Самый дымный табак: Страница не найдена — Эксперт по курению

CTP доступно для распространения, поэтому вы можете легко включить его на свой веб-сайт.Посредством синдикации, когда контент обновляется на нашем сайте, он автоматически обновляется и на вашем сайте.

Распечатать этот контент

Хотя сигареты — учитывая их высокий уровень употребления, вызывающий привыкание характер и токсичное сочетание химических веществ — являются наиболее опасным табачным изделием, любой табачный продукт, который вы вдыхаете, может вызвать повреждение легких. Курение сигар может увеличить риск ХОБЛ и привести к раку легких, ротовой полости и гортани, а также к другим видам рака. ^10,11

Электронные системы доставки никотина (ЭСДН), как и электронные сигареты, все еще являются относительно новыми табачными изделиями, и их влияние на здоровье все еще оценивается.Но использование электронных сигарет — или «вейпинг» — может нанести вред вашим легким. Было обнаружено, что некоторые аэрозоли для электронных сигарет содержат некоторые из тех же химических веществ, что и сигареты, в том числе акролеин, раздражающий легкие, и формальдегид, которые могут отрицательно повлиять на горло. ^12,13,14,15 Ароматизаторы считаются безопасными для употребления в пищу, но могут быть вредными при вдыхании. Масляные ароматизаторы, такие как карамель, ирис и шоколад, содержат химические вещества диацетил и ацетоин, которые могут быть вредными для ваших легких. ¹⁶ Кроме того, электронные сигареты со вкусом фруктов могут иметь более высокие концентрации химического вещества, называемого акрилонитрилом, который является известным раздражителем дыхательных путей. ¹⁷

Как защитить легкие от табака

Легкие — одна из систем фильтрации вашего тела, которая забирает воздух из атмосферы, добавляет в кровь кислород для циркуляции по всему телу и выводит избыток углекислого газа. Когда табак вдыхается, это нарушает этот хрупкий баланс. Лучший способ обеспечить здоровье легких — никогда не начинать употреблять табак, но если вы являетесь зависимым курильщиком, чем раньше вы бросите курить, тем быстрее ваши легкие начнут заживать.Отказ от курения может снизить риск заболевания раком. Фактически, когда вы бросите курить, ваш риск:

• Рак гортани сокращается немедленно;
• Рак легких снижается на 50 процентов через 10 лет после отказа от курения;
• Через пять лет после прекращения курения заболеваемость раком рта и горла снизилась на 50%. ⁸

У каждого, кто бросит курить, улучшится общее состояние здоровья. Всего через 12 часов после отказа от курения уровень окиси углерода в крови упадет до нормального, что позволит большему количеству кислорода поступить к вашим органам. ²

Дополнительные ресурсы

Найдите информацию о прекращении курения и другие ресурсы о табачных изделиях и их влиянии на здоровье:

<sub>1. Министерство здравоохранения и социальных служб США (USDHHS). Отчет главного хирурга: как табачный дым вызывает болезнь: что он значит для вас (буклет для потребителей). Атланта, Джорджия: Министерство здравоохранения и социальных служб США, Центры по контролю и профилактике заболеваний, Национальный центр профилактики хронических заболеваний и укрепления здоровья, Управление по курению и здоровью; 2010 г.
2. Министерство здравоохранения и социальных служб США (USDHHS). Последствия курения для здоровья: что оно значит для вас (буклет для потребителей). Атланта, Джорджия: Министерство здравоохранения и социальных служб США, Центры по контролю и профилактике заболеваний, Национальный центр профилактики хронических заболеваний и укрепления здоровья, Управление по курению и здоровью; 2004.
3. Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов США. Вредные и потенциально вредные компоненты табачных изделий и табачного дыма; Установленный список. https: // www.fda.gov/TobaccoProducts/Labeling/RulesRegulationsGuidance/ucm297786.htm По состоянию на 8 января 2019 г.
4. Министерство здравоохранения и социальных служб США (USDHHS). Как табачный дым вызывает заболевание: биология и поведенческие основы заболевания, связанного с курением: отчет главного хирурга. Атланта, Джорджия: Министерство здравоохранения и социальных служб США, Центры по контролю и профилактике заболеваний, Национальный центр профилактики хронических заболеваний и укрепления здоровья, Управление по курению и здоровью; 2010 г.
5. Министерство здравоохранения и социальных служб США (USDHHS). Женщины и курение. Отчет главного хирурга. Атланта, Джорджия: Министерство здравоохранения и социальных служб США, Центры по контролю и профилактике заболеваний, Координационный центр по укреплению здоровья, Национальный центр профилактики хронических заболеваний и укрепления здоровья, Управление по курению и здоровью; 2001.
6. Министерство здравоохранения и социальных служб США (USDHHS). Отчет главного хирурга: Профилактика употребления табака среди молодежи и молодых людей.Мы можем сделать следующее поколение свободным от табака (буклет для потребителей). Атланта, Джорджия: Министерство здравоохранения и социальных служб США, Центры по контролю и профилактике заболеваний, Национальный центр профилактики хронических заболеваний и укрепления здоровья, Управление по курению и здоровью; 2012.
7. Министерство здравоохранения и социальных служб США (USDHHS). Последствия курения для здоровья — 50 лет прогресса: отчет главного хирурга (информационный бюллетень). Атланта, Джорджия: Министерство здравоохранения и социальных служб США, Центры по контролю и профилактике заболеваний, Национальный центр профилактики хронических заболеваний и укрепления здоровья, Управление по курению и здоровью; 2014 г.
8. Министерство здравоохранения и социальных служб США (USDHHS). Последствия курения для здоровья: доклад главного хирурга. Атланта, Джорджия: Министерство здравоохранения и социальных служб США, Центр по контролю и профилактике заболеваний, Национальный центр профилактики хронических заболеваний и укрепления здоровья, Управление по курению и здоровью, 2004 г.
9. Национальный институт рака. Словарь терминов NCI по раку. https://www.cancer.gov/syndication/widgets. По состоянию на 10 сентября 2018 г.
10. Шанкс Т.Г., Бернс Д.М.Последствия заболевания сигарным курением. В: Курение и борьба против табака Монография 9: Сигары — влияние и тенденции на здоровье. Бетесда, Мэриленд: Национальный институт рака; 1998.
11. Международное агентство по изучению рака (МАИР). Табачный дым и непроизвольное курение. В: Монографии МАИР по оценке канцерогенных рисков для человека. Vol. 83. Лион, Франция: Международное агентство по изучению рака; 2004.
12. Goniewicz ML, Knysak J, Gawron M, et al. Уровни выбранных канцерогенов и токсичных веществ в парах электронных сигарет.Контроль над табаком. 2014; 23 (2): 133-139.
13. Ченг Т. Химическая оценка электронных сигарет. Контроль над табаком. 2014; 23: ii11 – ii17.
14. Бейн К., Лейкауф Г.Д. Акролеин — легочная опасность. Молекулярное питание и пищевые исследования. 2011; 55 (9): 1342-1360.
15. Управление по охране труда и здоровья (OSHA). Стандарты безопасности и гигиены труда. Медицинское наблюдение — Формальдегид. Вашингтон, округ Колумбия: Министерство труда, безопасности и гигиены труда США. https: // www.osha.gov/pls/oshaweb/owadisp.show_document?p_table=STANDARDS&p_id=10078. По состоянию на 8 мая 2018 г..
16. Аллен Дж., Фланиган С.С., Леблан М. и др. Ароматизирующие химические вещества в электронных сигаретах: диацетил, 2,3-пентандион и ацетоин в выборке из 51 продукта, включая электронные сигареты со вкусом фруктов, конфет и коктейлей. Перспектива здоровья окружающей среды. 2016; 124. https://ehp.niehs.nih.gov/15-10185/. По состоянию на 27 марта 2018 г..
17. Рубинштейн М., Делукки К., Беновиц Н., Рамо Д. Воздействие токсичных летучих органических химикатов из электронных сигарет на подростков.Педиатрия. 2018; 141 (4): e20173557.</sub>

Очистка от дыма: научная основа снижения вреда от табака — резюме

Фон

Табачный дым — причина самой смертоносной эпидемии современности. Курение вызывает рак (например, легких, полости рта, пищевода, гортани, поджелудочной железы, мочевого пузыря, почек), хроническую обструктивную болезнь легких (ХОБЛ), инфаркт миокарда и инсульт. Продолжающееся число жертв употребления табака побудило искать средства снижения вреда для тех, кто не может или не хочет прекратить употреблять табак.В настоящее время на рынок выходит множество продуктов, подразумевающих или явных заявлений о снижении бремени курения при одновременном продолжении потребления никотина. Этот отчет посвящен оценке этих продуктов.

Почти четверть взрослых американцев — примерно 47 миллионов человек — курят сигареты1. Хотя это намного ниже, чем 42%, зафиксированных в 1965 году, снижение уровня курения среди взрослых, похоже, стабилизировалось в течение большей части 1990-х годов. .2 В недавнем обзоре 12.8% учащихся средних школ и 34,8% учащихся старших классов сообщили о том, что употребляли табак в той или иной форме в течение месяца, предшествовавшего интервью. Подавляющее большинство курильщиков начинают употреблять табак в подростковом возрасте4. Однако 70% курильщиков говорят, что они хотят бросить курить5 и 34% курильщиков ежегодно пытаются бросить курить. Таким образом, многим, но не всем потребителям табака очень трудно бросить курить и постоянно подвергать себя воздействию известных токсичных веществ.

Определение снижения вреда

Для целей настоящего отчета продукт снижает вред, если он снижает общую смертность и заболеваемость, связанные с табаком, даже если использование этого продукта может включать продолжительное воздействие токсичных веществ, связанных с табаком. Многие различные политические стратегии могут способствовать снижению вреда. Однако в этом отчете основное внимание уделяется табачным изделиям, которые могут быть менее вредными, или фармацевтическим препаратам, которые можно использовать отдельно или одновременно с уменьшением употребления обычного табака. Комитет не использует термин «более безопасная сигарета», в частности, чтобы избежать впечатления, что любой известный в настоящее время продукт является «безопасным». Каждый известный табачный продукт подвергает пользователя воздействию токсичных веществ; любой фармацевтический продукт может иметь побочные эффекты.

История усилий по снижению вреда от сигарет

В прошлом предпринимались многочисленные попытки разработать менее вредные сигареты, но ни одна из них не оказалась успешной. Одним из первых нововведений, обещавших снижение вреда, была разработка сигарет с фильтрами. Фильтры пытаются уменьшить количество токсичных веществ, которые попадают в дым, вдыхаемый курильщиком. Следующей важной модификацией сигарет с точки зрения безопасности стали сигареты с низким выходом.Эти продукты выделяют меньше смол, оксида углерода (CO) и никотина, чем другие продукты, по данным анализа Федеральной торговой комиссии (FTC) («курительная машина»). Многие потребители считали и до сих пор верят, что эти продукты менее опасны для здоровья, чем другие сигареты.

Однако данные о влиянии продуктов с низким выходом на здоровье противоречивы, отчасти из-за отсутствия систематических исследований на ранних этапах внедрения продуктов. Большинство текущих оценок заболеваемости и смертности предполагают, что продукты с низким выходом связаны с гораздо меньшей пользой для здоровья, если таковая имеется, чем можно было бы спрогнозировать на основе оценок снижения токсического воздействия с использованием выходов FTC.Чтобы поддерживать желаемое потребление никотина, многие курильщики, перешедшие на продукты с низким выходом, также изменили способ курения (например, компенсируя это более глубоким вдыханием, чем при курении продуктов с более высоким выходом). Таким образом, их воздействие токсичных веществ табака выше, чем можно было бы спрогнозировать с помощью стандартизованных анализов, и люди, которые продолжали употреблять эти продукты, не смогли значительно снизить риск своих заболеваний, переключившись на них. Более того, широкое употребление этих продуктов могло бы увеличить вред для населения в целом, если бы потребители табака, которые в противном случае могли бы бросить курить, если бы бывшие потребители табака возобновили употребление, или если бы некоторые люди, которые в противном случае не употребляли бы табак, сделали это из-за представления о том, что риск с низкодоходными продуктами минимален.

Виды средств снижения воздействия

Табак и подобные сигаретам изделия были введены недавно, что при использовании таких измерительных систем, как курительная машина FTC, приводит к снижению выбросов некоторых токсичных веществ по сравнению с обычными табачными изделиями. Доступные в настоящее время продукты включают табак с якобы пониженным уровнем некоторых канцерогенов и сигаретоподобные продукты, которые доставляют никотин с меньшим сгоранием, чем сигареты. Два класса фармацевтических продуктов, одобренных Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) для краткосрочного использования при отказе от курения, также могут использоваться для снижения вреда.К ним относятся никотиновые продукты, такие как пластырь, жевательная резинка, ингалятор и назальный спрей, а также продукт, не содержащий никотина, который снижает тягу к табаку. Эти препараты для прекращения курения можно использовать в течение длительного времени для продолжения отказа или одновременно с продолжающимся, но уменьшенным употреблением обычных табачных изделий (таблица 1).

Продукты с пониженным потенциалом воздействия (PREP)

Эти табачные изделия и фармацевтические продукты могут потенциально привести к уменьшению воздействия токсичных веществ.Комитет использует слово «потенциально», потому что снижение воздействия токсичных веществ табака зависит от поведения пользователя, такого как частота и интенсивность употребления. Однако снижение воздействия не обязательно гарантирует снижение риска для пользователя или уменьшение вреда для населения. Поэтому, чтобы избежать неправильного толкования, комитет использует общую фразу «продукты с уменьшенным воздействием» или PREP при обсуждении модифицированных табачных изделий, сигаретоподобных продуктов (содержащих табак или нет) или фармацевтических продуктов и медицинских устройств. (независимо от того, содержат ли они никотин или нет), используемые для снижения вреда от табака.В ближайшем будущем, вероятно, будет введено больше таких продуктов, возможно, с заявлениями о том, что они менее вредны, чем обычные продукты.

Обвинение и допущения комитета

Институт медицины (IOM) созвал комитет экспертов для разработки научных методов и стандартов, с помощью которых можно было бы оценивать PREP (фармацевтические или связанные с табаком). Четыре вопроса были включены в поручение, данное комитету Управлением по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) в декабре 1999 года.Там, где еще нет ответов, комитету было предложено обрисовать общую стратегию, с помощью которой можно было бы собрать базу знаний.

1.

Уменьшает ли использование продукта воздействие вредных веществ, содержащихся в табаке?

2.

Связано ли уменьшение воздействия со снижением вреда для здоровья?

3.

Существуют ли суррогатные индикаторы этого воздействия на здоровье, которые можно было бы измерить за период времени, достаточный для оценки продукта?

4.

Какое влияние на здоровье населения оказывают продукты снижения вреда от табака?

Первые три вопроса касаются адекватности современных научных методов определения того, снижают ли и в какой степени эти продукты риск заболеваемости и смертности, а также характера рекомендаций, которые следует давать гражданам, специалистам в области здравоохранения и другим лицам. Четвертый вопрос важен, поскольку он касается воздействия этих продуктов на население. То есть, хотя продукт может снижать риск для здоровья человека по сравнению с обычными табачными изделиями, его употребление может не снижать вреда для населения в целом.Четвертый вопрос также важен, потому что ответ закладывает основу для образовательных, политических и регулирующих действий.

Комитет изучил литературу и оценил характер и доступность данных, необходимых для оценки осуществимости снижения вреда от табака. В его обзор вошли основные категории заболеваний, связанные с потреблением табака научными данными, включая рак, сердечно-сосудистые заболевания, респираторные заболевания, нарушения репродуктивной системы и развития и другие.Отчет предлагается соответствующим федеральным и государственным регулирующим и политическим органам, Конгрессу, ученым и специалистам в области здравоохранения, табачной и фармацевтической промышленности и, что наиболее важно, общественности, которая должна будет решить, использовать эти продукты или нет.

Комитет начал с фундаментальных принципов работы, повторяя и подтверждая неопровержимые научные данные и выводы многих научных и политических консультативных органов:

Предписание 1 — Употребление табака причиняет серьезный вред здоровью человека.

Заповедь 2 —Никотин вызывает привыкание.

Заповедь 3 — Лучшим средством защиты здоровья человека и общества от вреда, наносимого табаком, является воздержание, предотвращение возникновения и рецидива, а также устранение воздействия табачного дыма в окружающей среде.

Предписание 4 — Для сведения к минимуму неблагоприятных последствий табака необходима комплексная и авторитетная национальная программа борьбы против табака, в которой снижение вреда является одним из компонентов.

Основные выводы

Комитет не оценивает конкретные PREP в этом отчете, поскольку доступные в настоящее время PREP, связанные с табаком, в частности, являются, скорее всего, прототипами с ограниченной продолжительностью жизни. В нынешних нормативных условиях PREP, относящиеся к табаку, могут быть изменены с небольшой оценкой и без раскрытия их содержания. Таким образом, комитет рассмотрел типы PREP, которые сейчас или могут появиться в обозримом будущем. После изучения большого количества научных документов и данных, заслушивания презентаций многих научных, нормативных и промышленных кругов и публичного запроса комментариев по рассматриваемым вопросам комитет приходит к следующим основным выводам относительно вопросов, поставленных обвинением:

Заключение 1 — В отношении многих заболеваний, связанных с употреблением табака, снижение риска заболеваний путем уменьшения воздействия табачных токсичных веществ возможно. Этот вывод основан на исследованиях, демонстрирующих, что при многих заболеваниях сокращение воздействия табачного дыма может привести к снижению заболеваемости, а полное воздержание от курения дает наибольшую пользу.

Заключение 2 — PREP еще не прошли достаточно всестороннюю оценку (в том числе в течение достаточного времени), чтобы предоставить научную основу для вывода о том, что они связаны со сниженным риском заболевания по сравнению с обычным употреблением табака. Одним узким исключением является использование никотиновой жевательной резинки в одном исследовании для поддержания отказа от курения, описанном в главах 8, 13 и 14. Тщательно и надлежащим образом проведенные клинические и эпидемиологические исследования могут продемонстрировать влияние на здоровье. Однако влияние PREP s на заболеваемость большинством заболеваний, связанных с табаком, не будет прямо или окончательно продемонстрировано в течение многих лет.

Заключение 3 —S Уррогатные биологические маркеры, которые связаны с заболеваниями, связанными с табаком, могут быть использованы в качестве руководства относительно того, могут ли PREP снижать риск. Однако эти маркеры должны быть валидированы как надежные предикторы возникновения заболевания и должны быть способны предсказывать ряд важных и распространенных состояний, связанных с обычными табачными изделиями. Кроме того, эффективность PREPS, вероятно, будет зависеть от характеристик популяции пользователей (например, от пола, генетической предрасположенности, этнической принадлежности, табачного анамнеза и истории болезни).

Заключение 4 — Доступные в настоящее время PREP продемонстрировали или могут продемонстрировать снижение воздействия некоторых токсичных веществ в большинстве обычных табачных изделий. Существует множество методов оценки снижения воздействия, но в отчете содержится много предостережений в отношении использования всех из них, включая обычно неизвестную способность прогнозирования вреда.

Заключение 5 — Регулирование всех табачных изделий, в том числе обычных, как рекомендовано МОМ, 1994, а также всех других PREP, является необходимым предварительным условием для обеспечения научной основы для оценки эффектов использования PREP и для гарантии того, что здоровье общественности защищена.Регламент необходим для обеспечения проведения адекватных исследований (по всему, от химии дыма и токсикологии до долгосрочной эпидемиологии) и для обеспечения того, чтобы общественность располагала актуальной и надежной информацией о рисках и преимуществах PREP. Требуется тщательное регулирование претензий, чтобы уменьшить неправильное восприятие и неправильное использование продуктов. Если PREP продается с заявлением о том, что он снижает (или может снизить) риск конкретного заболевания (заболеваний) по сравнению с риском продукта, который он заменяет, необходимо регулирование, чтобы гарантировать, что это заявление подтверждено научно обоснованными доказательства и что соответствующие эпидемиологические данные собраны для проверки этого утверждения.

Заключение 6 — Воздействие PREP на здоровье населения неизвестно. Они потенциально полезны, но на самом деле их чистое воздействие на здоровье населения может быть отрицательным. Воздействие на здоровье населения будет зависеть от биологического вреда, наносимого этими продуктами, а также от поведения отдельных лиц и сообществ в отношении их использования. Регулирование не может гарантировать, что доступность PREP, снижающих риск, приведет к снижению вреда, связанного с табаком, для населения в целом.Тем не менее, регулирующий орган может гарантировать, что собраны данные, которые позволят отслеживать влияние на население. Если потребление табака возрастет или число заболеваний, связанных с табаком, возрастет, эти данные послужат основой для разработки и реализации соответствующих мероприятий общественного здравоохранения.

Основные рекомендации

Комитет считает, что снижение вреда является осуществимой и оправданной политикой общественного здравоохранения, но только в том случае, если она тщательно реализуется для достижения следующих целей:

• производителей имеют необходимый стимул для разработки и продажи продуктов, которые снижают воздействие табачных токсичных веществ и имеют разумные перспективы снижения риска заболеваний, связанных с табаком;

• потребителей полностью и точно информированы обо всех известных, вероятных и потенциальных последствиях использования этих продуктов;

• продвижение, реклама и маркировка этих продуктов строго регламентированы для предотвращения ложных или вводящих в заблуждение заявлений, явных или подразумеваемых;

• последствия использования PREP для здоровья и поведения находятся под наблюдением на постоянной основе;

• фундаментальных, клинических и эпидемиологических исследований проводится с целью определения их потенциала по снижению вреда для отдельных лиц и групп населения, а также.

• Снижение вреда

  реализовано как компонент комплексной национальной программы борьбы против табака, в которой особое внимание уделяется профилактике и лечению, ориентированным на воздержание.

Рекомендации относительно будущих потребностей в исследованиях основаны на основных выводах 1–4 и могут быть найдены в следующем разделе. В основном они основаны на материалах, представленных в разделе II отчета. Прогресс в этих областях позволит применять принципы оценки рисков к оценке PREP в будущем.В настоящее время для оценки PREP будет использоваться суждение, основанное на неполных научных данных. Однако требуются немедленные действия. Таким образом, комитет дает рекомендации, которые касаются основных выводов 5 и 6. Эти выводы и рекомендации особенно взаимосвязаны, требуя немедленного внимания и быстрых действий.

Эффектом PREP может быть увеличение или уменьшение числа заболеваний, связанных с табаком, среди населения. Оценка положительного воздействия на общественное здоровье будет трудной и потребует обширного наблюдения и исследований, чтобы гарантировать положительное воздействие.Даже самая мощная система наблюдения сама по себе не может обеспечить минимальную уверенность в безопасности или защите населения. В настоящее время государственный контроль над табачными изделиями любого типа практически отсутствует. Каким бы ни было текущее правовое или нормативное положение в отношении этих продуктов, комитет осознал, что для получения наилучшей доступной научной оценки появляющихся PREP, связанных с табаком, и предоставления общественности лучших рекомендаций по использованию всех PREP, некоторые национальные органы власти должны эти PREPs необходимы.Только комплексная программа регулирования и оценки, включая обширное предпродажное тестирование и надзор, дает разумную возможность чистой выгоды для здоровья от использования PREP вместо обычного употребления табачных изделий.

Таким образом, комитет рекомендует разработать систему надзора для оценки воздействия пропаганды и использования PREP на здоровье населения.

Срочно необходима национальная комплексная система эпиднадзора для сбора информации по широкому кругу элементов, необходимых для понимания воздействия табачных изделий и PREP на население, включая отношения, убеждения, характеристики продукции, модели распределения и использования продукции, маркетинговые сообщения, такие как снижение вреда заявления и реклама, частота возникновения и прекращения курения, а также нетабачные факторы риска состояний, связанных с табаком.Необходимо проводить наблюдение за основными заболеваниями, связанными с курением, а также создавать совокупные показатели здоровья населения, отражающие чистое воздействие обычных продуктов и PREP.

Система эпиднадзора должна состоять из обязательных, предоставляемых промышленностью данных о составных частях табачных изделий, а также о распределении и продажах среди населения. Ресурсы должны быть доступны для программы эпидемиологических исследований, которые конкретно рассматривают последствия для здоровья PREP и обычных табачных изделий, основанные на надежной системе эпиднадзора и использующие все доступные фундаментальные и клинические научные данные.

Комитет также рекомендует усилить федеральное регулирование всех модифицированных табачных изделий с заявлениями о снижении риска или воздействии, явными или подразумеваемыми, а также любых других продуктов, предлагаемых населению для содействия сокращению или прекращению употребления табака. Комитет определяет 11 принципов регулирования PREP. Регламент, предложенный этим комитетом, узко сфокусирован на обеспечении того, чтобы продукты снижали риск заболевания для пользователя, и на сборе данных, которые могли бы указать, снижают ли продукты вред для населения в совокупности.Другие потенциальные нормативные подходы к борьбе против табака в этом отчете не рассматриваются.

Рекомендуемая структура регулирования основана на существующем законодательстве о пищевых продуктах и ​​лекарствах с соответствующими изменениями, учитывающими уникальную историю и токсичность табачных изделий. Эти принципы предусматривают тестирование и отчетность для всех табачных изделий, утверждение заявлений о снижении воздействия и снижении риска, связанного с табаком или сигаретоподобными изделиями, а также сохранение действующих правил FDA в отношении фармацевтических PREP.Производителей табачных изделий и фармацевтических препаратов следует поощрять к разработке и внедрению новых продуктов, которые снизят бремя болезней, связанных с табаком. Систему регулирования, предложенную в этом отчете, не следует рассматривать изолированно. Он предлагается в качестве важного компонента пакета инициатив в области общественного здравоохранения (включая исследования, образование и эпиднадзор), которые, по мнению этого комитета, необходимы для реализации любых преимуществ, которые могут принести табак и инновации фармацевтических продуктов в снижении национального бремени болезней, связанных с табаком, и смерть (см. вставку 1).

Вставка 1 Нормативные принципы

Нормативный принцип 1 —Производители табачных изделий, как обычных, так и модифицированных, должны быть обязаны получать количественные аналитические данные об ингредиентах каждого из своих продуктов и раскрывать такую ​​информацию регулирующему органу.

Нормативный принцип 2 —Все табачные изделия должны оцениваться на предмет содержания никотина и других табачных токсичных веществ в соответствии с методом, который отражает фактические обстоятельства потребления человеком; при необходимости для подтверждения заявлений воздействие на человека различных компонентов табачного дыма следует оценивать с использованием соответствующих биомаркеров.Точная информация относительно диапазона урожайности и воздействия на человека должна быть доведена до потребителей в понятных и не вводящих в заблуждение терминах.

Нормативный принцип 3 —Производители всех PREP должны быть обязаны проводить соответствующие токсикологические испытания в доклинических лабораториях и на животных моделях, а также соответствующие клинические испытания на людях для подтверждения заявлений, связанных со здоровьем, связанных с каждым продуктом, и раскрытия результатов таких испытаний. в регулирующий орган.

Нормативный принцип 4 —Производителям должно быть разрешено продавать табачные изделия с заявлениями о снижении воздействия или снижении риска только после предварительного одобрения агентства, основанного на научных доказательствах (а) того, что продукт существенно снижает воздействие одного или нескольких табачных токсичных веществ и (б) если заявлено о снижении риска, можно разумно ожидать, что продукт снизит риск одного или нескольких конкретных заболеваний или других неблагоприятных последствий для здоровья по сравнению с любым эталонным продуктом, который агентство требует указывать в маркировке.«Существенное снижение» воздействия должно быть достаточно большим, чтобы можно было ожидать измеримого снижения заболеваемости и / или смертности (в последующих клинических или эпидемиологических исследованиях), по оценке независимых научных экспертов.

Нормативный принцип 5 —Маркировка, реклама и продвижение всех табачных изделий с заявлениями о снижении воздействия или снижении риска должны тщательно регулироваться в соответствии со стандартом «не ложным и не вводящим в заблуждение» с бременем доказывания на производителе, а не на правительстве. .Агентство должно иметь полномочия и ресурсы для проведения собственных исследований восприятия потребителей в отношении этих заявлений.

Регулирующий принцип 6 — Регулирующий орган должен иметь право требовать от производителей всех товаров, продаваемых с заявлениями о снижении риска заболеваний, связанных с табаком, проводить постмаркетинговый надзор и эпидемиологические исследования, необходимые для определения краткосрочных поведенческих и долгосрочных последствий для здоровья от употребления табака. их продукты и разрешить постоянный контроль правильности их требований.

Нормативный принцип 7 —При отсутствии каких-либо заявлений о снижении воздействия или снижении риска производителям табачных изделий должно быть разрешено продавать новые продукты или модифицировать существующие продукты без предварительного одобрения регулирующего органа после информирования агентства о составе продукт и удостоверение того, что нельзя разумно ожидать, что продукт увеличит риск рака, сердечных заболеваний, заболеваний легких, неблагоприятных репродуктивных эффектов или других неблагоприятных последствий для здоровья по сравнению с аналогичными обычными табачными изделиями, по оценке на основе наиболее текущая токсикологическая и эпидемиологическая информация.

Нормативный принцип 8 — Обо всех добавленных ингредиентах в табачные изделия, включая уже имеющиеся на рынке, следует сообщать в агентство и подвергать всестороннему токсикологическому анализу.

Нормативный принцип 9 — Регулирующий орган должен иметь право устанавливать стандарты эффективности (например, максимальные уровни загрязнителей; определения таких терминов, как «низкий уровень смол») для всех табачных изделий, обычных или модифицированных, или для классов продуктов. .

Регулирующий принцип 10 — Регулирующий орган должен иметь правоохранительные полномочия, соразмерные его миссии, включая право выдавать повестки в суд.

Нормативный принцип 11 — Заявления о сокращении воздействия на лекарства, которые подтверждены соответствующими научными и клиническими доказательствами, должны быть разрешены FDA.

Выводы и рекомендации исследования

Необходимо изучить многие плодотворные направления исследований, чтобы укрепить научную основу для оценки снижения вреда.При рассмотрении ряда научных дисциплин и областей болезней комитет особо отметил пять общих научных вопросов: (1) описание зависимости «доза-реакция» между табачным дымом и / или составляющим его воздействием и последствиями для здоровья; (2) идентификация и разработка суррогатных маркеров болезни; (3) полезность доклинических исследований; (4) полезность краткосрочных клинических и эпидемиологических исследований; и (5) роль долгосрочных эпидемиологических исследований и эпиднадзора. Комитет рассмотрел имеющиеся доказательства по этим вопросам и описал программу исследований, чтобы облегчить оценку потенциала снижения вреда от этих продуктов.В этом разделе резюмируются выводы и рекомендации комитета для будущих исследований, которые подробно описаны в разделе II настоящего отчета.

1. Доступные в настоящее время данные позволяют оценить, хотя и неточно, зависимость доза-реакция между воздействием всего табачного дыма и основными заболеваниями, которые можно отслеживать для оценки потенциала снижения вреда.

Табачный дым содержит более 4000 различных химических веществ; многие из них, как известно, токсичны.Многие механизмы патогенеза, приписываемые употреблению табака, были объяснены, и в некоторых случаях были идентифицированы составляющие табака, являющиеся причиной этого. Чтобы эффективно оценить токсические эффекты табачного дыма и определить основные возбудители, токсичные компоненты PREP и продукты сравнения должны быть идентифицированы и раскрыты. По большей части данных недостаточно для точного описания взаимосвязи употребления табака и формирования болезни на уровне детализации, который позволил бы установить все задействованные причинные агенты или точную взаимосвязь «доза-реакция».Характеристики этой взаимосвязи различаются в зависимости от болезней и зависят от различий в компенсации и фактическом воздействии, а также от межличностных или популяционных различий. Следовательно, надежность, с которой могут быть экстраполированы побочные эффекты или потенциал снижения вреда PREP, особенно при низких дозах, сомнительна. Кроме того, в настоящее время нет доказательств, подтверждающих пороговый уровень воздействия табака, ниже которого отсутствует риск для любого из рассмотренных результатов для здоровья.

Таким образом, текущих знаний о взаимосвязи «доза-реакция» достаточно для поддержки снижения риска за счет снижения воздействия в качестве цели для человека за счет использования этих различных продуктов.На сегодняшний день эти отношения не определены достаточно хорошо с точки зрения конкретных компонентов дыма, чтобы служить инструментом прогнозирования воздействия того или иного продукта на большинство результатов для здоровья. Тем не менее, сильная количественная взаимосвязь между воздействием табака на матери и частотой самопроизвольных абортов и задержки внутриутробного развития, приводящих к низкой массе тела новорожденного, была широко задокументирована. Это группа, в которой фактическое воздействие PREP на здоровье и потенциал снижения вреда могут быть оценены самым непосредственным образом.Дальнейшее обсуждение реакции на дозу можно найти в главах, посвященных конкретным заболеваниям, в разделе II (главы 12–16).

2. Хотя в настоящее время доступны суррогатные маркеры конкретных заболеваний-кандидатов, необходима дальнейшая валидация этих маркеров. Кроме того, необходимо разработать другие биомаркеры, которые точно отражают механизмы заболевания, чтобы они служили промежуточными индикаторами заболевания и риска заболевания.

Биомаркеры — это измерения любого компонента табака, компонента табачного дыма или эффекта такого соединения в жидкости организма (включая выдыхаемый воздух) или в органе.Хотя некоторые биомаркеры в настоящее время существуют, они требуют дальнейшей проверки, и необходимо разработать другие биомаркеры, которые обладают адекватной чувствительностью, специфичностью и ограниченной сложностью и которые количественно связывают биологическое воздействие табачного дыма или конкретных компонентов с индукцией или прогрессированием заболевания до появления клинически очевидного заболевания. Валидация и разработка биомаркеров обеспечат более прочную основу для проведения научных оценок и нормативных решений в отношении PREP.

Хотя в настоящее время нельзя использовать панель маркеров для оценки воздействия на здоровье использования PREP, потенциальные биомаркеры разрабатывались и разрабатываются для многих соответствующих категорий болезней. Комитет рекомендует продолжить изучение биомаркеров для различных категорий заболеваний, которые потенциально могут быть определены как промежуточные индикаторы болезни и риска заболевания. Например, возможные меры включают маркеры активации тромбоцитов и сосудов, перекисного окисления липидов и воспаления, которые могут быть связаны с показателями физиологии сердечно-сосудистой системы и, в конечном итоге, отражать риск клинического сердечно-сосудистого заболевания, а также маркеры воспаления в легких. болезнь.Кроме того, биомаркеры рака, которые могут указывать на ранние канцерогенные процессы и риск развития рака, включают, помимо прочего, маркеры генетического повреждения в крови, мокроте, моче и внутренних органах. Еще один потенциальный маркер — это измерение плотности костей, которое напрямую отражает тяжесть и риск остеопороза.

В идеале, набор поведенческих маркеров необходим для мониторинга моделей использования продуктов, что позволит клиницистам и исследователям измерить замену использования PREP для прекращения курения.Хотя комитет осознает сложность разработки набора таких поведенческих маркеров, они необходимы для всесторонней оценки PREP. Дальнейшую подробную стратегию исследования, касающуюся разработки биомаркеров, можно найти в главах, посвященных конкретным заболеваниям (главы 12–16), и главе об оценке воздействия и биомаркеров (глава 11).

3. Оценке PREP будет способствовать разработка соответствующих моделей на животных и анализов in vitro патогенеза болезней, связанных с табаком.

Модели на животных и тестирование in vitro могут способствовать оценке индивидуальных PREP и разработке научной основы для разработки и оценки продуктов снижения вреда. Такие исследования могут включать в себя культивирование клеток, исследования на животных и молекулярные исследования для документирования конкретных токсикантов как наиболее вероятных возбудителей, чтобы лучше определить патогенные эффекты воздействия табачного дыма, чтобы лучше объяснить взаимосвязь регресса риска заболевания и регрессии воздействия (доза-реакция взаимосвязи), а также для проверки биомаркеров воздействия и биологического эффекта.

Новые технологии геномики и протеомики обладают потенциалом для оценки и сравнения эффектов воздействия табака и использования PREP на трансляцию и экспрессию генов при неопластических и неопухолевых заболеваниях.

Комитет рекомендует конкретные применения доклинических моделей для конкретных болезней, связанных с употреблением табака. Например, комитет рекомендует использовать геномные и протеомные технологии для исследования влияния табачного дыма на трансляцию и экспрессию генов и его значимость для здоровья легких, сердечно-сосудистой системы и опухолей.Кроме того, необходимы точные модели для воздействия дыма или компонентов табака (включая никотин), воздействия PREP и их влияния на развитие ХОБЛ, сердечно-сосудистых заболеваний, новообразований и внутриутробных травм. Опять же, более подробную программу доклинических исследований можно найти в главах, посвященных конкретным заболеваниям, в разделе II (главы 12–16).

4. Для всесторонней оценки PREP необходимы краткосрочные клинические и эпидемиологические исследования на людях.

Некоторые эффекты PREP у людей можно оценить с помощью эпидемиологических исследований, измерения промежуточных маркеров заболевания или, в некоторых случаях, с помощью клинических исследований курильщиков, которые не хотят или не могут бросить курить, но желают использовать PREP (по сравнению с контрольной группой потребителей обычных табачных изделий).Комитет рекомендует использовать в этих исследованиях проверенные промежуточные биомаркеры воздействия болезни, чтобы оценить потенциальное снижение вреда в практических временных рамках для болезней, которые возникают только после длительного воздействия. Примеры возможных мер включают использование тестов функции легких или воспалительных изменений, оцениваемых с помощью бронхоальвеолярного лаважа, в качестве промежуточных маркеров ХОБЛ в интервенционных исследованиях.

Несколько заболеваний, связанных с курением, развиваются после относительно короткого воздействия (от нескольких недель до месяцев) и предоставляют возможность для тщательных краткосрочных клинических и эпидемиологических исследований.Эти заболевания включают задержку внутриутробного развития, ведущую к низкой массе тела при рождении, замедлению заживления ран или язв и, возможно, острому инфаркту миокарда. Исследования на людях также необходимы для оценки взаимосвязи индивидуальной истории курения, окружающей среды, пола, расы и других факторов (например, диеты) с риском и восприимчивостью к заболеванию. Дальнейшее обсуждение использования клинических исследований можно найти в разделе II (главы 12–16).

5. Долгосрочные эпидемиологические исследования популяций и / или пилотных групп пользователей должны отслеживать частоту заболеваний или других побочных эффектов.

Большинство заболеваний, связанных с табаком, развиваются клинически в течение многих лет, и единственный прямой и окончательный способ оценить ценность PREP для снижения вреда — это мониторинг результатов для здоровья потребителей по сравнению с соответствующими контрольными группами в течение длительного периода времени. Такой надзор может быть дополнением к другим эпидемиологическим исследованиям и должен включать в себя постоянные отчеты о курении, типах используемых продуктов и результатах для здоровья, а также периодический сбор биологических образцов для оценки биомаркеров в сегменте потребителей.Дальнейшее обсуждение можно найти в главе 6 и в главах, посвященных конкретным заболеваниям, в разделе II (главы 12–16).

Оценка риска

В отчете, опубликованном в 1983 г. комитетом Национального исследовательского совета, были изложены важные шаги и соображения при оценке риска.6 «Красная книга» определила важные шаги: идентификация опасности (вызывает ли токсикант неблагоприятный эффект?), Оценка доза-реакция (какова взаимосвязь между дозой и заболеваемостью людей?), оценка воздействия (какие воздействия в настоящее время испытываются или ожидаются при различных обстоятельствах?) и характеристика риска (какова предполагаемая частота неблагоприятного воздействия в данной популяции?).Характеристика риска предоставляет важную информацию для управления рисками, которая также включает соображения общественного здравоохранения, социальные, экономические и политические соображения.

Комитет не проводил формальную оценку рисков PREP. База знаний недостаточна для этого в настоящее время. Однако структура «Красной книги» очень полезна для представления работы комитета. В таблице 2 он используется для обобщения материала, обсуждаемого в главах 1, 5, 6, 7 и 8. Несмотря на то, что комитет пришел к выводу, что снижение вреда за счет использования PREP еще не продемонстрировано убедительно, таблица 2 иллюстрирует выводы и рекомендации комитета. являются ключом к сбору важных данных.Эта новая база знаний позволит более точно оценить снижение вреда как стратегию и PREP как инструменты снижения заболеваемости и смертности, связанных с курением.

Использование системы оценки риска при оценке снижения вреда от табака

На основании обширного обзора научной и медицинской литературы комитет пришел к выводу, что, хотя снижение вреда возможно, никакие доступные в настоящее время PREP не связаны с биологически значимым снижением воздействия или уменьшением вреда, связанного с табаком.Единственным узким исключением является использование никотиновой жевательной резинки в одном исследовании для поддержания отказа от курения, описанном в главах 8, 13 и 14. Без комплексной программы научных исследований, надзора и регулирования потенциальные преимущества снижения вреда останутся нереализованными. Более того, без такой комплексной программы PREP могут нанести вред как индивидуальному, так и общественному здоровью.

Традиционный табак | Keep It Sacred

Традиционный табак — это табак и / или другие смеси растений, выращенные или собранные и используемые американскими индейцами и коренными жителями Аляски в церемониальных или лечебных целях.

Традиционный табак веками использовался народами американских индейцев как лекарство, имеющее культурное и духовное значение. Многие племена сохраняют учения и рассказы о происхождении табака. ¹ Эти учения относятся к табаку в его чистом виде, сегодня известному как табачное растение Nicotiana rustica , и могут включать смеси других местных растений. ²

Традиционное приготовление и употребление табака варьируется в зависимости от племен и регионов, при этом коренные жители Аляски обычно не используют традиционный табак.Эти различия связаны с множеством различных учений среди племен Северной Америки. В некоторых культурах функции выращивания, сбора и приготовления традиционного табака выполняются конкретными группами людей, которые используют традиционные способы приготовления табака для определенного использования. Одно из распространенных учений заключается в том, что при работе с традиционным табаком важно сохранять хорошее отношение и мысли.

Традиционный табак — это лекарство, которое можно использовать по назначению для улучшения физического, духовного, эмоционального благополучия и благополучия общества.Его можно использовать как подношение Создателю или другому человеку, месту или существу. Подарок в виде традиционного табака является знаком уважения и может быть предложен при обращении за помощью, советом или защитой. Традиционный табак иногда используется непосредственно для лечения в традиционной медицине. Его можно сжечь в огне или закурить в трубке, но дым обычно не вдыхается.

Во многих учениях дым от сгоревшего табака имеет цель нести мысли и молитвы в духовный мир или к Создателю. ³ При правильном использовании традиционный табак не вызывает привыкания и не оказывает вредного воздействия на здоровье. ⁴

Забота и уважение, связанные с приготовлением и использованием традиционного табака, являются частью многовековых традиций, которые объединяют сегодняшнюю молодежь, взрослых и пожилых людей с молодыми людьми поколений назад. Постоянное употребление традиционного табака поддерживает хорошую жизнь и здоровое общество сегодня и для будущих поколений.

Традиционные табачные изделия

Табачный дым — источник токсичных продуктов реактивного гликирования

Реферат

Курильщики имеют значительно более высокий риск развития коронарных и цереброваскулярных заболеваний, чем некурящие.Конечные продукты усовершенствованного гликирования (AGE) представляют собой реакционноспособные сшивающие фрагменты, которые образуются в результате реакции восстанавливающих сахаров и аминогрупп белков, липидов и нуклеиновых кислот. AGE циркулируют в высоких концентрациях в плазме пациентов с диабетом или почечной недостаточностью и связаны с ускоренной васкулопатией, наблюдаемой у пациентов с этими заболеваниями. Поскольку отверждение табака происходит в условиях, которые могут привести к образованию продуктов гликирования, мы исследовали, могут ли табак и табачный дым генерировать эти реактивные частицы, которые увеличивают образование AGE in vivo .Наши результаты показывают, что продукты реактивного гликирования присутствуют в водных экстрактах табака и в табачном дыме в форме, которая может быстро реагировать с белками с образованием AGE. Эта реакция может быть ингибирована аминогуанидином, известным ингибитором образования AGE. Мы назвали эти продукты гликирования «гликотоксинами». Как и другие известные восстанавливающие сахара и продукты реактивного гликирования, гликотоксины образуют дым, реагируют с белками, проявляют специфическую флуоресценцию при сшивании с белками и являются мутагенными.Гликотоксины переносятся в сывороточные белки курильщиков. Уровни AGE-аполипопротеина B и сывороточного AGE у курильщиков сигарет были значительно выше, чем у некурящих. Эти результаты предполагают, что повышенное воздействие гликотоксина может способствовать увеличению случаев атеросклероза и высокой распространенности рака у курильщиков.

Было установлено, что курение является самой серьезной предотвратимой причиной заболеваемости и смертности в Соединенных Штатах (1). Только в 1985 году в Соединенных Штатах было зарегистрировано около 400 000 смертей, которые могли быть напрямую связаны с курением сигарет (2).Причиной номер один смерти, связанной с курением, является инфаркт миокарда, но курение также увеличивает риск смерти от заболеваний периферических сосудов, цереброваскулярных заболеваний, хронических обструктивных заболеваний легких (хронический бронхит и эмфизема), а также рака легких и других злокачественных новообразований (3, 4 ).

Механизм, с помощью которого курение сигарет способствует развитию атеросклероза, точно не известен; однако сообщалось, что у курильщиков повышен уровень холестерина, триглицеридов, липопротеинов очень низкой плотности и липопротеинов низкой плотности (ЛПНП) в сыворотке крови, а также снижен уровень липопротеинов высокой плотности и аполипопротеина A1 в сыворотке крови (5).Предполагается, что эти липидные и липопротеиновые нарушения действуют согласованно с вызванными курением изменениями гомеостаза сосудистой стенки и свертывания крови, что отрицательно влияет на целостность сердечно-сосудистой системы (6-8).

Курение сигарет также тесно связано с раком легких, мочевого пузыря, поджелудочной железы, пищевода и другими видами рака (1). Сигаретный дым содержит много канцерогенов. Например, бензепирен, 2-нафтиламин и 4-аминобифенил метаболизируются системой P450 организма с образованием реактивных веществ, которые могут химически взаимодействовать с нуклеотидами ДНК и вызывать мутации (9, 10).Недавно было показано, что реактивный метаболит бензепирена может мутагенизировать горячие точки в гене p53, которые были связаны с раком легких (11).

В предыдущей работе мы и другие (12-18) сообщили, что восстанавливающие сахара, такие как глюкоза, и другие продукты реактивного гликирования могут неферментативно реагировать с белками, липидами и нуклеиновыми кислотами с образованием структурно разнообразного класса молекул, известных как конечные продукты с улучшенным гликированием (AGE). В экспериментальных моделях образование AGE связано с атеросклеротическим заболеванием сосудов (19, 20) и мутациями ДНК (21–26).AGE возникают в результате последовательности химических стадий, которые начинаются со спонтанного неферментативного добавления восстанавливающих сахаров к аминогруппам с образованием обратимых оснований Шиффа. Первоначально эти аддукты перегруппировываются с образованием продуктов Амадори, но со временем происходят дальнейшие перегруппировки с образованием необратимо связанных фрагментов, которые проявляют флуоресценцию, свойства сшивания и желто-коричневый цвет (12, 27). Хотя химические структуры только нескольких AGE, которые образуют in vivo , были определены (28–31), химический путь, реакция Майяра, приводящая к образованию этих продуктов, хорошо известна химикам-пищевым химикам, которые определили структуры ряда небольших молекул, образующихся в процессе приготовления и обработки пищи (8, 31).Химики-пищевые химики продолжают интенсивно изучать продукты реакции Майяра, поскольку они ответственны за большую часть вкуса и аромата приготовленных продуктов.

Поскольку сушка табака также включает условия, способствующие химии Майяра, мы пришли к выводу, что табачные изделия могут быть значительным источником реагентов, способных стимулировать образование AGE и, таким образом, обеспечить возможный механизм, объясняющий высокую распространенность атеросклеротических сосудистых заболеваний и рака в курильщики. Мы описываем идентификацию производных табака продуктов реактивного гликирования в табачном дыме, которые могут легко способствовать образованию AGE in vitro и in vivo .

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

Приготовление водных экстрактов табака.

Табак (360 мг / мл) из сигарет экстрагировали в PBS в течение 1 ч при 25 ° C при перемешивании и стерилизовали фильтрованием через фильтрующий элемент Millex-HA с размером пор 0,45 мкм (Millipore).

Приготовление конденсата сигаретного дыма.

Устройство для курения «кальяна» было разработано и эксплуатировалось таким образом, чтобы струя дыма могла контактировать с водным раствором.Водный раствор (3 мл PBS) помещали в стеклянную колбу Эрленмейера на 25 мл с боковым отводом, а сигареты помещали в наконечник пипетки на 500 мкл, который проходил через отверстие в пробке колбы. Кончик пипетки на 500 мкл выходил за отверстие боковой части колбы, но не проникал в водный раствор. Как только устройство было собрано, к боковой части колбы был приложен вакуум (приблизительно 20 мм рт. Ст .; 1 мм рт. Ст. = 133 Па), и сигарета зажгла. В некоторых экспериментах наконечник пипетки был изменен: использовался кусок промышленного сигаретного фильтра размером 2 × 2 мм, чтобы закупорить наконечник наконечника пипетки, а затем 500 мг пустого вещества, гидрохлорида аминогуанидина или сульфата натрия помещали между небольшими фильтрами. кусок фильтра и сигарету.Предварительно прикрепленные фильтры промышленного производства не удаляли с сигарет ни в одном из экспериментов. Выкуривали пять сигарет в каждую аликвоту PBS объемом 3 мл. Полученный водный конденсат сигаретного дыма фильтровали через фильтрующий элемент Millex-HA с размером пор 0,45 мкм (Millipore) перед использованием.

Планшеты для микротитрования, содержащие иммобилизованный коллаген из сухожилия хвоста крысы (Collaborative Research), блокировали 50 мкл TPBS (PBS / 0.05% Tween 20) в течение 1 ч при 25 ° C, инкубировали с серийными разведениями либо табачного экстракта, либо раствора дым-PBS в течение 18 часов при 37 ° C, промывали пять раз TPBS, инкубировали с кроличьей поликлональной сывороткой против AGE. (pAb RU 9.9.93) в течение 1 ч, пять раз промывали TPBS и, наконец, инкубировали с козьим антителом против кроличьего IgG, конъюгированным с щелочной фосфатазой (Sigma). Связанные гликотоксины выявляли при добавлении 250 мкг / мл p -нитрофенилфосфата в 100 мМ диэтаноламина, pH 9,5, в течение 45 мин. Оптическую плотность считывали при 405 нм на планшет-ридере для ELISA (Dynatech, MR 5000).Программа biolynx 2.0 использовалась для построения стандартной кривой и экстраполяции данных.

Активность перекрестного связывания гликотоксинов.

Раствор PBS, содержащий 2 мМ EDTA, подвергали воздействию сигаретного дыма, как описано выше, для получения конденсата дыма. Сорок миллиграммов РНКазы A, растворенной в PBS / EDTA, содержащем 0, 5 или 50 мМ аминогуанидина, подвергали воздействию конденсата, который содержал эквивалент восьми сигарет, и инкубировали при 37 ° C в темноте в течение 0, 5, 8, 24, 48 и 72 ч.Несвязанные и низкомолекулярные материалы удаляли с помощью ультрафильтрационного фильтра Centricon 10 (Amicon). Для оценки образования димеров РНКазы образцы подвергали прерывистой SDS / PAGE в восстанавливающих условиях с использованием 5% геля для укладки и 12% геля для разделения и переноса на нитроцеллюлозную бумагу. Блот блокировали блокирующим раствором (PBS / 5% обезжиренное молоко / 1% BSA / 0,2% Tween 20) в течение 1 часа при 20 ° C, инкубировали с кроличьими антителами к рибонуклеазе A, конъюгированными с пероксидазой хрена (Biodesign International, Kennebunkport, ME) разводили в блокирующем растворе в течение 45 мин, тщательно промывали PBS / 0.2% Tween 20, разработанный методом усиленной хемилюминесценции (Amersham) в соответствии с инструкциями производителя. Полученный флюорограф был обработан с помощью Adobe Photoshop и денситометрических измерений изображений (сглаженных, с повышенной резкостью и контрастностью), определенных с помощью программы nih image.

Определение флуоресценции.

Для оценки специфической флуоресценции РНКазы A-AGE, испускание при 440 нм при возбуждении на 370 нм с использованием флуоресцентного спектрометра LS 50B (Perkin-Elmer) было измерено в образцах РНКазы, подвергнутых воздействию конденсата сигаретного дыма (подготовка описана выше) .Все значения флуоресценции были измерены при концентрации белка 0,5 мг / мл.

исследований мутагенности.

Анализ мутагенности выполняли, как описано Maron и Ames (32). Вкратце, штаммов Salmonella TA98, TA100, TA1535 и TA1537 (подарок Б. Н. Эймса, Калифорнийский университет, Беркли) культивировали в течение ночи при 37 ° C в питательном бульоне Oxoid No. 2, инкубировали с серийными разведениями конденсата сигаретного дыма в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, pH 7.4, в трех экземплярах в течение 1 ч при 25 ° C, а затем высевали на чашки с минимальным содержанием глюкозы в концентрации 0,1 мл на чашку. Затем планшеты инкубировали в течение 48 ч при 37 ° C и подсчитывали количество ревертантных мутантов на каждом планшете.

Измерение сывороточного AGE-аполипопротеина B (ApoB).

Количество AGE-модифицированного ApoB (AGE-ApoB) измеряли в сыворотке крови человека с помощью сэндвич-ELISA с использованием моноклонального антитела захвата против AGE и конъюгата анти-ApoB-пероксидаза хрена с использованием модификации ранее описанного анализа (33) .Образцам было присвоено значение из стандартной кривой и выражено в единицах ApoB-AGE / мл сыворотки.

AGE Измерение.

AGE в сыворотке крови человека измеряли с помощью конкурентного ELISA с использованием AGE-специфического моноклонального антитела (подкласс IgG1), повышенного до полученного из глюкозы эпитопа AGE, как описано (34). Иммунореактивность AGE определяли в трех лунках для образцов, которые были серийно разведены, чтобы попасть в линейный диапазон анализа. Единицы AGE рассчитывались относительно синтетического стандарта AGE-BSA (33).Чувствительность анализа составляла 5 единиц AGE / мл, а коэффициент вариации внутри и между анализами составлял 5 и 8% соответственно. Люди, использованные в этом исследовании, не имели в анамнезе диабета, гиперлипидемии, почечных или сосудистых заболеваний.

РЕЗУЛЬТАТЫ

Водные экстракты табака и сигаретного дыма содержат гликотоксины, которые способствуют образованию AGE

Первоначально мы экстрагировали водорастворимые продукты реактивного гликирования из листьев табака, вымачивая их в PBS.Чтобы проверить, способны ли эти табачные изделия индуцировать образование AGE по оценке с помощью специфического иммуноанализа, мы добавляли водный экстракт на покрытые коллагеном пластины на 18 часов. Присутствие вновь образованных AGE на молекулах коллагена обнаруживали с помощью специфических поликлональных антител против AGE. Фиг.1 A показывает сравнение образования AGE, индуцированного табачными экстрактами восьми марок американских сигарет. Все протестированные бренды способствовали образованию фрагментов AGE. Интересно отметить, что марка E, «легкий» эквивалент сигарет марки D, содержала больше активности, чем марка E.Этот результат, который постоянно воспроизводился при сравнении других «обычных» и «легких» брендов, вероятно, отражает разницу в обработке табака, а также предполагает, что содержание «смол» не зависит от содержания гликотоксина.

Гликотоксины в экстракте табачных листьев и конденсате сигаретного дыма способствуют образованию AGE in vitro. Анализ образования AGE in vitro проводили на водных экстрактах табачных листьев восьми различных марок американских сигарет в концентрации, эквивалентной 90 мг табака / мл ( A ), и на основном табачном дыме в концентрациях от 3 до 0.375 г табака / мл ( B ). Каждая полоска представляет разные марки американских сигарет. Марка E является эквивалентом марки D для легкой марки. Образование AGE было выявлено путем инкубации с кроличьими анти-AGE-специфическими поликлональными антителами. ( C ) Образование AGE подавлялось пропусканием основного потока сигаретного дыма через стандартный коммерческий фильтр + 500 мг аминогуанидина (открытая полоса), но не пропусканием его через стандартный коммерческий фильтр (сплошной столбик) или стандартный коммерческий фильтр + 500 мг сульфата натрия (полосатая полоса).

Чтобы определить, могут ли реактивные предшественники AGE улетучиваться, мы протестировали конденсат сигаретного дыма в анализе образования AGE. Для сбора любых водорастворимых летучих реактивных предшественников AGE мы создали курительный аппарат, в котором дым от горящей сигареты втягивался в колбу, содержащую раствор PBS. В попытке смоделировать воздействие сигаретного дыма на ткань легких, дыму позволяли контактировать с PBS на дне колбы, но через раствор не барботировали.Сразу после приготовления помещенный в дым PBS (конденсат сигаретного дыма) добавляли в лунки для микротитрования, покрытые коллагеном, и оставляли реагировать в течение ночи. Как и водные экстракты листьев табака, конденсат сигаретного дыма способен быстро индуцировать образование AGE, которые распознаются кроличьей поликлональной антисывороткой против AGE. Производство AGE сигаретным дымом зависело от концентрации (фиг.1, B ) и времени (данные не показаны), и его можно было ингибировать дозозависимым образом путем добавления растворимого ингибитора AGE, аминогуанидина, непосредственно в лунки ( данные не показаны) или пропусканием дыма через твердый столб аминогуанидина (рис.1 С ). Пропускание дыма через колонку с сульфатом натрия не влияло на способность гликотоксинов образовывать AGE (рис. 1 C ). Сульфат натрия использовали в качестве контроля площади поверхности соли аминогуанидина. Конденсат сигаретного дыма примерно в 10 раз менее активен в стимулировании образования AGE, чем водные табачные экстракты, что позволяет предположить, что либо часть восстанавливающих сахаров разрушается в процессе горения, либо система улавливания летучих AGE неэффективна.AGE-образующая активность, обнаруженная как в экстракте табачных листьев, так и в конденсате сигаретного дыма, чрезвычайно лабильна: ее нельзя обнаружить в этом анализе, если растворы замораживаются при -20 ° C или хранятся при комнатной температуре или 0 ° C более 5 раз. час

Способность гликотоксинов сигаретного дыма индуцировать образование AGE также оценивали путем измерения характерной картины флуоресценции AGE на РНКазе А, подвергнутой воздействию конденсата сигаретного дыма. Как показано на фиг. 2 A , РНКаза A, подвергнутая воздействию конденсата сигаретного дыма в течение увеличивающихся периодов времени, показывала зависящее от времени увеличение флуоресценции AGE-типа (испускание на 410 нм после возбуждения на 370 нм).Эмиссия флуоресценции достигала насыщения через 24 часа и подавлялась аминогуанидином.

Предыдущие исследования показали, что редуцирующие сахара in vitro могут реагировать с ДНК и вызывать мутации как в бактериальных клетках, так и в клетках млекопитающих.Более того, наличие высоких концентраций редуцирующего сахара, глюкозо-6-фосфата, в Escherichia coli приводит к увеличению частоты мутаций (23). Аналогичным образом, у плодов мышей, подвергшихся воздействию высоких концентраций сахара в крови, вызванных материнским диабетом, частота мутаций увеличивалась в 2 раза по сравнению с плодами, полученными от нормогликемических матерей (26).

В настоящих экспериментах мы подвергли ряд штаммов Salmonella typhimurium (TA98, TA100, TA1535 и TA1537) воздействию конденсата сигаретного дыма в типичном тесте Эймса.Активная мутационная активность была отмечена у штамма ТА98, но не у других штаммов (рис. 3). Воздействие на TA98 увеличивающихся количеств свежеприготовленного конденсата сигаретного дыма приводит к дозозависимому увеличению количества мутаций. Когда TA98 подвергается воздействию мутагенного агента, который может вызвать мутацию сдвига рамки считывания, он будет расти на среде с дефицитом гистидина. Прохождение дыма через сухую колонку аминогуанидина перед контактом с PBS удаляло карбонилсодержащие молекулы и уменьшало количество ревертантных мутантов.Эта деятельность могла быть упущена из виду в прошлом, поскольку в предыдущих исследованиях обычно использовались экстракты дыма, приготовленные в органических растворителях, и анализировалась мутагенная активность через значительный период времени. Лабильность гликотоксинов в водных экстрактах требует быстрого анализа мутагенной активности. Конденсаты сигаретного дыма на водной основе, которым давали инкубироваться при комнатной температуре или на льду более 5 ч, больше не были мутагенными.