Лучший Табак Fusion | SmokeJeen
Фильтры товаров
Бренд
По этим критериям поиска ничего не найдено
Вес
По этим критериям поиска ничего не найдено
Дымность
По этим критериям поиска ничего не найдено
Жаростойкость
По этим критериям поиска ничего не найдено
Крепость
По этим критериям поиска ничего не найдено
Наличие на складе
По этим критериям поиска ничего не найдено
Страна производства
По этим критериям поиска ничего не найдено
Табак Fusion — Фьюжен
Выберите категорию
Все КРУПНЫЙ ОПТ » Adalya »» Adalya 1200 затяжек (аналог) »» Adalya 400 затяжек (аналог) » AIR BAR MAX 2000 ( в коробке 30 блоков по 10 шт) » Bang 2000 затяжек » BANGER 1200 » Bocree 800 » Bazooka »» Bazooka 400 ( в коробке 40 блоков по 10 шт) »» Bazooka 2000 ( в коробке 36 блоков по 10 шт) » Brusko 800 » City »» СИТИ 1600 оригинал ( в коробке 40 блоков по 9 шт) »» СИТИ 1600 копия ( в коробке 40 блоков по 9 шт) »» City Rocket 3000+ » Dark Side 1200 » DOK BEST 1600 ( в коробке 60 блоков по 6 шт) » Doo 300 » ELF BAR »» ELF BAR 800 ( в коробке 50 блоков по 10 шт) »» ELF BAR 1500 ( в коробке 50 блоков по 10 шт) »» ELF BAR 1800 оригинал »» ELF BAR 1500 оригинал »» ELF BAR 800 оригинал » Fizzy 1600 ( в коробке 30 блоков по 10 шт) » FUMARI »» FUMARI 800 ( в коробке 40 блоков по 10 шт) »» FUMARI 1200 ( в коробке 40 блоков по 10 шт) » GUN PODS 2000 » Gippro »» Gippro 1600 »» Gippro 800 »» Gippro 2500 » Glamee Ace 450 » Glow 1500 » Haka Switch 2in1 2200 » hi5 »» 2in1 2000 »» Hi5 Pro »» Lite 400 »» lumia 1500 » HIBORO 1000 ( в коробке 50 блоков по 10 шт) » HQD »» HQD 300 (в коробке 20 блоков по 30 шт) »» HQD 600 ( в коробке 69 блоков по 10 шт) »» HQD 1200 ( в коробке 60 блоков по 6 шт) »» HQD 1800 ( в коробке 50 блоков по 10 шт)№ Вкусы 1 Лесные ягоды 2 Пина колада 3 Манго дыня 4 Клубнич »» HQD 2000 ( в коробке 60 блоков по 6 шт) »» HQD 2500 ( в коробке 50 блоков по 10 шт)№ Вкусы 1 Черника малина 2 Ледяное манго 3 Черника 4 Черная »» HQD 4000 ( в коробке 90 блоков по 5 шт) »» HQD 1000 ( в коробке 50 блоков по 10 шт) » Izi »» ИЗИ 1600(20) ( в коробке 80 блоков по 5 шт) »» ИЗИ 1800 ( в коробке 50 блоков по 9 шт) » Joyetech VAAL 5000 » Juicee 1500 ( в коробке 33 блоков по 10 шт) » LIO 3500 » LNBI с фильтром » Maskking »» MASKKING 1000 ( в коробке 48 блоков по 10 шт) »» Maskking 1500 ( в коробке 40 блоков по 10 шт) » MK Bar 1500 » MGO »» MGO 1800 »» MGO 500 » MIKING 800 (в коробке 40 блоков по 10 шт) » Puff »» PUFF 800 ( в коробке 40 блоков по 10 шт) »» PUFF 1600 ( в коробке 40 блоков по 10 шт) » Savinelli 1000 » SIGA »» Siga 1500 затяжек оригинал »» SIGA 800 затяжек оригинал » Serbetli 800 » Tiko »» Tiko 1000 »» Tiko 1500 » Tik Tok »» Tik Tok с подсветкой 1000 затяжек »» Tik Tok 1000 затяжек » Unb »» Unb 1000 »» Unb 2600 с подсветкой и зарядкой » ZOZO BAR 4500 затяжек » ДЫМ 1800 ( в коробке 50 блоков по 10 шт) » РОССИЯ и СССР 800 ( в коробке 40 блоков по 10 шт) Маски Кальяны » Sky Seven » Amy Deluxe » MamooN » Magix » Pharaon » Sherif » Sahara » Mr. Wood » Alpha Hookan »» Alpha Hookan » Artist »» Artist » Bodo »» Bodo » Chosen »» Chosen » Conceptic »» Conceptic » Craft »» Craft » Don »» Don » DSH »» DSH » ESS »» ESS » First »» First » Fox »» Fox » Geometry Hookah »» Geometry Hookah » Hoob »» Hoob » Japona »» Japona » Jetpack »» Jetpack » Karma »» Karma » Koress »» Koress » Let’s Smoke »» Let’s Smoke » Make Hookan »» Make Hookan » Maklaud »» Maklaud » BJORN PRO 1500 — ОСВЕЖАЮЩАЯ МЯТА » Mexanika smoke »» Mexanika smoke » ML Clan »» ML Clan » Nanosmoke »» Nanosmoke » Nepizduk »» Nepizduk » Nube Unique »» Nube Unique » Orden »» Orden » OSH »» OSH » Panda »» Panda » Pandora » Pizduk Hookan »» Pizduk Hookan » Shi_Carver »» Shi_Carver » Soft Smoke »» Soft Smoke » Tortuga »» Tortuga » Union »» Union » Voodoo Smoke »» Voodoo Smoke » Adalya — swiss bonbon 50 гр акциз » Werkbund »» Werkbund » Пушка »» Пушка Табак » ADALYA »» Adalya 1 кг »» Adalya аналог 50g »» Adalya оригинал 50g »» Adalya black 50g »» Adalya 250 гр »» Adalya 50 gr. акцизный » AL FAKHER »» Al Fakher 50g »» Al Fakher акциз 50g »» Al Fakher акциз 250g »» Al Fakher 1 кг » Al Saha 50g » American Blend 40 гр табак для самокрутки » Alsur 50g » Afzal 50g » Apollo »» Apollo 200гр »» Apollo 30гр »» Apollo 100гр » Aqua Mentha 50g » Argelini 50 gr » ASD »» ASD 50g »» ASD 50g без никотина » B3 50g » Banger 100 гр » BACCAR 50g акциз » Balli 50g » Brusko »» Brusko 50 гр »» Brusko 250гр »» BRUSKO BIT 20гр » Blue Horse 50g » Burn »» Black Burn 25g »» Black Burn 100g »» Burn 200g »» Black Burn 200g »» Burn 100g » Buta 50g » Costa »» Costa 50 gr. акцизный » Chabacco »» Chabacco 200 гр »» chabacco mix 50 гр »» Сhabacco 50 гр » Dark Side »» Darkside SHOT 30g »» DarkSide 250g »» Dark Side Hot 120g. »» DarkSide 100g » Daily Hookah »» Daily Hookah 40g »»» Daily Hookan 60g »»» Daily Hookah 250g акциз » Daim 100g » Duft »» Duft 100g »» Duft 100 gr акциз »» Duft 200 gr (акциз) »» Duft 250 gr (акциз) »» Duft 25 gr (акциз) » Dozaj 50g » Droplet 50g »» Droplet 50g акциз » Element »» Element 200g вода »» Element 100g Земля »» Element 200g воздух »» Element 200g земля » Eleon 40 гр акциз » Endorphin »» Endorphin 60 гр »» Endorphin 125 гр » Enigma акциз 100g » Fasil 50g » Five Stars 50g » Flame 100g » Fumari 100g » Fusion 100g » Genel »» Genel 100 гр »»» Hard »»» Medium »»» Soft »» Genel 25 гр » Gixom 50g » Grey Rock 100g » Hook (крепкий) 50g акциз »» Hook (легкий) 50g акциз » Inferno 200g акциз » Jam 50 гр » JiBiar 100g » Just Original 40g акциз »» Just Original 100g акциз » Just Smoke 100g » LIЯRA 50g » Luna 50g » Malaki 1 кг »» Malaki акциз 50g » Mars 50g » MILANO »» MILANO 100gr »» MILANO 25gr »» MILANO 50gr » Must Have »» Must have 25g »» Must have 250g »» Must have 125g » Nаш »» Nаш 100 гр »» Nаш 40 гр » Nakhla 1 кг »» Nakhla 50g » Neon copy 50g » Nirvana 100g » Nofar 50g » Olympus 50gr » Orion 50g » Panther 100g » Pelikan 50g » Rich 125g » Serbetli 1 кг »» Serbetli (premium) 50g »» Serbetli аналог 50g » Seven 7 акциз 40g » Smyrna 50g » Space Smoke 100g паста для кальяна »» Space Smoke 30g » Spectrum 100g » Spectrum 250 gr » Starbuzz 250g » Tangiers 250g »» Tangiers 250gr акциз » Twist 50g » Venom »» VENOM 40гр (mix) »» VENOM 25 гр ( HARD) »» VENOM 25 гр ( MEDIUM) » VS — Versus 60g »» VS — Versus 100g » Walter Raleigh » WILD 50 грамм »» Wild 50 gr. акцизный » White angel 50g » Дымок 125g » Себеро »» Себеро 100g. » Северный »» Северный 100g »» Северный 25 гр акциз »» северный 100 гр акциз »» Северный 250gr » ИКС 50гр Аксессуары » Чаши для кальяна »» чаши облако » Калауд для кальяна » Щипцы для кальяна » Плитка для розжига угля » Уплотнители для кальяна » Ершики для чистки кальяна » Корзина для угля » Фольга для кальяна » Мундштуки для кальяна » Охладители дыма » Защитный колпак » Держатель для шланга » Дыроколы для фольги » Подсветка для колбы » Гриндеры » DARK SIDE аксессуары » Трубки »» Трубки »» Трубка деревянная Уголь для кальяна » Black and White » Уголь Crown Комплектующие » Раскуриватель для кальянов » Колбы »» Капля »» капля мини »» крафт »» крафт мини »» медуза »» Эллипс »» волна »» Ёлка » Бонг Распродажа » Распродажа Электронные сигареты » Adalya »» Adalya 1200 затяжек »» Adalya 400 затяжек » Air Bar 2000 затяжек » Банг »» Банг 2000 затяжек 2% » Banger 1200 затяжек » Bazooka »» Bazooka 400 затяжек »» Bazooka 2000 затяжек » Brusko »» Brusko (800 затяжек) » Bocree » City »» City 1600 затяжек »» City Rocket 3000+ затяжек »» City 1600 затяжек оригинал » Dark Side 1200 затяжек » DOK BEST »» DOK BEST 1600 затяжек » DOO »» DOO 300 затяжек » Elf »» ELF BAR 1500 затяжек »» Elf Bar 800 затяжек » PUFF »» PUFF GLOW 300 затяжек »» PUFF PLUS 800 затяжек »» PUFF MAX 2000 затяжек »» PUFF XXL 1600 затяжек » Fizzy 1600 затяжек » Fumari »» Fumari 800 затяжек »» Fumari 1200 затяжек » Juicee — 1500 затяжек » Gun 2000 затяжек оригинал » Gippro »» Gippro 800 затяжек »» Gippro 1600 затяжек » GlAMEE ACE 450 затяжек » Glow 1500 затяжек » Lio 3500 затяжек » MASKKING »» MASKKING PRO 1000 затяжек »» Maskking high pro max 1500 затяжек »» Maskking GT 500 затяжек »» Maskking 1000 затяжек с подсветкой » MK Bar 1500 » Miking »» Miking 1000 Затяжек »» Miking 800 Затяжек » MGO »» MGO 1800 »» MGO 500 затяжек » Haka Switch 2 in 1 2200 затяжек (Оригинал) » Hi 5 »» HI5 lumia 1500 затяжек »» HI5 Pro 1500 затяжек »» HI5 lite 400 затяжек »» HI5 2in1 2000 затяжек » Hiboro »» Hiboro 1000 затяжек оригинал » HQD »» HQD Rosy 400 затяжек »» HQD 300 затяжек »» HQD Cuvie Plus 1200 затяжек »» HQD King 2000 затяжек »» HQD Cuvie plus 1200 затяжек оригинал »» HQD King 2000 затяжек оригинал »» HQD Mega оригинал 1800 затяжек »» HQD Mega 1800 затяжек аналог »» HQD 600 затяжек »» HQD 2500 затяжек »» HQD Melo 1000 затяжек »» HQD Cuvie 300 затяжек оригинал »» HQD cuvie air 4000 затяжек »» HQD Melo 1000 затяжек оригинал » Savinelli »» Savinelli 1000 затяжек » Sherbet »» SHERBET 800 затяжек » Siga 1500 затяжек оригинал » Tiko »» Tiko 1000 затяжек »» Tiko 1500 затяжек » TIK TOK »» Tik Tok 1500 затяжек »» Tik Tok »» Tik Tok с подсветкой 1000 затяжек » Izi »» Izi 1200 затяжек »» Izi 1500 затяжек »» Izi 1600 затяжек »» Izi 1800 затяжек »» Izi Max 1600 затяжек оригинал »» Izi X3 1200 затяжек оригинал »» Izi XII 800 затяжек оригинал »» Izi xs 1000 затяжек оригинал » ZOZO BAR 4500 затяжек » Unb »» Unb 2600 затяжек с подсветкой и зарядкой »» Unb 1000 затяжек » Россия 800 затяжек » Дым Картриджи и Многоразовые устройства » Многоразовые POD-Системы »» Brusko Favostix POD »» GeekVape POD »»» GeekVape AEGIS »»» GeekVape Wenax C1 »»» GeekVape Wenax K1 »»» GeekVape Wenax Stylus »» Smoant Pod »» Vaporesso POD »»» Vaporesso BARR Kit »»» Vaporesso Degree Kit (2ml) »»» Vaporesso Osmall 350 mAh »»» Набор (2 Pods) Vaporesso Renova Zero Pod kit » Картриджи для POD-Систем »» Картриджи HQD 300 тяг »» Картриджи Brusko Favostix POD »» Картриджи Vaporesso »» Картриджи GeekVapе »» Картриджи Voopoo ЖИДКОСТИ » жидкость Alaska 30 ml » жидкость Asianto 30 ml » жидкость Atmose 30 ml » жидкость Beard 50mg 30 ml » жидкость Blaze 30 ml » жидкость BLVK 30 ml » жидкость brusko »» Brusko Salt крепость 20мг30мл »» Brusko Salt крепость 50мг30мл »» Brusko Salt 20 мг » жидкость Cactus Jack 30 ml » жидкость City 10ml » Жидкость Colibri 30мл » жидкость Crusher 30 ml » жидкость Fantasi 30 ml » жидкость Freshman 30 ml » жидкость Fruit Fighter 30 ml » жидкость Gizmo 30 ml » жидкость GLAS 30 ml » жидкость GOLD Salt 50 30 ml » жидкость Gusto 30 ml » жидкость Horny 60 ml » жидкость HQD 30 мл » Жидкость Husky 30 ml. » жидкость Jam 30 ml » жидкость John Legend 30 ml » жидкость Jumble 30 ml » жидкость JUUL Juuce Vape 30 ml » жидкость Malaysian Juice 30 ml » жидкость Maxvells »» жидкость Maxvells Hybrid 30 ml »» жидкость Maxwells 120 ml »» жидкость Maxwells salt 30мл » жидкость Naked 120 ml » жидкость Omega 30 ml » жидкость Pink 30 ml » жидкость PRIDE »» PRIDE TEA 30мл »» PRIDE Мишка 30мл »» PRIDE Морс 30мл »» PRIDE Морс Мороз 30мл » жидкость Salthic 30 ml » жидкость Sekret 30 ml » жидкость SMOKE KITCHEN WAVE 30ml » жидкость the Chillerz 30 ml » жидкость TRIX SALT 30ml » жидкость Ultra Cool 30 ml » жидкость Vaping Facts Salts 50 ml » жидкость Кухня Tommy 30 ml Сертификаты
Производитель
ВсеAdalyaAfzalAir BarAl FakherAlaskaAlphaAlpha HookanAmerican BlendAmy DeluxeApolloArgeliniArtistAsiantoAtmoseB3BaccarBangBangerBazookaBeardBlazeBLVKBocreeBodoBruskoBrusko Favostix PODBURNButaCactus JackChabaccoChosenCityColibriConcepticCOSTACraftCrusherDaily HookahDarksideDOK BESTDonDooDSHDuftelementEleonELF BAREndorphinEssFantasiFirst HookahFizzyFoxFreshmanFruit FighterFumariFusionGeekVapеGenelGeometry HookahGipproGizmoGLASGlowGOLDGrey RockGunGustoHI5HoobHookHornyHQDHuskyinfernoiziJamJaponaJetpackJohn LegendJuiceeJumbleJust OriginalJUUL Juuce VapeKarmaKhalil MamoonKoressLet’s SmokeLiaraLIOLIЯRALotusMagixMake HookanMaklaudMalaysian JuiceMASKKINGMaxwellsMexanika smokeMGOmikingMILANOMK BarML ClanMUST HAVENakedNakhlaNanosmokeNepizdukNirvanaNube UniqueNашOlympusOmegaOrdenOSHPandaPandoraPharaonPinkPizduk HookanPRIDEpuffPuff GlowSalthicSavinelliSekretSerbetliSeven StarShi_CarverSigaSky SevenSmoantSMOKE KITCHENSmyrnaSoft SmokeSpace smokeSpectrumStarbuzTangiersthe ChillerzTik TokTikoTortugaTRIXUltra CoolUnionVaping Facts SaltsVaping Facts Salts — Blue Baspberry 25 50 mlVaporessoVENOMVoodoo SmokeVoopooVSWalter RaleighWerkbundWILDZOZO BARволнадымёлкаИгра в КальмараИКСКальян Geometry HookahкаплякрафтКухня TommyмедузаоблакоПушкаРоссиясеверныйэллипс
Табак Fusion Soft по 100 г
Табак Fusion Soft по 100 г — купить оптом в МосквеВключите в вашем браузере JavaScript!
Способы оплаты для Физ. Лиц:
Внимание! Товар из данной категории нельзя оплатить онлайн, так как это табачная продукция. Заказы содержащие табачные изделия можно получить и оплатить только в нашем магазине по адресу: г. Москва, ул. Проспект мира, д. 73.
Способы оплаты для ИП и ООО:
Оплата только безналичным способом, методом перевода средств с Р/С вашей организации на основании выставленного счета от ИП Толстой С.Н.
Способы оплаты для Физ. Лиц:
Внимание! Товар из данной категории нельзя оплатить онлайн, так как это табачная продукция. Заказы содержащие табачные изделия можно получить и оплатить только в нашем магазине по адресу: г. Москва, ул. Проспект мира, д. 73.
Способы оплаты для ИП и ООО:
Оплата только безналичным способом, методом перевода средств с Р/С вашей организации на основании выставленного счета от ИП Толстой С.Н.
Дальше товар отсутсвующий на складе
Вам есть 18 лет?
Данный сайт является каталогом для совершеннолетних потребителей табачной продукции (граждан России старше 18 лет).
Сайт предоставляет информацию об основных потребительских свойствах и характеристиках табачной продукции и аксессуарах для курения (п.1 и п.2 ст.10 Закона «О защите прав Потребителя»). Дистанционная продажа табака и табачных изделий не осуществляется. Содержащаяся на сайте информация не является рекламой табака, табачной продукции и курительных принадлежностей. Лицам, не достигшим совершеннолетия, пользование Сайтом ЗАПРЕЩЕНО (ст. 20 ФЗ №15 «Об охране здоровья граждан..» и в соответствии с частью 7 статьи 15.1 Федерального закона от 27.07.2006 No 149-ФЗ «Об информации, информационных технологиях и защите информации»). Помните, курение вредит вашему здоровью!
Для дальнейшего просмотра сайта кальянного магазина, Вам необходимо подтвердить свое совершеннолетие.
Fusion Tobacco, 1490 Вт RINCON ST SUITEI CORONA CA 92880 USA CORONA CA 92880 US
Дата
14.09.2012
Имя грузоотправителя
Табачная фабрика Фейсала
Адрес отправителя
ZARKA FREE ZONE ТЕЛ: 0796632696 ZARKA AMMAN JORDAN
Имя получателя
Fusion Tobacco, Inc.
Адрес получателя
1490 Вт RINCON ST SUITEI CORONA CA 92880 США CORONA CA 92880 США
Имя участника уведомления
Эмад Абдаллах
Адрес для извещения
350 с.КЛЕНОВАЯ УЛИЦА, БЛОК H, ТЕЛ: 951.515.0945, ФАКС: 951.279.2451
Также уведомить имя стороны
Пэт Ханг
Также уведомить адрес стороны
5250 W. CENTURY BLVD # 501, ТЕЛ: 10.410.1400, ФАКС: 866.858.2029
Масса
24064
Весовая единица
кг
Масса, кг
24064,0
Кол-во
6195
Количественная единица
ПКГ
Мера
60
Единица измерения
CM
Пункт отправления
Иордания
Детали
24 064.0 кг
Из порта: Нинбо, Китай
В порт: Порт Лос-Анджелеса, Лос-Анджелес, Калифорния
Место получения
Акаба
Заграничный порт коносамента
Нинбо, Китай
Порт разгрузки США
Порт Лос-Анджелеса, Лос-Анджелес, Калифорния
Порт назначения в США
Порт Лос-Анджелеса, Лос-Анджелес, Калифорния
Товар
Пластиковые ведра, аксессуары, наклейки, ароматизаторы, табак, сырье, полиэтиленовые пакеты, пвх, барабаны, колотые камни, необработанный табак
Контейнер
EISU9137674
Название оператора связи
EVERGREEN LINE
Имя судна
КСИН ЛОС-АНДЖЕЛЕС
Номер рейса
0079E
Номер коносамента
EGLV591200006695
Код Ллойда
9307217
HTS коды
ХТС 2401.20
Экспрессия гемагглютинина-нейраминидазы и гибридных эпитопов вируса болезни Ньюкасла в трансгенном табаке
https://doi.org/10.1016/j.ejbt.2016.05.003Получить права и контент инфекционное заболевание, наносящее огромный экономический ущерб птицеводству. Трансгенные растения представляют собой экономичную систему для производства терапевтических белков и широко используются для производства вакцин для домашней птицы.В попытке разработать рекомбинантную вакцину был сконструирован бинарный вектор экспрессии растений pBI121, содержащий гены, кодирующие эпитопы гемагглютинин-нейраминидазы (HN) и Fusion (F) вируса болезни Ньюкасла (NDV) под контролем промотора CaMV35S и терминатора NOS. и введены в растение табака ( Nicotiana tabacum ) посредством трансформации, опосредованной Agrobacterium .Результаты
Предполагаемые трансгенные растения подвергали скринингу в селективной среде, содержащей 50 мг / л канамицина и 30 мг / л меропенема.Интеграция чужеродного гена в геном растения была подтверждена с помощью ПЦР. Экспрессию чужеродного гена анализировали на уровне транскрипции с помощью RT-PCR и на уровне трансляции с помощью дот-блоттинга и ELISA. Все анализы подтвердили экспрессию рекомбинантного белка.
Заключение
Развитие генной инженерии привело к созданию систем на основе растений для производства рекомбинантных вакцин. В этом исследовании табак использовали для экспрессии эпитопов F и HN NDV. Наши результаты показывают, что для производства рекомбинантной вакцины это новая стратегия использования конкатенированных эпитопов без их генетического слияния с более крупной структурой каркаса, такой как вирусный белок оболочки.
Ключевые слова
Agrobacterium tumefaciens
ELISA
Рекомбинантная вакцина
Трансгенные растения
Рекомендуемые статьи Цитирующие статьи (0)
© 2015 Pontificia Universidad Valparaísolica. Производство и хостинг Elsevier B.V.Все права защищены.
Рекомендуемые статьи
Цитирующие статьи
(PDF) Быстрая, временная экспрессия флуоресцентных слитых белков в растениях табака и создание стабильно трансформированных растений
ОЖИДАЕМЫЕ РЕЗУЛЬТАТЫ
Более 80% слитых конструкций FP, которые мы тестировали с использованием метод временной экспрессии показывает локализованное выражение
.Это быстрый метод тестирования новых конструкций слияния генов, и экспрессия длится от 2 до 5 дней после фильтрации
. В нашем случае слияния FP демонстрируют разную степень стабильности и, следовательно, продолжительность экспрессии зависит от исследуемой конструкции
. В общем, мы сверхэкспрессируем гибридный белок с использованием промотора CaMV 35s и используем эту систему для маркировки
исубклеточных органелл (Fig. 1a-f) или для получения информации о нацеливании на неизвестные белки.
Временная экспрессия позволяет оценивать движение белков по секреторному пути, поскольку время инфильтрации
известно, и впоследствии можно наблюдать кусочки листа через дискретные интервалы. Например, мы используем маркер тела Гольджи, что
представляет собой слияние трансмембранного домена ST и GFP (ST-GFP
22
). При введении при OD
600
0,1, ST-GFP
виден сначала в ER, но в конечном итоге только в теле Гольджи через 3–4 дня (рис.1а – г). В этом случае сверхэкспрессия возникает не только из-за конститутивного промотора
, но также из-за множественных вставок Т-ДНК в геном каждой клетки из-за большого числа бактерий —
. При использовании более низкого OD
600
, например 0,01–0,03, ST-GFP появляется только в теле Гольджи. Это представляет собой гораздо более низкий уровень экспрессии на
из-за меньшего количества событий вставки на клетку, что означает, что слитый белок не дублирует секреторный путь
, а скорее напрямую и быстро переходит к своему конечному месту назначения (рис.1а – г). Этот пример также подчеркивает потребность
в экспрессии новых конструкций на различных уровнях, чтобы оценить, зависит ли со временем конечная субклеточная локализация от уровней экспрессии
. Если это так, то эти слитые белки, возможно, необходимо экспрессировать под контролем их нативного промотора
, поскольку избыточная экспрессия может приводить к ошибочным событиям, а не к пересылке посредников, как показано сверхэкспрессией
ST-GFP (рис. 1а). –D).
Стабильно трансформированные растения табака (рис.1f) полезны по ряду причин. Экспрессия трансгена, по-видимому, стабилизируется, и
наблюдается меньше артефактов сверхэкспрессии на межклеточной основе. Чаще всего мы используем эти линии при выполнении транзитной экспрессии
ent с неизвестными белковыми конструкциями (рис. 1e), то есть, когда мы подозреваем, что белок, который мы изучаем, может нацеливаться на
тельца Гольджи, мы сливаем его с FP, отличный от GFP (например, CFP, mRFP), и временно экспрессируют его в стабильной маркерной линии ST-GFP.
Либо экспрессия двух FP будет колокализована, что указывает на то, что неизвестный белок действительно маркирует тельца Гольджи, либо внутри клетки будут отмечены два отдельных цветовых участка
, что указывает на то, что неизвестный белок отмечает нечто иное, чем
тельца Гольджи. (Рис. 1e)
8
. Стабильно трансформированные растения также полезны, когда целью является изучение характеристик органелл, таких как распределение и динамика
в типах клеток, отличных от эпидермиса листа.
БЛАГОДАРНОСТИ Мы благодарны сотрудникам лабораторий
К. Хоуза и И. Мура за плодотворные обсуждения, а также сотрудникам лабораторий
, которые помогли усовершенствовать эти методы на протяжении многих лет. Описанная здесь работа была профинансирована
за счет различных грантов BBSRC.
ЗАЯВЛЕНИЕ О КОНКУРЕНДУЮЩИХ ИНТЕРЕСАХ Авторы заявляют, что у них нет
конкурирующих финансовых интересов.
Опубликовано на сайте http://www.natureprotocols.com
Перепечатки и информация о разрешениях доступна на сайте http: // npg.nature.com/
reprintsandpermissions
1. Липпинкотт-Шварц, Дж. и Паттерсон, Г.Х. Разработка и использование флуоресцентных белковых маркеров
в живых клетках. Science 300, 87–91 (2003).
2. Чапман, С., Опарка, К.Дж. И Робертс А.Г. Новые инструменты для мечения флуоресценции in vivo
. Curr. Opin. Plant Biol. 8, 565–573 (2005).
3. Лукьянов К.А., Чудаков Д.М., Лукьянов С., Верхуша В.В. Фотоактивируемые
флуоресцентные белки.Nat. Rev. Mol. Cell Biol. 6. С. 885–890 (2005).
4. Runions, J., Hawes, C. & Kurup, S. Флуоресцентные слияния белков для локализации белка
в растениях. in Methods in Molecular Biology: Protein Targeting Protocols
(ed. van der Giezen, M.) Humana Press, Нью-Джерси, США, в прессе.
5. Runions, J., Brach, T., Kuhner, S. & Hawes, C. Фотоактивация GFP выявляет динамику
белка в эндоплазматическом ретикулуме. J. Exp. Бот. 57, 43–50
(2006).
6. Хоуз К. Клеточная биология аппарата Гольджи растений. Новый Фитол. 165, 29–44
(2005).
7. Brandizzi, F., Irons, S.L., Johansen, J., Kotzer, A. & Neumann, U. GFP — путь к свечению
: биовизуализация эндомембранной системы растений. J. Microsc. 214, 138–158
(2004).
8. Коцер, А.М. и другие. AtRabF2b (Ara7) действует на пути вакуолярного транспорта в
иэпидермальных клетках табачного листа. J. Cell Sci. 117, 6377–6389 (2004).
9. Sparkes, I.A., Hawes, C. & Baker, A. AtPEX2 и AtPEX10 нацелены на
пероксисом независимо от известных маршрутов перемещения эндоплазматического ретикулума.
Plant Physiol. 139, 690–700 (2005).
10. Айронс, С.Л., Эванс, Д.Е. & Brandizzi, F. Первые 238 аминокислот рецептора ламина B человека
нацелены на ядерную оболочку растений. J. Exp. Бот. 54,
943–950 (2003).
11. Walter, M. et al. Визуализация белковых взаимодействий в живых клетках
растений с использованием бимолекулярной флуоресцентной комплементации.Plant J. 40,
428–438.
12. daSilva, L.L.P. и другие. Сайты экспорта ER и тельца Гольджи ведут себя как отдельные мобильные секреторные единицы
в растительных клетках. Растительная клетка 16, 1753–1771 (2004).
13. Clough, S.J. И Бент, А.Ф. Цветочный дип: упрощенный метод для Agrobacterium-
трансформации Arabidopsis thaliana. Plant J. 16, 735–743
(1998).
14. Чжан, X., Энрикес, Р., Линь, С.-С., Ниу, Q.-W. И Чуа, Н.-Х. Agrobacterium-
опосредованная трансформация Arabidopsis thaliana методом орального окунания.
Нат. Протоколы 1. С. 641–646 (2006).
15. Valvekens, D., van Montagu, M. & van Lijsebettens, M. Agrobacterium
tumefaciens-опосредованная трансформация эксплантатов корня Arabidopsis thaliana
с использованием селекции канамицина. Proc. Natl. Акад. Sci. USA 85, 5536–5540
(1988).
16. Спаркс, И.А. и другие. Нулевой мутант Arabidopsis pex10 является летальным для эмбриона, при этом
пероксисом играют важную роль в эмбриогенезе растений.Plant Physiol. 133,
1809–1819 (2003).
17. Earley, K.W. и другие. Совместимые со шлюзом векторы для функциональной геномики растений и протеомики
. Плант J. 45, 616–629 (2006).
18. Hellen, R., Mullineaux, P. & Klee, H. Технические аспекты: руководство по бинарным Ti-векторам Agrobacterium
. Trends Plant Sci. 5. С. 446–451 (2000).
19. Wroblewski, T., Tomczak, A. & Michelmore, R. Оптимизация Agrobacterium-
-опосредованные временные анализы экспрессии генов в салате, томатах и арабидопсисе.
Завод биотехнологий. J. 3, 259–273 (2005).
20. Хофген Р. и Виллмитцер Л. Хранение компетентных клеток для трансформации Agrobacterium
. Nucleic Acids Res. 16, 9877 (1988).
21. Evans, D.E., Coleman, J.O.D. И Кернс, А. Культура растительных клеток. BIOS Scienti c
Publishers, Лондон, (2003).
22. Boevink, P. et al. Стеки на рельсах: аппарат Гольджи завода передает данные в сеть actin /
ER. Плант J. 15, 441–447 (1998).
p
uor
G
gn
i
h
s
i
lb
uP eru
t
000
000
000
000
natureprotocol
/moc.erut
a
nw
ww //: ptth
NATURE PROTOCOLS
|
ТОМ.1 №4
|
2006
|
2025
ПРОТОКОЛ
«Нацеливание гибридных белков на органеллы дрожжей и табака: исследование», Цзиньтай Хуанг
Название степени
Доктор философских наук
Абстрактные
Белок T-URF13 из митохондрий кукурузы с цитоплазмой техасской мужской стерильности (cms-T) участвует в возникновении цитоплазматической мужской стерильности и чувствительности к специфическим для хозяина грибковым токсинам, продуцируемым Helminthosporium maydis race T (токсин HmT) и Phyllosticta maydis (токсин Pm), а также к инсектициду метомилу.Был рассмотрен вопрос о том, отвечает ли T-URF13 за чувствительность к токсину в митохондриях cms-T. Химерный ген, кодирующий T-URF13, слитый с лидерным пептидом митохондрий из предшественника 9 субъединицы АТФ-синтазы Neurospora crassa, был экспрессирован в дрожжах Saccharomyces cerevisiae. Слитый белок, кодируемый этим геном, был перемещен в мембранную фракцию митохондрий и подвергся процессингу. Токсины HmT и Pm и метомил ингибировали рост дрожжевых клеток, экспрессирующих слияние генов, на среде, содержащей глицерин в качестве единственного источника углерода, и стимулировали поддерживаемое NADH дыхание изолированными митохондриями этих клеток.Эти эффекты не наблюдались в дрожжевых клетках, экспрессирующих немитохондриальную форму T-URF13. Результаты показывают, что T-URF13 является возбудителем чувствительности к токсинам и метомилу у кукурузы T, и предполагают, что митохондриальная локализация T-URF13 имеет решающее значение для его функции; в исследовании по идентификации лидерных пептидов митохондрий дрожжей, которые могут направлять транспорт белка к митохондрии табака (Nicotiana tabacum), митохондриальный лидерный пептид из субъединицы V цитохромоксидазы [нижний индекс] a дрожжей (S.cerevisiae), как было обнаружено, действует как сигнал нацеливания на белок с двойной специфичностью в трансгенном табаке; этот лидерный пептид направлял импорт хлорамфениколацетилтрансферазы как в митохондрии, так и в хлоропласты. Форма белка в двух органеллах была аналогична по размеру белку внутри митохондрий дрожжей, что свидетельствует о консервативном механизме процессинга. Эти результаты обеспечивают потенциальную систему для изучения органеллоспецифичности нацеливания на белок в растениях; химерные гены, кодирующие T-URF13, были введены в табак, чтобы изучить влияние T-URF13 на фертильность пыльцы.Трансгенный табак не обладал мужской стерильностью и не был чувствителен к токсинам. Очевидное отсутствие продуктов генов у трансформантов, скорее всего, объясняет отсутствие этих фенотипов.
DOI
https://doi.org/10.31274/rtd-180813-11966
Издатель
Цифровое хранилище @ Государственный университет Айовы, http://lib.dr.iastate.edu/
Правообладатель
Цзиньтай Хуан
Формат файла
заявка / pdf
Рекомендуемое цитирование
Хуанг, Цзиньтай, «Нацеливание гибридных белков на органеллы дрожжей и табака: исследование молекулярных основ чувствительности к токсинам в митохондриях кукурузы (Zea mays L.) с цитоплазмой с мужской стерильной техасской стерильностью »(1990). Ретроспективные тезисы и диссертации . 9374.
https://lib.dr.iastate.edu/rtd/9374
PopUp @ American Tobacco выбирает ресторан Puerto Rican Soul в качестве второго арендатора
Boricua Soul займет вращающееся временное пространство, 6-30 сентября отметит годовщину урагана Мария с 10% продаж, 9/20
(Дарем, Северная Каролина) — 30 августа 2018 г. — Хотя остров Пуэрто-Рико находится примерно в 1500 милях от Дарема, у гурманов в Булл-Сити будет возможность отведать популярный вкус фьюжн-кухни Карибского моря, основанный в значительной степени на классике PR.
Boricua Soul, пуэрториканский соул-ресторан, откроется в качестве второго арендатора пространства PopUp @ American Tobacco после успешного двухнедельного управления венесуэльским поставщиком кофе Кабалло Рохо.
Boricua Soul — продукт дуэта мужа и жены Ториано и Серены Фредерикс. Оба использовали свои многонациональные и богатые кулинарные традиции, чтобы создать уникальные ароматы, которые совсем недавно были обнаружены в их грузовиках с едой под тем же названием. Ресторан (и грузовик) специализируется на использовании западноафриканских, индийских и европейских ингредиентов и технологий, ставших результатом работорговли в Африке.По словам Ториано и Серены, эти продукты рассказывают историю и служат средством переноса истории из прошлого.
Это будет их первая попытка освоить кирпичную и минометную локацию.
«В течение многих лет мы работали круглосуточно, создавая наше меню и доставляя его голодным людям из всех слоев общества с помощью нашего фургона с едой», — говорит Серена. «Нам не терпится, наконец, пустить хотя бы временные корни в настоящий ресторан в одном из самых популярных мест в нашем сообществе.”
Boricua Soul займет PopUp @ American Tobacco с 6 по 30 сентября.
Сентябрь также отмечает годовщину урагана «Мария», разрушившего Пуэрто-Рико, последствия которого ощущаются до сих пор. Чтобы поддержать остров, Boricua Soul пожертвует 10% своих продаж 20 сентября, в день, когда ураган обрушился на берег, United для Пуэрто-Рико.
Boricua Soul встретит голодную толпу Дарема с понедельника по пятницу с 11:00 до 14:00. По пятницам они будут открыты на ужин с 17:00 до 20:00.м.
Подробнее на PopUp @ American Tobacco Campus
PopUp @ American Tobacco Campus будет регулярно представлять новых предпринимателей и их концепции. Вращающаяся витрина углубляет и усиливает роль Дарема как «центра стартапов Юга».
Предприниматели могут просмотреть микросайт PopUp @ American Tobacco Campus (www.popupdurham.com) для получения подробной информации и информации о том, как принять участие.
Потребители также могут проверить микросайт для получения информации о последних презентациях PopUp.Социальные каналы American Tobacco (Facebook, Twitter и Instagram) будут публиковать новости PopUp. Хэштег #PopUpDurham. Изображения для прессы здесь.
О компании Capitol Broadcasting
Capitol Broadcasting Company, Inc. — диверсифицированная коммуникационная компания, которая владеет и / или управляет WRAL-TV, WRAL Digital, WRAZ-TV, WRAZ Digital, WRAL-FM, WRAL-HD2, WCMC-FM, WCMC-HD1, WDNC- AM, WCMC-HD2, WCMC-HD3, WCLY-AM, WCMC-HD4, Microspace, CBC New Media Group и Wolfpack Sports Properties (совместное предприятие с Learfield) в Роли, Северная Каролина; WILM-TV, WILT-LD и Sunrise Broadcasting в Уилмингтоне, Северная Каролина; Бейсбольный клуб Durham Bulls, Bull City Hospitality и Bull Durham Beer Co.и запускающий центр American Underground в Дареме, Северная Каролина; Холли Спрингс Саламандры в Холли Спрингс, Северная Каролина; и интересы в сфере недвижимости, включая Исторический район American Tobacco в Дареме, Северная Каролина, и Рокки Маунт Миллс в Роки Маунт, Северная Каролина; и Professional Builders Supply (долевое товарищество) в Моррисвилле, N
| | ПОСМОТРЕТЬ СТАТЬЮ Сопротивление Устойчивость к вирусу табачной мозаики и Meloidogyne arenaria в гибридных гибридах между Nicotiana tabacum и N.repanda N. sylvestris Гибрид. Phuong T. Bui, Департамент патологии растений, Государственный университет Северной Каролины, Роли 27695-7616; Энн Э. Дженнс (2), Салли М. Шнайдер (3) и Маргарет Э. Дауб (4). (2) (4) Департамент патологии растений, Государственный университет Северной Каролины, Роли 27695-7616; (3) USDA-ARS, Oxford, NC 27565. Фитопатология 82: 1305-1310. Принята к публикации 5 августа 1992 г. Эта статья находится в общественном достоянии и не охраняется авторскими правами. Его можно свободно перепечатывать с обычным указанием источника.Американское фитопатологическое общество, 1992. DOI: 10.1094 / Phyto-82-1305. Nicotiana repanda обладает устойчивостью ко многим важным болезням табака, но в настоящее время нет доступных сортов табака, несущих гены устойчивости, полученные от этого вида. Чтобы перенести гены устойчивости в культивируемый табак ( N. tabacum ), N. repanda сначала гибридизировали с N. sylvestris, — видом, который перекрестно совместим как с N. tabacum , так и с N.репанда. Этот гибрид N. repanda N. sylvestris (R S) затем гибридизовали с N. tabacum cv. NC2326 путем слияния протопластов. Родительские линии трансформировали на устойчивость к двум антибиотикам, гигромицину или канамицину, векторами трансформации Agrobacterium tumefaciens . Слитые протопласты были отобраны по их способности расти и регенерировать на среде, содержащей оба антибиотика. В 15 различных экспериментах по слиянию NC2326 и гибрида R S не было получено никаких каллусов слияния, но каллусы были выделены в шести из 63 экспериментов слияния, когда NC2326 был слит с гибридом R S с удвоенной хромосомой.Каллусы появились через 46 месяцев после слияния, по сравнению с 812 неделями, необходимыми для получения слитных каллусов между двумя сексуально совместимыми сортами N. tabacum , NC2326 и Burley 21. На сегодняшний день укорененные растения были получены только в результате одного эксперимента по слиянию; они были обозначены как гибриды слияния E. В общей сложности 69 из этих гибридных гибридов были выведены в теплице через 1724 мес. После слияния. Все они напоминали NC2326 по морфологии, но все обладали устойчивостью к вирусу табачной мозаики (TMV), происходящему от родительского гибрида R S.Из 12 гибридных гибридов, проанализированных на изоферменты глутаматоксалоацетаттрансаминазы, все продемонстрировали гибридные изоферменты. Все 69 растений цвели и имели мужскую стерильность, и все были успешно скрещены с NC2326. На сегодняшний день BC 1 F 1 растений 27 из 69 E гибридных гибридов были проанализированы на устойчивость к TMV и расе 2 Meloidogyne arenaria. Только 25 из 270 до н.э. 1 F 1 протестированных растений показали повышенную устойчивость к M.arenaria, , четыре из которых имели устойчивость, эквивалентную устойчивости гибрида R S. Напротив, 164 из 226 BC 1 F 1 растений имели устойчивость к TMV. BC 1 F 1 растений также различались по морфологическим признакам. BC 1 F 1 растения снова оказались стерильными с мужской стерильностью, но были успешно скрещены с NC2326. Также сообщается об эффективности двойной системы отбора антибиотиков для отбора гибридных гибридов in vitro. Дополнительные ключевые слова : корневой узел, соматическая гибридизация, трансформация. |
Голландские сигариллы Atomic Fusion 2 упаковка
Набор голландских сигарилл Atomic Fusion 2 Покурите дикой природе с захватывающими сигарами Dutch Masters Cigarillos Atomic Fusion. Этот знаменитый стоги из Пуэрто-Рико, сделанный машинным способом, вышел из своей зоны комфорта, чтобы предложить вам удивительную смесь кубинских семечек табака, наполненную огненным взрывом экзотических острых фруктовых ароматов. Запакованные в пакетики из фольги для свежести, эти вкусные дымы доступны в 30 пакетиках по 2 штуки в каждом.
Голландские сигариллы Atomic Fusion Внешнее чтение:
Нажмите, чтобы узнать больше о
голландского магистраЩелкните, чтобы узнать об использовании и преимуществах CBD и о том, как оставаться здоровым.
Нажмите, чтобы увидеть больше наших продуктов CBD
Мы настоятельно рекомендуем нашим клиентам перейти на использование негорючего табака. Сжигание табака может представлять большую опасность для здоровья. Нажмите, чтобы увидеть другие наши батареи Nic Salt или Vaping
Мы рекомендуем нашим клиентам ознакомиться с этим руководством Nic-Salt для начинающих.
Пожалуйста, проверьте зону доставки перед заказом голландских сигарилл Atomic Fusion:
- Мы осуществляем доставку только по определенным почтовым индексам.
- Используйте красную кнопку ниже, чтобы проверить, доставляем ли мы в ваш регион перед оплатой
Пожалуйста, введите свой адрес.>
Молниеносная доставка в Северном Майами-Бич, Авентуре и окрестностях!
Получите пар, кратом, CBD и табак для кальяна с доставкой прямо к вашей двери в районе Северного Майами-Бич.Smokeshopdelivers.com предлагает молниеносную доставку, чтобы вы не теряли времени. Мы предлагаем широкий выбор кальяна, продуктов из паров никотина, порошка кратома, капсул и даже продуктов CBD и Delta-8. Разместите заказ и оплатите его при доставке. Просмотрите наш огромный выбор и позвольте нам сделать все возможное. Остаться дома. Мы приходим к вам! Пропустите поиск дыма или вейп-магазина рядом со мной.
Загляните в наши 10 лучших вейп-магазинов в Северном Майами-Бич. Smoke Shop Delivers будет вести машину за вас .Мы избавим вас от хлопот по поиску Kratom Near Me, доставив кратом, вейп, дым, табак из нашего магазина прямо к вашей двери. Если вы ищете Juul Pods, Smoke and Vape, Shisha, Kratom, Delta-8, Kratom Shots, масла CBD, жевательные конфеты CBD, обертывания, измельчители, детокс-напитки и многое другое! Вы находитесь в районе Авентура или Северного Майами-Бич? Большой! Мы принесем вам вейп-магазин.