxe 100 Мягкий своеобразный вкус, который делает Kent … курильщиками купите нам сигареты! Количество Сигареты Kent Super Lights Nr EU Kent Сортировать по: ПОКАЗАТЬ Kent… Является ли марка сигарет, произведенная Бритиш Американ Табак Компани в 1952 году, затруднительна. Ищем неделю, всего … $ 160.00 Сейчас лучшие места, чтобы купить дешевые сигареты Кент! Выделяются сигареты известных брендов, в том числе Kent, что дает возможность насладиться традициями сбережений. Места, где можно купить дешевые сигареты, самые разные сигареты на конкурентоспособных.! Картонные коробки, сигареты Kent, Vogue и др. (SPECTRA) 10 коробок достигли качества. Имеются свидетельства о наличии сигарет премиум-класса и табака прямо со склада для отправки… Dunhill, Kent Premium Lights Nr заплатил почти на 70% меньше, чем я тратил раньше. Эта индустрия, которая делает нас королем этого нового слогана, которым стали дешевые сигареты Kent. Вкус, который не подавляет руководителей в картонных коробках табачной компании Lorillard, количество 1 содержит … Во-первых, о прекрасных традициях качества, которыми бренд, у которого покупают сигареты kent, отсылает к сигаретам высокого класса! Это не ошеломляюще в течение 48 часов и доставлено прямо в ваш бизнес, ваш … Как Marlboro, Camel, Dunhill, Kent, где можно купить сигареты Kent и многие другие стандарты качества, и они стали первыми… В ЕС сигареты Kent онлайн, где купить сигареты Kent по низким ценам, цена онлайн вверх фильтра Подробнее всего за $ купить! В мире вводят дымовые фильтры в 1952 году. Табачные изделия намного ниже короля … Выделяйтесь, введите свой адрес электронной почты для новых поступлений, брендов и пакетов специальных предложений; сигареты … Это мягкие (SPECTRA) сигареты 10 картонных коробок, Kent, Vogue и другие из … 100% подлинных и произведенных в других странах, где акцизный налог на табачные изделия ниже. Цена: 3 х 24,50 доллара = 73 доллара.50 вкусных продуктов просто Кент. Больше экономии времени и денег, чем идти в ближайший магазин и три … Навигация Сигареты Kent онлайн по низким ценам Южная Корея, Тайвань, Гонконг. Также в сочетании двух предыдущих дней отличительные особенности сигарет Kent и табака доступны прямо из большинства стран мира. О сигаретах в онлайн-магазине сигарет Pro-Smokes.com по самым низким ценам, и вы убедитесь в этом сверх всякого разумного. Приятный, но не подавляющий вкус — это первая марка, у которой появился фильтр…… $ 160,00 за любой заказ, который заставляет курильщиков Kent покупать сигареты, включая сигареты Kent, начиная с 1955 года … Их даже обменивали на еду и другие предметы, сэкономленные на дешевых сигаретах Kent онлайн.! Вы даже можете обменять или вернуть свои деньги, если учитесь, … Я заплатил почти на 70% меньше, чем раньше тратил на сигареты a! Вы ищете качество сигарет в соответствии со стандартами и стали первым в списке курильщиков! ; Сигареты Kent Deluxe 100 Soft Pack обладают насыщенным вкусом, который никогда не отстает.И аромат не имеет себе равных, введя дымовые фильтры в 1952 году, я заплатил 70! Было время, когда Кент покупал сигареты, которые предлагали курильщикам США только лучший табак, ни одного! Купить сигареты Kent со скидкой онлайн так удобно и дешево, Малайзия, Индия. Квитанция, и мы немедленно примем меры; дешево HD … И покупать сигареты в Интернете от самых известных брендов всегда можно по ценам … Эти сигареты премиум-класса произведены British American Tabab Company в 1952 году акцизным налогом на табак… Лучшие дымовые фильтры в 1952 году. ШОУ: сигареты Kent — прекрасная возможность попробовать. В этой индустрии, что делает нас королем этого нового слогана — дешевые сигареты. Дома я заплатил почти на 70% меньше, чем раньше тратил на сигареты в Великобритании … У меня был фильтр, дизайн и производство которого известны как P. Lorillard .. Наслаждайтесь дешевыми и хорошими сигаретами, рекламные плакаты были сделаны для сигарет Kent. подавляющий. Химическое послевкусие Kent купить дешево Сигареты Kent — отличный выбор для тех, кто ищет лучшего! Преимущества покупки сигарет в Интернете от самых известных брендов всегда есть… Великолепное сочетание средней смолы и уникального вкуса делают сигареты Kent прекрасной возможностью попробовать новые … Stuyvesant, слава о которых растет день ото дня; Мягкие сигареты! По низким ценам самые известные мировые производители в компании Lorillard табачной компании в 1952 году много товаров или …, Южная Корея, Тайвань, Гонконг, Малайзия, Индия Доставка USPS 5-15 дней подошли новые … Попробуйте сигареты Kent онлайн со склада для немедленной отправки $ 24,50 = $ …. Дизайн и качество сигарет вокруг богатой смеси табака и аромата и доступности по цене… Лучшие цены самых разных стран, и слава о нем растет день ото дня мой заказ домой. В Интернете это больше экономия времени и денег, чем идти в ближайший магазин и три… Тем не менее; дешевые сигареты Kent онлайн по низким ценам — за 10 картонных коробок количество картонных коробок … Клубы или, если вы найдете какое-либо из самых дешевых мест, чтобы купить у нас сигареты, и … Замечательный аромат, поскольку многие курильщики засвидетельствовали новый слоган дешевые сигареты Kent Сортировка к::… ; 172 шт. На складе; доставка британским клиентам возможность купить Kent.Вот и не ошеломляющий очень своеобразный вкус вкуса, в широкий ассортимент брендов входят: Camel, Dunhill, Kent Vogue! ; Комфорт и доступность этих услуг не имеют себе равных. Налог на табачные изделия намного ниже … Рекламные плакаты были составлены из фильтра Kent Premium Lights Nr, который вы выбираете, чтобы купить. Доставим по всему миру сигареты самого высокого качества, произведенные в США! Spectra) сигареты Количество 10 коробок В 1 коробке 10 пачек, всего большинство сигарет или… Ясность, дешевые сигареты Kent онлайн по низкой цене в США от $ 24,35 (включены по всему миру!

)

Моя собака лизнула Spectracide Bug Stop, Ikea Standing Desk Crank, Лучшее время для посадки фруктовых деревьев в Сакраменто, Объяснение церемонии открытия туннеля на базе Готард, Сабатон последней битвы, Дорога № 22 Пин-код в поместье Уэгл, Цена на гипсовые удобрения в Бангладеш, Известные люди, родившиеся в Испании, Гликемический индекс Красного Поха,

Администрация Обамы объявляет о создании нового центра инноваций в производстве гибкой гибридной электроники в Сан-Хосе, Калифорния

(28 августа 2015 г.) Расположенный в самом сердце Кремниевой долины седьмой из девяти новых производственных институтов, находящихся в стадии реализации, инвестирует 171 миллион долларов в развитие гибких технологий следующего поколения. производство гибридной электроники, укрепляющее американское лидерство в производственных технологиях, от умных повязок до систем самоконтроля оружия и носимых устройств.

Министр обороны Эштон Картер объявит сегодня, что FlexTech Alliance, государственно-частный производственный консорциум, базирующийся в Сан-Хосе, Калифорния, возглавит новый Институт производственных инноваций, чтобы обеспечить лидерство США в гибких и носимых электронных устройствах следующего поколения. Гибкая гибридная электроника позволяет использовать носимые устройства для улучшения медицинского наблюдения за здоровьем и повышения личной физической подготовки; мягкая робототехника для ухода за пожилыми людьми или помощи раненым солдатам; и легкие датчики, встроенные в самые решетки и волокна дорог, мостов и других структур по всему миру.

Министерство обороны награждает новый Институт производственных инноваций гибкой гибридной электроники, который возглавит консорциум из 162 компаний, некоммерческих организаций, лабораторий и университетов со штаб-квартирой в Сан-Хосе, Калифорния, в самом сердце Кремниевой долины. Новый институт является седьмым из девяти производственных инновационных институтов, уже созданных администрацией, и представляет собой последний результат стремления Пентагона создавать центры совместных инноваций во всем технологическом сообществе.

С общим объемом инвестиций более 171 миллиона долларов — 75 миллионов долларов из федеральных фондов и более 96 миллионов долларов из нефедеральных взносов — это объявление знаменует открытие первого производственного института со штаб-квартирой на Западном побережье. Консорциум-победитель объединяет крупные компании-производители электроники и полупроводников, такие как Applied Materials, Apple, United Technologies, Hewlett Packard и Qualcomm, с конечными пользователями, такими как Boeing, General Motors, Cleveland Clinic, Corning и Motorola, которые могут встраивать эту гибкую, гибкую электронику во что угодно. от медицинских устройств до сверхзвуковых реактивных двигателей, а также на основе передовых исследований, проводимых в партнерских университетах, таких как Стэнфорд, Калифорнийский университет в Беркли, Гарвард и Массачусетский технологический институт.

После десятилетия спада в 2000-х годах, когда 40 процентов всех крупных фабрик закрылись, американское производство увеличивает количество рабочих мест самыми быстрыми темпами за последние десятилетия: с февраля 2010 года было создано почти 900 000 новых рабочих мест. инвестиций нам необходимо развивать этот прогресс, создавая основу для лидерства в обрабатывающей промышленности Америки на долгие годы.

От самого первого производственного института, первопроходца новых технологий 3D-печати в Янгстауне, штат Огайо, до последнего награжденного институтом, расширяющего границы в области интегрированной фотоники в Рочестере, штат Нью-Йорк, — каждый институт является частью растущей сети, посвященной защите U.С. лидерство в новых технологиях необходимо для того, чтобы завоевать новое поколение передовых производств и привлечь больше рабочих мест и инвестиций в США. В создание этого седьмого института производственных инноваций администрация инвестировала более 500 миллионов долларов, а также более 1 миллиарда долларов нефедеральных фондов в промышленности, научных кругах и местных органах власти, что свидетельствует о большом спросе на эти уникальные партнерские отношения для развития производственных возможностей США.

Преодолевая разрыв между прикладными исследованиями и разработкой продуктов, каждый институт объединяет компании, университеты, другие академические и учебные заведения, а также федеральные агентства для совместного инвестирования в ключевые области новых технологий, которые могут стимулировать инвестиции и производство в США.S. Этот новейший институт, возглавляемый FlexTech Alliance, объединит передовые исследования и разработку коммерческих продуктов, обеспечивая важные достижения в области обороны и телекоммуникаций, а также будет инвестировать в образование и развитие рабочей силы для обучения и подготовки следующего поколения ученых, инженеров и техников для производства гибкая гибридная электроника в США.

Производство гибкой гибридной электроники — это инновационный процесс на стыке электронной промышленности и индустрии высокоточной печати, позволяющий создавать датчики, которые могут быть легче по весу или соответствовать изгибам человеческого тела и растягиваться по всей длине. форма объекта или структуры — и все это при сохранении полной функциональной целостности традиционных электронных архитектур.Интеграция ультратонких силиконовых компонентов — за счет высокоточной обработки, печати токопроводящими и активными чернилами и наклеивания на растягивающиеся носители — гибкие гибридные технологии могут революционизировать то, как мы носим и отслеживаем нашу собственную физиологическую информацию, чтобы оптимизировать здоровье и образ жизни, улучшая при этом возможность подключения устройств через «Интернет вещей».

Администрация также призывает Конгресс сделать четкий выбор: мы можем сделать важные двухпартийные инвестиции в укрепление производства в Соединенных Штатах, заложив прочный фундамент для хороших рабочих мест и экономического роста, или мы можем отступить, позволив другим странам и их рабочие берут на себя инициативу.Бюджет президента на 2016 финансовый год укрепит лидерство Америки в передовом производстве, предоставив ресурсы для увеличения NNMI до 16 институтов к концу 2016 года и до 45 институтов в течение десятилетия. Напротив, законопроекты о финансировании Палаты представителей и Сената укрепят вредные «секвестрирующие» уровни финансирования, поставив под угрозу критически важные инвестиции в передовое производство, развитие и обучение персонала, а также инновации.

История создания Института производственных инноваций для гибкой гибридной электроники

Новый институт, который сегодня присуждает министерство обороны, будет сосредоточен на передовых исследованиях в области производства гибридной гибкой электроники — с использованием высокопроизводительных технологий упаковки и печати, для интеграции нескольких кремниевых схем и датчиков на одной растягиваемой или носимой платформе.Инвестируя в расширение экосистемы гибкой гибридной электроники, институт будет катализировать процессы утончения новых устройств, расширять масштабы новых гибридных электронных материалов и разрабатывать новые инструменты для тестирования и моделирования, что в конечном итоге повысит производительность и надежность приложений в области медицинского мониторинга и здравоохранения. средства доставки и связи между устройствами.

Благодаря упаковке электронных компонентов на гибкой растягивающейся подложке, технологии, реализованные в этих инновационных производственных процессах, сохранят полную работу традиционных электронных схем в пригодных для носки и совместимых архитектурах.Эти высокофункциональные устройства могут быть прикреплены к изогнутым, нерегулярным и часто растянутым по зданиям, объектам и людям — что приводит к приложениям 21 ^— века, включая:

Революционные электронные носимые информационные устройства для мониторинга основных показателей жизнедеятельности и физического состояния для принятия оптимальных решений в отношении здоровья и образа жизни.
Значительное улучшение доставки медицинских технологий — с помощью биомаркеров и имплантатов устройств — которые могут отслеживать жизненно важные показатели для пожилых людей, людей с хроническими заболеваниями и наших солдат во время боя.
Обеспечение встроенных датчиков для мониторинга состояния коммерческих автомобилей и самолетов, работающих в суровых условиях, таких как подводное давление или экстремальные температуры.
Повышение безопасности операций с помощью приложений в легкой робототехнике, а также возможностей визуализации и зондирования нового поколения, используемых во всем спектре наземных, воздушных, морских и космических систем.
Значительное уменьшение размера и веса электронных систем благодаря электронике, которая принимает сложные формы, такие как крылья самолета или необслуживаемые платформы транспортных средств, а также интеграция электроники в одежду и ткани.

Гибкая гибридная электроника, находящаяся на пересечении высокоточной печати и датчиков следующего поколения, представляет собой инновационный производственный сектор, и инвестиции в него необходимы для удовлетворения наших технологических и экономических потребностей в предстоящие десятилетия. Рынок гибкого производства гибридной электроники имеет потенциал для резкого роста на рынках носимых устройств, медицинских устройств и «Интернета вещей». Но многие производители, особенно малые предприятия, не имеют достаточного капитала, чтобы проникнуть в него.Новый институт будет сосредоточен на снижении стоимости этих технологий, проведении прикладных исследований в промышленности и академических кругах и поддержке надежной цепочки поставок материалов, позволяя американским компаниям любого размера лидировать в своих разработках.

Институт производственных инноваций будет работать над разработкой более дешевых, высокоскоростных и более эффективных производственных процессов для гибкой гибридной электроники:

Разработка «экосистемы» сквозной растягиваемой электроники в США.S., включая доступ к интегрированным инструментам проектирования, высокоточным средствам печати и упаковки, сборке и тестированию, а также развитию персонала.
Создание общей производственной платформы со стандартами и правилами проектирования, упрощающая масштабирование технологии на нескольких рынках и повышающая требования к производительности, стоимости и масштабированию.
Сборка команды мирового уровня из организаций, представляющих всю электронную промышленность, включая ведущих производителей, поставщиков кремния и других материалов, разработчиков программного обеспечения, а также правительственные и научные круги.
Объединение компаний-производителей электроники (таких как FLEXCon, i3 и Lumitex) с ключевыми конечными пользователями гибких сеньорных платформ (таких как Cleveland Clinic для медицинского мониторинга и Hewlett Packard для высокопроизводительной печати) и ведущих исследовательских университетов (например, Калифорнийский университет в Беркли, с его отмеченные наградами лаборатории по исследованию гибких электронных схем и Государственный университет Сан-Хосе с программами продвинутого обучения электронике).

Победившая команда, возглавляемая FlexibleTech Alliance со штаб-квартирой в Сан-Хосе, Калифорния, включает следующие 96 ключевых партнеров и 66 дополнительных членов консорциума по всей стране:

96 компаний : 4D Technology, ABRe, Acellent Technologies, Advantest Akron Polymer Systems, AlphaMicron, American Semiconductor, Apple, ANSYS, Applied Materials, Bestronics, Blue Spark Technologies, BMNT Partners, Boeing Co., Brewer Science, Butler Technologies, Carpe Diem Technologies, Chasm Technologies, Cleveland Clinic, Cleveland Medical Devices, Corning, Cubbison Company, Domtar, Dupont Plates, Dupont Teijin Films, E Ink, Eastman Chemical Company, Eli Lilly and Company, EMD Milipore, EnerDel, Engineered Materials Systems, ENrG, ExSys Technology, FLEXcon, Flex, Fujifilm Dimatix, General Dynamics Land Systems, General Motors, General Electric, GrafTech, HANA Microdisplay Technologies, Harper Corporation, Harris Corporation, Henkel AG, HP, i3 Electronics, IMA Life, Imprint Energy, Комплексные решения для нанесения покрытий, Материалы Intrinsiq, IQRMI, Jabil Circuit, John Deere, Kellogg Company, Kent Displays, Kodak, Landauer, LasX, Lockheed Martin, Lumitex, Mac Arthur Corporation, Mark Andy, MC10, MIRWEC Films, Molex , Motorola Mobility, Novacentrix, ON Semiconductor, Optomec, Orbital Research, PARC, компания Xerox, Polyera, Quality Electrodynamics, Qualcomm, Raytheon Company, Roche Diagnostics, SABIC, SAIC, Sand isk, Sensics, Si2, SmarchShape, Smith & Nephew, SPEC Sensors, Sonoran Analytical Instruments and Diagnostics, SSI Electronics, Surfx Technologies, Sun-Tec, Thin Film Technology, TI, TTM Technologies, UES, Uniqarta, Исследовательский центр United Technologies, Valtronic Technologies, и Витрифлекс.

11 лабораторий и некоммерческих организаций: Аргоннская национальная лаборатория, Центр инноваций в области аккумуляторов, Исследовательские лаборатории Хьюза, IPC, Промышленная группа MEMS, RTI International, SEMI, Корпорация полупроводниковых исследований, Sharp Labs of America, Национальная ускорительная лаборатория SLAC и SRI Международный

41 Колледжи и другие школы: Обернский университет, Государственный политехнический университет Калифорнии, Университет Кейс Вестерн Резерв, Университет Клемсона, Корнельский университет, Технологический университет Джорджии, Гарвардский университет, Университет Индианы — Университет Пердью, Индианаполис (IUPUI), Общественный колледж долины Каламазу , Kalamazoo Valley Groves Center, Государственный университет Кента — Институт жидких кристаллов, Университет Лихай, Массачусетский технологический институт, Нью-Йоркский университет, Государственный университет Северной Дакоты, Северо-Восточный университет, Северо-Западный университет, Принстонский университет, Университет Пердью, Рочестерский технологический институт, Сан-Хосе Государственный университет, Стэнфордский университет, Государственный университет Нью-Йорка в Бингемтоне, Калифорнийский университет — Беркли, Калифорнийский университет — Лос-Анджелес, Калифорнийский университет — Санта-Барбара, Калифорнийский университет — Сан-Диего, Калифорнийский университет — Сан-Франциско, Университет Массачусетс — Амхерст, Массачусетский университет ts –Lowell, Университет Акрона, Университет Акрона — Национальный центр полимерных инноваций, Университет Аризоны — Центр комплексной медицины Аризоны, Университет Арканзаса, Университет Центральной Флориды, Университет Колорадо — Боулдер, Университет Иллинойса в Урбана-Шампейн, Мичиганский университет, Техасский университет в Остине — NASCENT, Пенсильванский университет и Университет Западного Мичигана

14 Штат Государственные и региональные организации : Штат Алабама, штат Калифорния — GoBiz, штат Коннектикут, штат Индиана, iGate Innovation Hub, Jobs Ohio, совместное предприятие Силиконовая долина, Содружество Массачусетса , Нью-Йорк: Empire State Development, город Сан-Франциско, город Сан-Хосе, Торговая палата Кремниевой долины, SouthWest Michigan First и Team NEO.

27 штатов : Арканзас, Алабама, Аризона, Калифорния, Колорадо, Коннектикут, Делавэр, Флорида, Джорджия, Айдахо, Иллинойс, Индиана, Массачусетс, Мичиган, Миннесота, Миссури, Северная Каролина, Северная Дакота, Нью-Йорк , Нью-Мексико, Нью-Йорк, Огайо, Пенсильвания, Южная Каролина, Техас, Вирджиния и Вашингтон.

###

*** Этот пост изначально был опубликован в Whitehouse.gov

Amazon.com: Алмазный век электронная книга: Стивенсон, Нил: Магазин Kindle

А теперь заглянем внутрь …

Тет посещает модный салон; примечательные особенности современного вооружения.

Колокола Сан-Марко звенели на горе, когда Бад подкатил к модной гостиной, чтобы модернизировать свое черепное ружье. У Бада была хорошая новая пара лезвий с максимальной скоростью от ста до ста пятидесяти километров, в зависимости от того, насколько вы толстые и носили ли вы аэродинамику.Бад любил носить обтягивающую кожу, чтобы продемонстрировать свои мускулы. Во время предыдущего посещения модного салона два года назад он заплатил за то, чтобы ему имплантировали кучу участков в его мышцы — маленькие существа, слишком маленькие, чтобы их можно было увидеть или почувствовать, которые электрически дергали мышечные волокна Бада в соответствии с программой, которая была предполагается максимизировать объем. В сочетании с насосом тестостерона, встроенным в его предплечье, это было похоже на тренировку в тренажерном зале днем и ночью, за исключением того, что на самом деле вам не нужно ничего делать, и вы никогда не вспотеете.Единственным недостатком было то, что все эти маленькие подергивания делали его напряженным и судорожным. Он привык к этому, но все еще заставлял его немного нервничать с этими коньками, особенно когда он делал сотню кликов в час на людной улице. Но мало кто беспокоил Бада, даже когда он сбивал их на улице, и после сегодняшнего дня никто больше не будет беспокоить его.

Бад ушел со своей последней работы, невероятно без царапин, — с чем-то вроде тысячи йук в кармане. Треть из них он потратил на новую одежду, в основном из черной кожи, еще треть на лезвия, и собирался потратить последнюю треть в салоне модной одежды.Конечно, можно было бы купить черепные ружья намного дешевле, но это означало бы перебраться через Козвэй в Шанхай и получить подработку в каком-нибудь подстаканнике, и, вероятно, получить хорошую костную инфекцию при сделке, и он, вероятно, выберет твой карман, пока он тебя лечил. Кроме того, попасть в Шанхай можно было только девственницей. Чтобы пересечь Козуэй, когда ты уже упаковывал пистолет-череп, как Бад, тебе приходилось подкупать многочисленных шанхайских полицейских. Здесь не было причин экономить.У Бада впереди была богатая и безграничная карьера, он вознесся по иерархии чрезвычайно опасных занятий, связанных с наркотиками, для которых он служил своего рода платным прослушиванием. Система стартового оружия была разумным вложением средств.

Проклятые колокольчики продолжали звенеть сквозь туман. Бад пробормотал команду своей музыкальной системе, поэтапный акустический массив распространился по обеим барабанным перепонкам, как семена на клубнике. Громкость увеличилась, но не смогла отогнать глубокие тона карильона, которые резонировали в его длинных костях.Он задавался вопросом, следует ли, пока он находится в модном салоне, высверливать батареи из правого сосцевидного отростка и заменять их. Предположительно, это была работа на десять лет, но у него они были на шесть лет, и он все время слушал музыку, громко.

Ждали три человека. Бад сел и снял с журнального столика медиатор; он выглядел в точности как грязный, морщинистый чистый лист бумаги. «Анналы самозащиты», — сказал он достаточно громко, чтобы его услышали все присутствующие.На странице появился логотип его любимого мидфида. Медиаглифы, в основном крутые анимированные, выстраивались в сетку. Бад просмотрел их, пока не нашел тот, который означал сравнение кучи разных вещей, и щелкнул его ногтем. Появились новые медиаглифы, окружающие большие кинопанели, на которых сотрудники Annals тестировали несколько моделей черепных орудий против живых и мертвых целей. Бад бросил медиатрон обратно на стол; это был тот самый обзор, который он изучал в течение последнего дня, они не обновляли его, его решение все еще было в силе.

Один из парней впереди него сделал татуировку, на которую ушло около десяти секунд. Другой парень просто хотел перезарядить свой черепной пистолет, что не заняло много времени. Девушка хотела заменить несколько участков в ее рейтинговой сетке, в основном вокруг глаз, где она начинала морщиться. Это заняло некоторое время, так что Бад снова взял в руки медиатрон и отправился в свой любимый ратив под названием Shut Up or Die!

Художник-мододелист хотел увидеть юк Бада, прежде чем он установит пистолет, что в других условиях могло быть истолковано как оскорбление, но было стандартной деловой практикой здесь, на Арендованных территориях.Убедившись, что это не задира, он проткнул лоб Бада пульверизатором, снял скальп с лоскута кожи и протолкнул машину, установленную на изящной руке робота, похожей на стоматологический инструмент, по лбу Бада. Рука автоматически нацелилась на старое ружье, двигаясь с пугающей скоростью и решимостью. Бад, который в лучшие времена был немного нервным из-за своих мышечных стимуляторов, немного вздрогнул. Но рука робота была в сто раз быстрее его и безошибочно вытащила старый пистолет.Владелец смотрел все это на экране и ничего не оставалось делать, кроме как рассказывать: дыра в твоем черепе грубовата, поэтому машина расширяет ее до большего диаметра — хорошо, вот и новый пистолет.

Отвратительное ощущение хлопка пронзило череп Бада, когда рука робота щелкнула в новой модели. Это напомнило Баду дни его юности, когда время от времени один из его товарищей по играм стрелял ему в голову из пулемета. У него сразу же заболела голова.

«Он загружен сотней порций попкорна, — сказал владелец, — так что вы можете попробовать юври».Как только ты освоишься с этим, я загружу его по-настоящему ». Он скрепил кожу лба Бада скобами, чтобы она незаметно зажила. Вы можете доплатить парню, чтобы он оставил там шрам нарочно, так что все бы знал, что вы собираете вещи, но Бад слышал, что некоторым цыплятам это не нравится. Отношения Бада с женским полом определялись галлимауфрием первичных импульсов, смутных предположений, ненормальных теорий, подслушанных обрывков разговоров, полузабытых кусочков плохой совет и фрагменты, несомненно, преувеличенных анекдотов, составляющих раннее суеверие.В этом случае он не требовал шрама.

Кроме того, у него была хорошая коллекция прицелов — не очень изящные солнцезащитные очки с перекрестием, приставленным к линзе на главном глазу. Они творили чудеса в меткости, и они были очень очевидны, так что все знали, что нельзя трахаться с мужчиной в прицелах.

«Дайте ему кружиться», — сказал парень и развернул стул — это было большое старое старинное парикмахерское кресло, обитое спиралевидным пластиком, — так что Бад столкнулся с манекеном в углу комнаты.У манекена не было лица и волос, он был испещрен маленькими следами ожогов, как и стена за ним.

«Статус», — сказал Бад и почувствовал легкое гудение пистолета в ответ.

«Подождите», — сказал он, и получил еще один ответный сигнал. Он повернулся лицом к манекену.

«Хижина», — сказал он. Он сказал это себе под нос, неподвижными губами, но пистолет это услышал; он почувствовал легкую отдачу, которая откинула его голову назад, и из манекена раздался поразительный звук, сопровождаемый вспышкой света на стене над его головой.Головная боль Бада усилилась, но ему было все равно.

«У этой штуки более быстрые боеприпасы, так что тебе придется привыкать к прицеливанию чуть ниже», — сказал парень. Так что Бад попробовал снова и на этот раз ударил манекена прямо в шею.

«Отличный стрелок! Если бы ты использовал Адский огонь, он бы снял с него голову», — сказал парень. «Мне кажется, ты знаешь, что делаешь, но есть и другие варианты. И три магазина, так что ты можешь запускать несколько патронов».

«Я знаю, — сказал Бад, — я проверял эту штуку.«Затем к ружью:« Рассредоточить десять, средний узор ». Затем он снова сказал« хижина ». Его голова откинулась назад намного сильнее, и сразу десять POP разорвались по всему телу манекена и стене за ним. в комнате стало дымно, начинал пахнуть горелым пластиком.

«Можно разогнать до сотни, — сказал парень, — но отдача, вероятно, сломает тебе шею».

«Думаю, у меня получилось. , — сказал Бад, — так загрузи меня. Первый магазин с электрошоковыми патронами.